VII. Cellule BHK21 et multiplication du virus de la
rubéole a l'échelle cellulaire
VII.1.Cellule BHK21
La souche BHK21 (baby hamster kidney ) a été
isolée à partir du rein de hamster syrien. Elle possède
plusieurs caractéristiques et propriétés qui font d'elle
un support génétique facile dans son utilisation:
? Elle doit être facilement clonable afin d'obtenir des
lignées provenant d'une cellule isolée.
? Elle doit posséder une hérédité
stable, qui évolue peu au cours des divisions successives.
? Elle se cultive à la fois en tapis et en suspension.
Le caryotype de la souche BHK21 est stable. Il est
très proche de celui de l'animal. Cette souche possède en total
entre 43 à 44 chromosomes dans son caryotype assez difficile à
distinguer par les techniques de coloration homogène.
Les conditions optimales de clonage correspondent à un
pH de 7,2 et une température de 37°C.
Les milieux MEM et 199 ne permettent pas un clonage correct
de la souche BHK21 (efficacité d'étalement inférieure
à 1/100). Seul le milieu MEM complémenté avec les acides
aminés non essentiels permet cette croissance clonale en présence
de sérum foetal bovin. Le temps de dédoublement des cellules est
14 heures (Caboche et al., 1973).
Les cellules BHK21 se multiplient rapidement au cours de 48
premières heures et font une couche complète et confluente pour
une incubation de 72 heures (Rahman et al., 2007).
VII.2. Multiplication du virus de la rubéole a
l'échelle cellulaire
La multiplication du virus se fait dans le cytoplasme. L'ARN
du virus va servir de messager. Il y a formation d'un intermédiaire de
réplication. L'ARN est encapsidé et les virions acquièrent
leur peplos par le phénomène de bourgeonnement grâce
à la membrane
ISTMT-IPT 2012-2013
cytoplasmique ou dans les vacuoles intracytoplasmiques et
libérées dans le milieu extérieur.
L'hémagglutinine présenté sur le peplos
apparait sur les bourgeons de la membrane cytoplasmique. Dans ce cas il est
possible de faire une hemadsorption surtout sur les cellules VERO
(lignée cellulaire provenant de rein de singe cercopithèque) ou
BHK21 (Huraux et al., 1991).
Figure 8: Détection du virion de la
rubéole dans
les cellules BHK21 (Risco et al., 2003) Figure
9: Cellules VERO et BHK21 infectées par
le virus de la rubéole. (Risco et al., 2003)
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