Memoire Online - Isolement et identification acetobacter aceti à partir d'un vinaigre biologique

Le tableau 21 suivant résume les observations microscopiques de coloration de Gram correspondant aux colonies décrites précédemment

Tableau 21: Résultats obtenus d'observations de coloration de Gram àG100x :

Milieu	Type de colonies	Formes et association	Types de Gram	Photo
A1	Opaque et bombée	Forme variable (bacille transformé en coccobacille. Mode de groupements : Isolés, diplobacille et en amas.	négative
A2	Opaque, brillante et convexe	Forme de coque. Mode de groupements : Isolés, diplocoques, en amas et en chainette.	négative
A3	Opaque brillante et convexe	Forme de coque. Mode de groupements : Isolés, diplocoques, en amas et en chainette.	négative
A4	Opaque brillante et convexe	Forme de coque. Mode de groupements : Isolés, diplocoques, en amas et en chainette.	négative

A5	Opaque brillante et convexe	Forme de coccobacille. Mode de groupements : Isolé, diplobacille et en chainette.	négative
A6	Opaque brillante et bombée	Forme de coque. Mode de groupements : Isolés, diplocoques, en amas et en chainette.	négative
A7	Opaque brillante et convexe	Forme de coque. Mode de groupements : Isolés, diplocoques, en amas et en chainette.	négative
A8	Opaque brillante et convexe	Forme de coque. Mode de groupements : Isolés, diplocoques, en amas et en chainette.	négative
A9	Opaque brillante et convexe	Forme de coque. Mode de groupements : Isolés, diplocoques, en amas et en chainette.	négative

L'examen microscopique de ces souches après coloration de Gram, les bactéries apparaissent sous forme de coque et coccobacille de taille variable, de couleur rose, donc ces bactéries sont de Gram négative et elles sont regroupent en forme isolées ou en chaînette.

Pour Soheir (2012), l'examen microscopique des colonies bactérienne acétique isole dans le thé de Kombicha en Egypte donne la même forme et Gram avec nos résultats.

Et aussi, pour Aboulala ( 2008), cité par Khelif ( 2016), l'examen microscopique des colonies isolées dans le vinaigre de Daglet-Nour et Hchef Daglet-Nour de différentes régions Ouargla, Ghardaïa et Touggourt, et Khelif ( 2016), l'examen microscopique des colonies isolées à partir des échantillons du vinaigre traditionnel de datte (Hamraya et Déchet Daglet-Nour) du Sahara Septentrional Est Algérien, donne les mêmes formes, regroupements et Gram avec nos résultats.

Pour Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017), l'examen microscopique des colonies isolées à partir des échantillons du vinaigre traditionnel du vinaigre traditionnel des dattes cultiva Hamraya donne la même forme et Gram avec nos résultats.

Pour Frouhat Aicha et Drib Amina (2017), l'examen microscopique des colonies isolées à partir des échantillons du vinaigre traditionnel des dattes cultiva Deglt-Nour donne la même forme et Gram avec nos résultats.

Les résultats obtenus suite aux différents tests physiologiques et biochimiques sur les colonies isolées et purifiées sont illustrés dans le tableau 22

Tableau 22: Identification Biochimiques de différentes souches isolées sur différents milieux

*La recherche de la catalase est un test fondamental pour l'identification des souches, après la réalisation du test catalase, nos souches d'Acétobacter sont de catalase positive (production d'O2 et l'apparition de bulles).

D'après nos résultats on observe que tous les 09 isolats sont catalase positifs selon la photo dans le tableau 9.

L'enzyme catalase permet la décomposition de l'eau oxygénée (l2O2) produit en fin de la chaine d'oxydoréduction en O2 et l2O (Guiraud, 2012).

Pour Khelif (2016), les isolats d'Acétobacter issues du vinaigre traditionnel de dattes (Hamraya et Déchet Daglet-Nour) d'Ouargla, présentent un catalase positive comme nos résultats. Pour (Arifuzzaman et al., 2014) tous les isolats d'Acétobacter issues de la canne à sucre et des fruits pourris présentent un catalase positive comme nos résultats. L'enzyme catalase permet la décomposition de l'eau oxygénée (l2O2) produit en fin de la chaine d'oxydoréduction en O2 et l2O (Guiraud, 2012).

