Introduction
Les lipases ou triacylglycérol hydrolases
(E.C.3.1.1.3), largement répandues chez tous les êtres vivants
(Taipa et al., 1992), ont l'avantage d'être disponibles en
grande quantité et à faible coût, d'être
sélectives vis-à-vis de leurs substrats et de ne pas
nécessiter de cofacteurs. Ces enzymes présentent de ce fait une
grande importance en biotechnologie. Elles sont de plus en plus
utilisées dans les domaines médical, thérapeutique,
chimique et alimentaire (Ghandi, 1997). L'étude de ces enzymes a
contribué à l'élaboration d'une enzymologie interfaciale,
la catalyse se produit en milieu hétérogène à
l'interface huile-eau (Verger et al., 1973 ; Ransac et
al., 1990). Il en résulte que les propriétés
biochimiques de ces enzymes dépendent autant de la
« qualité » de cette interface que de certains
paramètres classiques tels que le pH ou la force ionique.
Chez les animaux supérieurs, plusieurs lipases sont
produites à différents niveaux du tube digestif. Ces lipases
jouent un rôle fondamental dans le métabolisme lipidique en
permettant l'absorption des lipides alimentaires.
La plupart des recherches actuelles, réalisées
sur la famille génétique des lipases sont focalisées sur
les animaux supérieurs. On ignore jusqu'à ce jour le mode
d'action du système lipolytique des animaux primitifs marins. Pour
cette raison nous nous sommes intéressés, dans ce présent
travail, à la purification et à la caractérisation
biochimique de la lipase de crabe vert impliquée dans la digestion des
lipides alimentaires.
La caractérisation biochimique de la lipase digestive
de crabe, nous permettra de la comparer avec les lipases connues des animaux
supérieurs et de l'exploiter si elle présentera des
caractéristiques nouvelles recherchées.
I- Les enzymes
lipolytiques
1- Introduction
Les enzymes lipolytiques forment une classe d'enzymes
parfaitement solubles dans l'eau. Elles sont responsables de l'hydrolyse des
lipides. Elles agissent sur des substrats lipidiques insolubles dans l'eau mais
qui s'organisent spontanément au contact de l'eau pour former des
émulsions, des micelles, des liposomes ou des films monomoleculaires.
Les lipases ou triacylglycerols acylhydrolases (EC.3.1.1.3)
forment une famille hétérogène d'enzymes qui
catalysent, en milieu hétérogène, la réaction
d'hydrolyse des liaisons esters de triacylglycerols.
Les lipases sont des estérases capables d'hydrolyser
des substrats insolubles tels que les glycérides à longues
chaînes (Verger, 1985).
Leur polarité vient du fait de leur comportement
cinétique (Sarda et Desnuelle, 1958) car l'hydrolyse des lipides
insolubles dans l'eau est beaucoup plus rapide lorsqu'elles sont sous formes de
micelles, d'où le phénomène d'activation interfaciale qui
les différencie des estérases.
Figure 1 : liaisons esters carboxyliques des
triacylglycérols hydrolysables par les lipases
| 
