I.3.4.Analyses microbiologiques de la matière
première (jus de dates et de raisins)(NF.
ISO 7954)
Dans les conditions très favorables, une cellule
microbienne présente à l'origine au niveau
d'une suspension mère se multiple en quelque heures
(bactéries, levures) ou en quelques jours
(moisissures).
La démarche de l'analyse microbiologique est
représentée par le schéma suivant
Incubation
Ensemencement dans le milieu de culture
Dilution décimales (1 ml dans 9 ml d'eau
physiologique )
Suspension mère
Prise d'essai (25 g)
Homogénéisation dans le diluant (225 g
d'eau stérile)
Comptage des colonies
Figure 2: Diagramme du protocole
expérimental (Guiraud, 2013) *Pour chaque dilution
trois répétitions sont effectuées; la moyenne est
retenue.
I.3.4.1.Dénombrement des germes totaux (TGEA) et
FMAT(GN) (NF.ISO 4833)
Le milieu de culture utilisé est le
tryptone-glucose-extrait de viande Agar (TGEA) et GN. L'incubation a
été réalisée à 30 °C pour TGEA et 37
°C pour GN pendant 24 à 48 heures. Le dénombrement est
effectué à l'aide d'un compteur de colonies. On ne tient compte
que des boites contenant un nombre convenable 30 à 300 colonies par
boite.
On calcule pour chaque dilution ayant donné ce
résultat, le nombre moyen de colonies en effectuant les moyennes des
nombres trouvé pour chaque boite de la même dilution. On
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Chapitre I : Matériels et méthodes
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Partie 2 : Etude expérimentale
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arrondi de manière à n'avoir que 2 chiffres
significatifs et on multiplie par l'inverse du taux de dilution.
I.3.4.1.Dénombrement des levures et moisissures
(NF.ISO 4833)
Le milieu utilisé pour la recherche des levures et les
moisissures est l'oxytetracycline-glucose-Agar (OGA) ou Sabouraud. 0,1 ml de
chaque dilution est ensemencé puis étalé avec un
râteau stérile. L'incubation est effectuée à 25
°C pendant 5 jours.
I.3.4.1. Isolement des bactéries acétiques
(NF.ISO 4833)
Les dattes et les raisins et leur extrait constituent un milieu
très favorable à la prolifération des bactéries
acétiques selon Hamdoub (1994). Le milieu
sélectif est le milieu de Frateur. La présence des
bactéries acétiques est conditionnée par trois facteurs
:
? L'acidité (pH 2 à 5).
? Présence de l'alcool.
? Présence de glucose.
Elles appartiennent au genre acétobacter et transforment
l'alcool en acide acétique. L'oxydation de l'éthanol se traduit
par la dissolution du carbonate de calcium et l'éclaircissement autour
des colonies par acidification (Guiraud, 2013)
I.3.4.2.Dénombrement des bactéries
lactiques(NF.ISO4833)
Le milieu sélectif utilisé pour le
dénombrement des bactéries lactiques est MRS.
L'incubation a été réalisée à
30 °C pendants 5 jours.
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