Pour Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017), trouvé trois souches des bactéries acétique sont catalase positif qui était isolait à partir du vinaigre traditionnel des dattes cultivas Hamraya comme nos résultats.

Beheshti-Mall et Shafiee (2012), toutes les souches d'acétobacter isole a partir de pêche iranienne sont de catalase positive comme nos résultats.

* Pour la culture sur milieu de loyer pendant 72h à 30°C, test de l'utilisation des sels ammoniacaux comme seule source d'azote les résultats montre que les deux isolats A1 et A3 sont de Hoyer+, Donc ces isolats peuvent se développer en présence d'ammonium comme seul source d'azote et de 3% d'éthanol (loyer positif) (Photo dans le tableau 22).

Pour Kader et al., (2008), trouvent que les bactéries acétiques isolée a partir de noix de coco sont de Hoyer + donc il ya le développement des souches qui sont utilises des sels ammoniacaux comme source d'azote est la résultat se traduit par l'apparition de turbidité de milieu, ce résultat est proche à nos résultat.

Pour Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017), trouvé deux souches des bactéries acétique qui sont isolées à partir du vinaigre traditionnel des dattes cultivas Hamraya ont teste Hoyer+.

Ce sont les résultats obtenus par Khelif (2016), pour les souches d'Acétobacter, isolées du vinaigre traditionnel de dattes (Hamraya et Déchet Deglet-Nour) de Ouargla trouvé comme nos résultats.

Résultats négatifs d'A4 (présence de trouble dans le milieu HF#177; ammonium) cet isolat n'utilise pas des sels ammoniacaux comme seule source d'azote ; il utilise le et d'autres comme source d'azote. Et les isolats A2, A5, A6, A7, A8, A9 n'utilisent pas l'ammonium comme source d'azote « absence de trouble le milieu HF#177; ammonium ».

* Après la réalisation du première test du pouvoir suroxydant, réalisé sur milieu de Carr et permet de mettre en évidence la différence entre les bactéries du genre Acétobacter et celles du genre Gluconobacter, le résultat obtenu est comme la suite :

Le virage de l'indicateur coloré du bleu-vert au jaune sous l'effet de la production d'acide acétique, puis la réversion au bleu-vert, ceci indique que ces bactéries sont du genre Acétobacter car ce genre à la capacité d'oxyder l'acide acétique en CO2 et H2O. Alors que et le virage de l'indicateur coloré au jaune du vert de bromocrésol est spécifique aux bactéries du genre Gluconobacter, puisque se genre à la capacité de produire de l'acide acétique (Guiraud, 1998 et Girard et Rougieux, 1958).

Pour les isolats 01, 03, 04, 05, 06, 07,08 et 09 on remarque le virage de couleur au bleu après 48h qui ont pouvoir suroxydant positif, par à contre l'isolat 02 à négative (pas de changements de couleur) selon la photo dans le tableau (22).

Alors que les résultats de Aboulala (2008), des colonies isolées dans les vinaigres des dattes Daglet-Nour et Hchef Daglet-Nour de Ouargla, Ghardaïa et Touggourt, et les résultats de Khelif (2016), pour les vinaigres des cultivars Hamraya et Déchet Daglet Nour de Ouargla, sont relativement proche de nos résultats obtenu où ils ont trouvés un seul genre Acétobacter. Les résultats de l'isolement des bactéries acétiques issues de la canne à sucre et des fruits pourris, laissent remarquer un virage de vert au jaune puis une réversion au bleu sur milieu de Carr, ce qui confirme que sont des genres d'Acétobacter (Arifuzzaman et al., 2014). La capacité des souches à convertir la couleur vert de Carr au jaune après 48 heures ont suggéré qu'elles étaient liées à Gluconobacter ou Acétobacter spp, mais la couleur revenait du milieu Carr du jaune au bleu après 96 heures d'incubation à 30 ° C a montré que la bactérie isolée

était une souche suroxydant et a confirmé celle relative à Acétobacter spp (Beheshti Maal et Shafiee, 2012) proche de nos résultats.

Beheshti-Maal et Shafiee (2012), les bactéries acétique isolé à partir de pêche iranienne sont de pouvoir suroxydant positif proche de nos résultats.

Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017), trouvé deux souches des bactéries acétique qui ont isolées à partir du vinaigre traditionnel des dattes cultivas Hamraya ont une pouvoir suroxydant positif proche de nos résultats.

* Le résultat de test de pigmentation, montre que les isolas A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7, A8, n'ont pas de pigment sur milieu glucose carbonate solide après 48h d'incubation à 30°C (Photo dans le tableau 22).

Kader et al. (2008), trouvent que les bactéries acétiques isolée a partir de noix de coco ne peuvent pas produit de pigment proche de nos résultats.

Selon Aboulala (2008), le test de pigmentation sur milieu glucose carbonate solide, montre que la sous-espèce de l'espèce Acétobacter aceti issues du vinaigre traditionnel des dattes Deglet-Nour et Hchef Deglet-Nour de Ouargla, Ghardaïa et Touggourt présente un résultat négatif proche de nos résultats.

Pour (Kadere et al., 2008), tous les isolats d'Acétobacter issues du vin de noix de coco de zones de Mtwapa et Kikambala de la région côtière du Kenya, les résultats de test de formation de pigment brun sur milieu GYP (Glucose, Extrait de levure et peptone) étaient négatifs proche de nos résultats.

Les bactéries acétiques issues de la canne à sucre et des fruits pourris, isolés par Arifuzzaman et al. (2014), présente un résultat négatif de pigmentions brune sur milieu GYP proche de nos résultats.

Et pour l'isolat A9, elle est pigmentée en brun sur milieu glucose carbonate solide après 48h d'incubation à 30°C.

Concernant la production de cellulose chez notre isolats (A1, A2, A4, A7), on a observé le développement d'une pellicule blanche, après l'addition de lugol puis l'acide sulfurique, on a obtenue des fibres de couleur bleu donc il y a de production de cellulose (Photo dans le tableau 22).

Et pour les restes isolats (A3, A5, A6, A8, A9), on n'a pas remarqué développement d'une pellicule blanche à la surface du tube.

Pour Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017), trouvé deux souches des bactéries acétique qui sont isolées à partir du vinaigre traditionnel des dattes cultivas Hamraya : n'ont pas la capacité de produire la cellulose proche de nos résultats des isolats (A3, A5, A6, A8, A9).

Frouhat Aicha et Drib Amina (2017), trouvé trois souches des bactéries acétique qui ont isolées à partir des échantillons du vinaigre traditionnel des dattes cultiva Deglt-Nour : ne peuvent pas produisent la cellulose proche de nos résultats des isolats (A3, A5, A6, A8, A9. Le test de production de cellulose présente un résultat négatif pour certains isolats d'Acétobacter issues des vinaigres des dattes Daglet-Nour et Hchef Daglet-Nour de Ouargla, Ghardaïa et Touggourt (Aboulala, 2008) et des dattes Hamraya et Déchet Daglet-Nour de Ouargla (Khelif, 2016) proche de nos résultats des isolats (A3, A5, A6, A8, A9).

Romero-Cortes et al., (2012) trouvent dans les études d'isolement et caractérisation des bactéries acétique dans la fermentation des souches bactérienne acétique ne prouvent pas produit la cellulose.

* Pour la formation d'acide gluconique à partir de glucose. Après 48 h d'incubation des isolats A2, A3, A4, A5, A6, A7, A8, A9 qui ont ensemencées sur milieu glucosé carbonaté solide, apparaissent des zones claires autour des colonies, donc les deux souches produit l'acide gluconique (Photo dans le tableau 22).

Pour Hamidi et Slimani, (2008), ont isolée des bactéries acétiques issues du vinaigre traditionnel de dattes de la région de M'Zab, qui forment l'acide gluconique à partir de glucose proche de nos résultats des isolats (A2, A3, A4, A5, A6, A7, A8, A9).

Et pour l'isolat A1, elle ne peut pas produit l'acide gluconique « absence une zone claire autour des colonies.

Pour Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017), trouvé deux souches des bactéries acétique qui sont isolées à partir du vinaigre traditionnel des dattes cultivas Hamraya : ne prouvent pas produit l'acide gluconique proche de nos résultats d'isolat A1.

Pour certains isolats d'Acétobacter du vinaigre traditionnel de dattes (Hamraya et Déchet Daglet-Nour) d'Ouargla, le test de formation d'acide gluconique à partir du glucose sur milieu gélose carbonate de calcium donne un résultat négatif (Khelif, 2016) proche de nos résultats d'isolat A1.

