Contribution à l'étude du système lipolytique d'un animal primitif marin: le crabe vert

• Introduction
  
• I- Les enzymes lipolytiques
  
  • 1- Introduction
    
  • 2- Cinétique enzymatique de la lipolyse
    
• II- Les lipases du monde marin
  
• III- Les Crabes
  
  • 1- Position systématique
    
  • 2- Morphologie des crabes
    
  • 3- Système digestif
    
• I- Matériel
  
  • 1- Réactifs
    
  • 2- Animaux
    
  • 3- Protéines
    
  • 4- Supports chromatographiques
    
  • 5- Appareillage
    
• II- Méthodes
  
  • 1- Dosage de l'activité lipolytique
    
  • 2- Dosage de l'activité phospholipasique
    
  • 3- Détermination de la concentration en protéines
    
  • 4- Effet de la température sur l'activité lipasique
    
  • 5- Effet du pH sur l'activité lipasique
    
  • 6- Stabilité de la lipase de crabe en fonction de la température
    
  • 7- Stabilité de la lipase de crabe en fonction du pH
    
  • 8- Effet des ions calcium
    
  • 9- Effet du détergent naturel sur l'activité lipasique
    
  • 10- Dosage des sels biliaires dans l'hépatopancréas de crabe
    
    • a) Préparation de la solution (Enzyme/NAD+) au moment de l'expérience
      
    • b) Dosage des échantillons
      
  • 11-Analyse des protéines par électrophorèse et immunorévélation
    
• I- Niveau des enzymes lipolytiques et de la colipase dans l'hépatopancréas de crabe vert
  
  • 1- Mise au point des activités lipasique et phospholipasique dans l'homogénat
    
  • 2- Recherche de la colipase dans l'hépatopancréas de crabe
    
  • 3- Recherche de sels biliaires dans l'hépatopancréas de crabe
    
• II. Purification de la lipase de crabe vert
  
  • Préparation de l'homogénat
    
  • 1- Traitement à 60°C
    
  • 2- Chromatographie échangeuse d'anions
    
  • 3- Précipitation au sulfate d'ammonium
    
  • 4- Filtration sur Séphacryl S-200
    
  • 5- Chromatographie échangeuse d'anions : Mono Q-Sépharose
    
  • 6- Electrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS
    
  • 7- Bilan de purification de la lipase de crabe vert
    
• III- Caractérisation biochimique de la lipase digestive de crabe vert
  
  • 1- Activité lipasique en fonction de la température
    
  • 2- Cinétique d'hydrolyse de la tributyrine et de l'huile d'olive
    
  • 3- Effet du pH sur l'activité de la LDC
    
  • 4- Stabilité de la LDC en fonction de pH
    
  • 5- Effet de la température sur l'activité de la LDC
    
  • 6- Stabilité de la LDC en fonction de la température
    
  • 7- Effet de calcium sur l'activité de la LDC
    
  • 8- Effet d'un composé amphipatique sur l'activité de la LDC
    
  • 9- Immunoréactivité des anticorps polyclonaux anti-SDL et anti-TPL avec la LDC
    
• Conclusion et Perspectives
  
• Résumé
  
• ABREVIATIONS