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Isolement et identification acetobacter aceti à  partir d'un vinaigre biologique


par Nadjat OUIS/Mouna SAMCHA
Université Mostapha Stambouli - Master Biotechnologie microbienne 2021
  

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I.3.3.2. Analyse physicochimiques du jus de raisins

On filtre ou on centrifuge l'échantillon de jus puis On détermine la valeur du résidu sec soluble par réfractomètre (lecture directe de la valeur du Brix)

I.3.3.2.1.Analyse des sucres (selon la méthode Duboid, 1956)

? Mode opératoire

? Préparation du jus de l'échantillon

V' -Peser 5 g d'échantillons puis mélanger le avec 25 ml eau distillée et broyage.

V' -Centrifuger les mélanges obtenus à 900 r pendants 20 min.

V' Prendre un volume à partir du surnageant obtenues.

V' Préparation de l'échantillon

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Chapitre I : Matériels et méthodes

 

Partie 2 : Etude expérimentale

 
 

y' On mélange 2ml de l'échantillon avec 50 ml d'eau distillée et 01 g de CaCO3 (bicarbonate de calcium).

y' Puis le mélange subit un chauffage à ébullition pendant 30 minutes. Après le refroidissement du mélange, on complète le volume jusqu'à 100 ml, puis on ajoute une quantité d'acétate de plomb (10%).

y' On fait une 1ere filtration pour éliminer les protéines précipitées par l'acétate du plomb. Après cette opération, on ajoute une quantité d'oxalate de potassium qui se combine avec l'excès d'acétate de plomb et on fait une 2ème filtration

y' La concentration en sucres totaux a été déterminée en se référant à la courbe d'étalonnage préparé.

Figure 1: Courbe d'étalonnage de dosage de ST (Zribi Hatima; 2019).

Le taux de sucre est calculé selon la formule (7)

ST=A' × V × D/? ?×100 (7)

ST: Taux de sucres totaux(%).

X: Quantité de sucres calculée à partir de la courbe d'étalonnage (mg/ml).

D: Facteur de dilution.

V : Volume de la solution analysée (ml).

P:Poids de la prise d'essai (g).

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Chapitre I : Matériels et méthodes

 

Partie 2 : Etude expérimentale

 
 

I.3.3.2. Dosage d'acidité titrable

? Principe

Au cours de la fermentation acétique, l'évolution de l'acide acétique est le facteur essentiel à contrôler, c'est le produit fini recherché.

L'acide acétique est dosé par titrimétrie selon la méthode directe par Follaman (Follaman ,1983).

Produits utilisés

- Phénolphtaléine (1%).

- Hydroxyde de sodium 0.1N.

? Mode opératoire

? On a fait dilution des jus des dattes et raisins (dilué à 10%)(10ml de jus de datte et raisins +90ml eau distillée)

? Prélever VA=10ml de jus de raisin et jus des dattes dilué à l'aide d'une pipette, on ajoute 3 gouttes de Phénolphtaléine, remplir la burette de solution d'hydroxyde de sodium de concentration molaire CB=0.1mol/L, ajuster le niveau du liquide au niveau zéro de la burette, placer alors l'Arleen Meyer sous la burette, agiter afin d'homogénéiser le mélange ( jus de D et R +phénolphtaléine), verser à la burette, goutte à goutte de l'hydroxyde de sodium dans L'Erlen Meyer jusqu' au virage au rose persistant.

? On indiquer la valeur du volume d'hydroxyde sodium correspondant à la zone de virage au rose persistant.

A l'équivalence CAXVA=CBXVB (8)

- CA est la concentration de la solution A.

-VA le volume de la solution A.

-CB est la concentration de la solution B.

-VA le volume de la solution B.

* on a A°=a. acétique + a. lactique (la matière première «Datte, Raisin» contient la flore

lactique).

Le degré d'acidité D°(A°) de vinaigre s'exprime par la masse.

La concentration en acide acétique est exprimée en g/l par la formule (9) (Clavet, 1992).

(9)

C (g/l) = F.V X 60

V : Volume de la soude versé en ml.

F : Facteur correspondant à la normalité de soude 0,1N.

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Chapitre I : Matériels et méthodes

 

Partie 2 : Etude expérimentale

 
 

60 : La masse molaire de l'acide acétique.

Le degré d'acidité de vinaigre est mesuré par la formule suivante : D° = Macide Msolution

1 × 100 (ONEFD)

M acide : concentration de l'acide acétique.

M solution : la masse d'un litre de solution.

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