L'incubation des souches pendant 48 heures à 30°C sur milieu gélosé au glycérol puis l'addition de liqueur de Fehling, laisse apparaitre une halo rouge autour de colonies résultant de la précipitation de l'oxyde de cuivre et cela avec toutes les 09 isolats. Donc toutes ces souches ont un pouvoir cétogène (Photo dans le tableau 22)

Pour Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017), trouvé deux souches des bactéries acétique sont pouvoir cétogène qui était isolées à partir du vinaigre traditionnel des dattes cultivas Hamraya proche de nos résultats.

Les isolats d'Acétobacter issues du vinaigre traditionnel de dattes (Hamraya et Déchet Daglet-Nour) d'Ouargla, ont un pouvoir cétogène (Khelif, 2016). D'après Aboulala (2008), si le teste de catalase est positif, et le teste du pouvoir cétogène est positif, ça permet de pré-identifier l'espèce Acétobacter aceti proche de nos résultats.

L'isolat A1 elle est ensemencée sur milieu Haynes liquide. Après 48 heures d'incubation à 30°C, une révélation est poursuivre à l'aide de réactif de Bénédict avec 10 minutes de chauffage au bain-marie à 100°C. On n'observe pas une apparition d'un précipité rouge orange (Photo dans le tableau 22). Donc il n'y a pas de formation d'acide cétogluconique. Pour Khelif (2016), certains isolats d'Acétobacter issues du vinaigre traditionnel de dattes (Hamraya et Déchet Daglet-Nour) d'Ouargla ne sont pas capables de produire l'acide cétogluconique proche de nos résultats d'isolat A1.

Les travaux de Li et al. (2011), de l'isolement et l'identification des bactéries acétiques issues des dépôts abricot, montre la présence des bactéries acétiques qui ne peuvent pas former l'acide cégluconique proche de nos résultats d'isolat A1.

Et pour les isolats A2, A3, A4, A5, A6, A7, A8, A9, elles sont la capacité de produire cet acid

2.3.1. Etudes de la tolérance des bactéries acétiques à différentes températures :

Le tableau 23 et 24 résume les résultats de la tolérance des neufs (09) isolats aux températures 25°C 30°C 37°C et 45°C

Tableau 23: Tolérance des bactéries acétiques à différentes températures (les résultats sont exprimé en UFC/g « nombres des colonies »)

Isolats		UFC/g X (10⁵)
Isolats	25°C	30°C	37°C	45°C
A1	63	147	26	510
A2	75	22	54	590
A3	78	59	82	20
A4	34	10	92	52
A5	39	1	22	340
A6	81	920	53	48
A7	36	106	92	118
A8	10	190	540	480
A9	98	12	109	1

Tableau 24: Tolérance des bactéries acétiques à différentes températures (les résultats sont exprimé en DO « turbidité »)

Isolats			DO
	25°C	30°C	37°C	45°C
A1	0.63	1.47	0.26	0.051
A2	0.75	0.22	0.54	0.059

A3	0.78	0.59	0.82	0.20
A4	0.34	1.00	0.92	0.52
A5	0.39	0.10	0.22	0.034
A6	0.81	0.092	0.53	0.48
A7	0.36	1.06	0.92	1.18
A8	0.10	0.019	0.054	0.048
A9	0.98	1.20	1.09	0.10

Les 09 isolats des bactéries acétiques qui sont isolés à partir des deux vinaigres traditionnels présentent des taux de croissances variables (mesuré par DO à 600nm à prés 48h) dans différentes températures de 25°C à 45°C), sur milieu Frateur liquide avec DO0= 0.01

Tous d'abords nous commence par l'isolat A1 : à un taux de croissance entre 0.051à T°C=45°C, 1.47 à T°C =30°C, cette dernier présente une meilleure croissance à leur T°C idéale des bactéries acétiques. Donc, l'isolat A1elle toléré la croissance à T°C=30°. Concernant l'isolat A2 : à un taux de croissance variée entre 0.059 à T°C = 45°C et 0.75 à T°C=25°C et cette dernier représente une croissance maximale. Donc, l'isolat A2 elle a une croissance maximale à 25°C.

