Validation de procédé de production d'antigène viral sur culture cellulaire BHK21

• DEDICACE
  
• REMERCIMENTS
  
• Partie bibliographique
  
• Annexes
  
• INTRODUCTION
  
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• I. Maladie de la rubéole
  
• II. Caractéristiques cliniques
  
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• III.Infection par le virus de la rubéole
  
  • III.1.La rubéole acquise
    
  • III.2.Réinfection rubéolique
    
  • III.3.La rubéole congénitale
    
  • IV.2.Classification du virus de rubéole
    
    • IV.3.Morphologie du virus
      
    • IV.4.Type et classification antigénique
      
    • 
      
    • IV.4.1.Protéines non structurales
      
    • IV.4.2.Protéines structurales
      
  • IV.5.Génome du virus de la rubéole
    
  • IV.6.Réplication du virus
    
• V. Réponse immunitaire
  
• VI. Epidémiologie et prévention
  
  • VI.1. Epidémiologie
    
  • VI.2.Prévention et vaccination
    
    • VI.2.1.Prévention
      
    • VI.2.2.Vaccination
      
• VII. Cellule BHK21 et multiplication du virus de la rubéole a l'échelle cellulaire
  
  • VII.1.Cellule BHK21
    
  • VII.2. Multiplication du virus de la rubéole a l'échelle cellulaire
    
• 
  
• VIII. Diagnostic
  
  • VIII.1.Diagnostic direct
    
    • VIII.1.1. Recherche du virus par isolement en culture de cellules
      
    • VIII.1.2. Détection du génome viral
      
  • VIII.2. Diagnostic indirect
    
    • VIII.2.1.Centrifugation en gradient de saccharose
      
    • VIII.2.2. Mesure de l'avidité spécifique des IgG
      
    • VIII.2.3. ELISA (Enzyme-Linked-Immuno Sorbent Assay)
      
    • VIII.2.4. Agglutination sur latex
      
    • VIII.2.5.Hémolyse radiale (HR)
      
    • VIII.2.6.Test de neutralisation
      
    • VIII.2.7. Technique de fixation du complément
      
    • VIII.2.8. Test d'Inhibition d'hémagglutination (IHA)
      
    • VIII.2.9. Hémagglutination virale
      
• I. Préparation du local et matériel
  
  • I.1. Préparation du local
    
    • I.1.1. Stérilisation de l'atmosphère
      
  • I.2. Préparation du matériel
    
    • I.2.1. Stérilisation du matériel
      
• II. Matériel utilisé pour la production et la validation de l'hémagglutinine (HA) rubéolique
  
  • II.1. Appareillage et matériel technique de la culture cellulaire et test ELISA indirect de type IgG
    
  • II.2. Réactifs chimiques et Tampons pour la production et validation de l'HA rubéolique
    
• III. Milieu pour culture cellulaire
  
  • III.1. Milieu DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)
    
  • III.2. Additifs pour milieu DMEM
    
    • III.2.1. La trypsine
      
    • III.2.2. Préparation du milieu de culture par la méthode de stérilisation à froid
      
  • III.3. Contrôle de stérilité du milieu de culture et des additifs
    
• IV. Production de l'HA rubéolique
  
  • IV.1. Matériel biologique
    
  • IV.2. Procédé de production de l'HA rubéolique par la technique de culture cellulaire
    
    • 
      
    • IV.2.1. Décongélation des cellules BHK21
      
    • IV.2.2. Les différents passages lors de la culture des cellules BHK21
      
• V. Inoculation du virus M33
  
  • 
    
  • V.1. Récolte
    
  • V.2. Extraction de l'HA rubéolique
    
  • V.3. Titrage de l'HA rubéolique par la technique d'hémagglutination
    
    • V.3.1. Etape de titrage de l'HA
      
• 
  
• VI. Validation du procédé de production de l'HA rubéolique par le test ELISA indirect type IgG
  
  • VI.1. Matériel biologique
    
  • VI.2. Principe et étapes du test ELISA
    
    • VI.2.1. Principe
      
    • VI.2.2. Réalisation du test ELISA indirect type IgG
      
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• 
  
• Annexe 1: Préparation des milieux de culture
  
• Annexe 2: Préparation de milieu pour contrôle de stérilité
  
• Annexe 3: Préparation des Tampons pour extraction de l'HA
  
• Annexe 4: Préparation des Tampons pour le titrage de l'HA
  
• Annexe 5: Préparation et fonction des Tampons ELISA