3. Résultats personnels
Lorsque les médecins de l'hôpital Beaujon
(AP-HP), principalement des services de cardiologie (40 p.cent des demandes) et
de chirurgie vasculaire (19 p.cent des demandes) prescrivent un bilan lipidique
complet pour leurs patients, nous effectuons, au service de Biochimie les
analyses suivantes :
- examen de l'aspect du sérum,
- dosages enzymatiques du cholestérol et des
triglycérides,
- dosages
immunonéphélémétriques des apoprotéines Al
et B avec calcul du rapport apoprotéine B sur apoprotéine
Al,
- électrophorèse des lipoprotéines
sur un gel d'agarose, permettant la séparation des alpha-,
prébêta- et bêtalipoprotéines et la mise en
évidence éventuelle, notamment, de chylomicrons.
Devant l'intérêt croissant porté
à la Lp(a) et du fait des publications montrant son implication dans les
maladies cardiovasculaires, sa recherche et son dosage ont été
inclus dans les bilans lipidiques complets.
Dès la mise à disposition du nouveau
support d'électrophorèse dont la composition permet en plus
d'individualiser la Lp(a) (Hydragel LIPO + Lp(a)b), nous avons
évalué ses performances pour le typage des profils
lipoprotéiques et pour le dépistage de la présence d'une
Lp(a).
Il fallait d'une part s'assurer que le nouveau support
permettait un typage fiable des profils lipoprotéiques des patients,
d'autre part vérifier le taux à partir duquel il permettait la
mise en évidence de la Lp(a).
Nous avons ensuite comparé deux méthodes
de dosage de la Lp(a) puis choisi la méthode adaptée à nos
spécificités.
Enfin, une analyse portant sur les résultats de
plusieurs années a été effectuée.
3.1. Matériel et méthodes
3.1.1. Séparations des lipoprotéines par
électrophorèse
La technique habituellement utilisée est une
électrophorèse sur gel d'agarose : après
dépôt de 1 pI de sérum dans une "rigole"
préformée dans le gel, migration à 100 V pendant 35
minutes et coloration au rouge gras, l'importance relative des fractions
séparées est évaluée par densitométrie
à 530 nm. Sur ce support la Lp(a) migre
b SEBIA
32, rue Maximilien Robespierre, 92130
Issy-les-Moulineaux
Thèse Docteur Pharmacie La lipoprotéine Lp(a) :
son intérêt dans l'interprétation du bilan lipidique Dr
GUIMONT MC 187/271 Lipides, Lipoprotéine (a),
Hyperlipoprotéinémie, Athérosclérose, Lipids,
Lipoprotein, Lpa, Hyperlipoproteinemia, Atherosclerosis
avec les prébêtalipoprotéines et
on ne peut la repérer aisément que lorsqu'elle se trouve à
concentration notable et que le sérum a été analysé
le jour du prélèvement. L'addition à un gel d'agarose d'un
sel de magnésium [Hydragel LIPO + Lp(a)] permet de diminuer la
mobilité des alpha-, prébêta- et
bêtalipoprotéines sans affecter la mobilité de la Lp(a) qui
se trouve ainsi séparée des
prébêtalipoprotéines. Ceci permet de la mettre en
évidence sous forme d'une bande plus ou moins nette située entre
les alpha et les prébêtalipoprotéines. Après
dépôt de 3 pl de sérum sur le gel, migration à 50 V
pendant 90 minutes, les fractions lipoprotéiques séparées
sont colorées par le noir soudan et leurs proportions relatives sont
évaluées par densitométrie à 570 nm (Figure
24).
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