Pour l'isolat A3 : à un taux de croissance minimum à 45°C (DO=0.020) et maximum à 37°C (DO=0.82). Donc, l'isolat A3 elle préféré de croitre à 37°C.

Pour l'isolat A3 : à un intervalle de taux de croissance entre 0.82 à T°C =37°C, 0.22 à T°C =45°C. Donc cette T°C qui favorise plus la croissance cette isolat.

Pour l'isolat A4 : à un taux de croissance changer entre 0.34 à T°C =25°C ,1.00 à T°C=30°C. Donc, la T°C= 30°C c'est la T°C favorable pour obtenir une croissance maximum. Concernant l'isolat A5 : à un intervalle de taux de croissance entre 0.034 à T°C =45°C, 0.39 à T°C=25°C .Donc, l'isolat A5 elle a une croissance maximale à 25°C.

Pour l'isolat A6 : à un taux de croissance minimum à 30°C (DO=0.092) et maximum à 25°C (DO=0.81). Donc, l'isolat A6 elle préféré de croitre à 25°C.

Concernant l'isolat A7 : à un taux de croissance variée entre 1.18 à T°C = 45°C et 0.36 à T°C=25°C. Donc, l'isolat A7 elle a une croissance maximale à 45°C.

Concernant l'isolat A8 : à un intervalle de taux de croissance entre 0.019 à T°C =30°C, 0.10 à T°C=25°C et cette dernier représente une croissance maximale .Donc, l'isolat A8elle a une croissance maximale à 25°C.

Finalement pour l'isolat A9 : à un taux de croissance minimum à 45°C (DO=0.10) et maximum à 30°C (DO=1.20). Donc, l'isolat A9 elle préféré de croitre à 30°C.

D'après notre résultats en conclure que : l'isolat A9 à une meilleure croissance (DO=0.89) à 25°C et l'isolat A1 à un taux de croissance très élevée par rapport les autres isolats à 30°C (DO=1.47) et A9 à un taux de croissance maximum aux T°C=37°C par rapport les autres isolats (DO=1.09).En fin, l'isolat A7 à un taux de croissance élevée et bonne adaptation et termotolérance à 45°C(DO=1.18).

Une étude de la tolérance des bactéries acétiques aux températures élevées sera effectuée, pour la sélection des souches thermotolérantes identifiées à caractère industriel .Donc l'isolat A7 à ce caractère par rapport les autres isolats.

Concernant la tolérance des bactéries acétiques aux hautes températures des autres études qui on des résultats proche de nos résultats :

On a les souches qui ont isolé par Frouhat Aicha et Drib Amina (2017) elles tolèrent des températures de 30°C jusqu'à 45°C, et 40°C, 45°C, 50°C et 55°C sont les meilleures

températures de croissance préféré par rapport les trois souches issue du vinaigre
traditionnel de dattes. Ces hautes températures de 35°C jusqu'à 60°C sont celles enregistrés dans la cuvette de Ouargla, vue les conditions climatiques durant la période estivale dans cette zone aride (Le Hourou, 1990).

Ces observations ont montré que les souches d'Acétobacters isolées à partir des échantillons du vinaigre traditionnel de dattes de cultivar Daglet-Nour et Hechef Daglet-Nour peuvent s'adapter rapidement à l'extrême des conditions telles que des températures élevées de 35°C à 60 °C. Par contre, la plupart des espèces des bactéries acétiques peuvent pousser à 37 ° C mais pas à 45 ° C (Matsushita et al., 2016). Les souches des bactéries acétiques isolées à partir des dattes Iranien détériorés tolèrent des températures de 36 à 38°C (Bheshti-Maal, 2014).

Alors que les résultats de Mounir et al. (2016) pour l'isolement des bactéries acétiques issues de vinaigres traditionnels (de datte et de pomme), vins, jus de fruits et les miels et les fruits, ont montré que toutes les souches d'Acétobacter sauf les souches de

vinaigre traditionnel de dattes et de pomme ont considérablement poussées à 35° C et 41° C. Pour Beheshti Maal et Shafiee. (2012), les examens de tolérance de la souche Acetobacter isolée de la pêche iranienne à des températures élevées telles que 34°C, 36°C, 38°C et 40°C,

ont montré que la croissance de la souche Acetobacter isolée pourrait augmenter sur les modifications de milieu de Carr avec des concentrations d'éthanol de 2,5% et 5% au 34 °C, 36 °C, 38 °C et 40 ° C après 24-96 heures d'incubation.

