Validation de procédé de production d'antigène viral sur culture cellulaire bhk21

• DEDICACE
  
• REMERCIMENTS
  
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  • I. Maladie de la rubéole
    
  • II. Caractéristiques cliniques
    
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  • III.Infection par le virus de la rubéole
    
    • III.1.La rubéole acquise
      
    • III.2.Réinfection rubéolique
      
    • III.3.La rubéole congénitale
      
    • IV.2.Classification du virus de rubéole
      
    • IV.3.Morphologie du virus
      
    • IV.4.Type et classification antigénique
      
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      • IV.4.1.Protéines non structurales
        
      • IV.4.2.Protéines structurales
        
    • IV.5.Génome du virus de la rubéole
      
    • IV.6.Réplication du virus
      
  • V. Réponse immunitaire
    
  • VI. Epidémiologie et prévention
    
    • VI.1. Epidémiologie
      
    • VI.2.Prévention et vaccination
      
      • VI.2.1.Prévention
        
      • VI.2.2.Vaccination
        
  • VII. Cellule BHK21 et multiplication du virus de la rubéole a l'échelle cellulaire
    
    • VII.1.Cellule BHK21
      
    • VII.2. Multiplication du virus de la rubéole a l'échelle cellulaire
      
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  • VIII. Diagnostic
    
    • VIII.1.Diagnostic direct
      
      • VIII.1.1. Recherche du virus par isolement en culture de cellules
        
      • VIII.1.2. Détection du génome viral
        
    • VIII.2. Diagnostic indirect
      
      • VIII.2.1.Centrifugation en gradient de saccharose
        
      • VIII.2.2. Mesure de l'avidité spécifique des IgG
        
      • VIII.2.3. ELISA (Enzyme-Linked-Immuno Sorbent Assay)
        
      • VIII.2.4. Agglutination sur latex
        
      • VIII.2.5.Hémolyse radiale (HR)
        
      • VIII.2.6.Test de neutralisation
        
      • VIII.2.7. Technique de fixation du complément
        
      • VIII.2.8. Test d'Inhibition d'hémagglutination (IHA)
        
      • VIII.2.9. Hémagglutination virale
        
  • I. Préparation du local et matériel
    
    • I.1. Préparation du local
      
      • I.1.1. Stérilisation de l'atmosphère
        
    • I.2. Préparation du matériel
      
      • I.2.1. Stérilisation du matériel
        
  • II. Matériel utilisé pour la production et la validation de l'hémagglutinine (HA) rubéolique
    
    • II.1. Appareillage et matériel technique de la culture cellulaire et test ELISA indirect de type IgG
      
    • II.2. Réactifs chimiques et Tampons pour la production et validation de l'HA rubéolique
      
  • III. Milieu pour culture cellulaire
    
    • III.1. Milieu DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)
      
    • III.2. Additifs pour milieu DMEM
      
      • III.2.1. La trypsine
        
      • III.2.2. Préparation du milieu de culture par la méthode de stérilisation à froid
        
    • III.3. Contrôle de stérilité du milieu de culture et des additifs
      
  • IV. Production de l'HA rubéolique
    
    • IV.1. Matériel biologique
      
    • IV.2. Procédé de production de l'HA rubéolique par la technique de culture cellulaire
      
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      • IV.2.1. Décongélation des cellules BHK21
        
      • IV.2.2. Les différents passages lors de la culture des cellules BHK21
        
  • V. Inoculation du virus M33
    
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    • V.1. Récolte
      
    • V.2. Extraction de l'HA rubéolique
      
    • V.3. Titrage de l'HA rubéolique par la technique d'hémagglutination Après la production de l'HA rubéolique vient l'étape du titrage.
      
      • V.3.1. Etape de titrage de l'HA
        
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  • VI. Validation du procédé de production de l'HA rubéolique par le test ELISA indirect type IgG
    
    • VI.1 Matériel biologique
      
    • VI.2. Principe et étapes du test ELISA
      
      • VI.2.1. Principe
        
      • VI.2.2. Réalisation du test ELISA indirect type IgG
        
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