Les isolats d'Acetobacter et de Gluconobacter issues des vinaigres domestiques dans les villes de l'Iran (Téhéran, Qazvin, Abhar, Takestan) de Moghadami et al. (2013), peuvent poussée à 40 ° C.

Pour Mounir et al. (2016), les taux d'inactivation thermique de l'ADH (Alcool déshydrogénase) et de l'ALDH (Aldéhyde déshydrogénase) étaient supérieurs à 38°C pour toutes les souches d'Acétobacters, et l'ADH était plus Thermosensible que l'ALDH. Ainsi, l'ADH était moins thermostable que l'ALDH.

Pour Perumpuli et al. (2014), l'activité ADH et ALDH dans les fractions membranaires des souches d'Acetobacters cultivés à 37°C pendant 24 heur avec et sans éthanol et ont été comparés avec A. pasteuranus mésophile. Les résultats a révélé que les activités ADH et ALDH des souches thermotolérance étaient plus fortes que celles de la souche mésophile lorsque les cellules ont été cultivées à 37°C.

Les travaux de Matsutani et al, (2016), ont élucidés la séquence complète du génome de la bactérie thermotolérance, A.pasteurianus SKU1108, et l'ont comparée à celle d'autres souches A. pasteurianus thermotolaires et mésophiles. En utilisant une analyse génomique comparée des souches étroitement liées, ils ont révélé plusieurs gènes candidats qui sous-tendent le phénotype de la thermotolérance. D'autres recherches de ces souches étroitement liées peuvent fournir de nouvelles connaissances sur les causes génétiques de leurs phénotypes spécifiques.

De plus, ils ont affirmé que la température constitué un des paramètres majore influence le développement des bactéries au sein des aliments (vinaigre) et de l'enivrement (Prescot et al. ,2002). La plupart des espèces bactéries acétiques peuvent pousser à 37°C mais pas à 45°C (Matsushita et al., 1985 ). Les souches des bactéries acétiques isolées à partir des dattes Iraniennes détériorées tolèrent des températures de 36 à 38°C (Bheshti-Maal et Shafiee, 2012).

En 1980, Ohmori et collaborateurs ont obtenus une souche A. acéti subsp acéti, isolée à partir du mout du vinaigre, des sols des usines du vinaigre et des fruits, qui présente une meilleure activité à 35°C, mais cette activité a totalement disparu à 38°C.

La croissance des souches de Bachi Hanane et Bensayah Sara(2017) à la température 35°C jusqu'un 60°C peut s'expliquer par une possible tolérance aux températures acquis par la souche de leur nature ou zone transférées (Legrand Sow, 2004). Car ces hautes températures

de 35°C jusqu'à 60°C sont celles enregistrés dans la cuvette de Ouargla, vue les conditions climatiques durant la période estivale dans cette zone aride (Boudjellal, 2009).

On conclure que les bactéries acétiques peut adaptés à la condition défavorable (T°C élevés). Cette variation de concentration de trouble due à la variation génétique et spécifique pour les bactéries acétiques.

Mannitol	+	+	+	+	+	+	+	+	+
Mobilité	+	+	+	+	+	+	+	+	+

On remarque que les neufs(09) isolats des bactéries acétiques utilisent le mannitol comme source de carbone car contient des enzymes qui fermenter le sucre mannitol. Donc ces neufs(09) bactéries acétique ont les mêmes types de métabolisme d'énergétique.

Et sont aussi mobile car la cellule de bactéries acétique contient des péritriches pour la mobilité.

Tableau 26: Résultat de l'identification des espèces et sous espèces (Guiraud, 2012).

Pouvoir sur oxydant	+	+	+	+	+	+
Catalase	+	+	+	+	+	+
Culture sur Hoyer	+	-	-	+	-	-
Pouvoir cétogène**	+	+	+	-	+	+
Acide gluconique***	+	+	+	+	+	+
A.5cétogluconique***	+	+	+	-	-	+
Pigment	-	-	+	-	-	-
Cellulose	-	+	-	+	-	+

D'après notre résultats, on a l'isolat A3c'est A.aceti subsp.aceti aceti selon l'auteur Guiraud(2012) qui à de caractère biochimique (pouvoir sur oxydant et catalase et culture sur Hoyer et un pouvoir cétogène et acide gluconique et aussi A.5cétogluconique sont positifs et non pigmenté et ne produise pas la cellulose).

Notre résultat d'isolats A3 et similaire et plus proche de résultats de Bachi et Bensayah (2017).

Les isolats A2 et A4 ont des mêmes caractères biochimiques donc selon Guiraud (2012) sont : A.aceti subsp. Xylinum qui ont un pouvoir sur oxydant, catalase, un pouvoir cétogène,

A.aceti subsp.
Xylinum
A.aceti subsp.
Liquuefanciencs
A.pasteurianus
subsp.estunensis

acide gluconique, cellulose et aussi A.5cétogluconique sont positifs et non pigmenté et culture sur Houer négative.

Concernons les isolats A8 et A9 qui ont des caractères biochimiques identiques, donc selon la clé déclitomique de Guiraud(2012) sont A.aceti subsp. Liquuefanciencs qui ont des résultats positifs des ces testes (pouvoir sur oxydant et catalase, un pouvoir cétogène acide gluconique et A.5cétogluconique et aussi pigmentation) et négative sur ces deux testes (cellulose et culture sur Hoyer).

Pour l'isolat A1qui à un : pouvoir sur oxydant et catalase, un acide gluconique et aussi cellulose et culture sur Hoyer positifs, et les teste de pigmentation et pouvoir et aussi A.5cétogluconique cétogène sont négatifs. Donc selon Guiraud (2012) c'est A.pasteurianus subsp.estunensis .

Et pour les isolats A5 et A6 qui ont des caractères biochimiques identiques, donc selon la clé déclitomique de Guiraud(2012) sont A.aceti subsp. Orleanensis qui ont des résultats positifs des ces teste (pouvoir sur oxydant et catalase, un pouvoir cétogène acide gluconique) et négative sur ces testes (cellulose et culture sur Hoyer et A.5cétogluconique et aussi pigmentation).

Et en fin pour l'isolat A7 selon Guiraud (2012) c'est A.aceti subsp. Xylinum par ce qu'il a c'est caractères biochimiques (pouvoir sur oxydant et catalase, un pouvoir cétogène, cellulose, acide gluconique et aussi A.5cétogluconique sont positifs et culture sur Hoyer négatif, non pigmenté).

La valorisation des dattes et des raisins par des procédés biotechnologiques, et leur transformation en vinaigre, en l'occurrence, peut contribuer à sauvegarder la biodiversité.

Le vinaigre traditionnel de dattes est connu depuis longtemps chez les populations sahariennes.

Les résultats d'analyses de la recherche et d'identification de quelques souches des bactéries acétiques issues des deux vinaigres biologiques de datte cultiva de Hmira et de raisin variété Rouge autochtone.

Révèle la présence sur milieu de cultures sélectives Frateur la présence des bactéries acétiques dans les deux vinaigres à différents aspects macroscopique et microscopique.

En appliquant les tests de pouvoir suroxydant sur milieu de Carr aux cellules issues des colonies qui ont présences dan le milieu Frateur, les résultats ont permis de mettre en évidence l'appartenance des bactéries issues de deux colonies au genre Acetobacter. Alors, que l'isolat A2 est négatif et les autres sont positif (coloration bleu dans la boite de milieu Carr). En complétant les tests sus cités par des tests biochimiques aux bactéries appartenant au genre Acetobacter, ce qui a conduit à la mise en évidence que ces bactéries appartenaient à la sous espèce : Acétobacter. aceti subsp aceti. Cette bactérie est but principale et elle est présenté dans l'échantillon de vinaigre biologique cultivar Hamraya(Hmira) et ces espèces A.aceti subsp. Xylinum, A.pasteurianus subsp.estunensis qui ont productrice de cellulose est se sont des souches très utile et important pour notre pratique, A.aceti subsp. orleanensis , Acétobacter. aceti subsp aceti, et A.aceti subsp. liquuefanciencs qui ne produisent pas de cellulose.

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Isolement et identification acetobacter aceti à partir d'un vinaigre biologique

II.2.3.2. Etudes microscopiques