Effets du temps et de la température de cuisson sur la formation de l'acrylamide dans les frites de banane plantain mà»re

III. MATERIEL DE LABORATOIRE

III. 1. La chaine chromatographique

Le Chromatographe en phase liquide haute performance (HPLC) de marque Agilent, modèle 1100, comprenant :

ü Dégazeur de marque Agilent, modèle 1100 ;

ü Pompe quaternaire de marque Agilent, modèle 1100 ;

ü Échantillonneur automatique de marque Agilent, modèle 1100, capable d'injecter 25 microlitre ;

ü Une colonne analytique SB-C18, 2,1 x 250 mm, dp 5 micromètre (ìm), (n° de pièce 77505-252130 de Agilent); 150 mm × 4,0 mm Di, particules de 5 ìm ;

ü Un chauffe-colonne capable de maintenir une température de 28,0 #177;1,0°C ;

ü Détecteur UV de marque Agilent, modèle 1100 ;

ü Un système informatisé de contrôle du LC et de traitement des données (Chemstation)

III. 2. Appareillage et verreries

ü Plaque chauffante

ü Sonde de température (0-220°C) de marque HANNA modèle HI 125

ü Chronomètre

ü Cristallisoir

ü Erlenmeyers de 250 ml

ü Burettes

ü Agitateur magnétique

ü Hotte aspirante

ü Autres matériel de laboratoire

ü Broyeur (Analysesenmühle A 10, Janke & Kunkel, IKA-Werk)

ü Balance analytique à quatre ou cinq décimales (Mettler Toledo AL 54);

ü Vortex (TecnoKartell TK 3S)

ü Agitateur secoueur horizontal (Heidolph)

ü Centrifugeuse réfrigérée à haute vitesse (Zentrifugen Mikro Hettigen 22R)

ü Centrifugeuse de laboratoire (Sigma, Type 2-16)

ü Collecteur à vide SPE doté d'un support pour tubes; (Varian)

ü Cartouche d'extraction en phase solide en mode échangeuse d'anions forts Varias BonElut SAX, 3 cc, 200 mg, (Varian)

ü Tube à centrifuger en polypropylène, 50 ml, non pyrogenic (Corning)

ü Dispositifs de pipetage à volume variable, 100-1000 ìl, (Eppendorf);

ü Fioles jaugées de classe A, 10 ml, 20 ml, 50 ml, 100 ml et 1000 ml (Schott Duran)

ü Dispositif de pipetage et embouts, 5-10 ml (Eppendorf et Biohit);

ü Tubes CR 21 jetables

ü Tubes centrifugeuses de 1,5 ml (eppenforf)

ü Filtres à membranes autovials en PTFE Uniprep, taille des pores de 0,45ìm, (Whatman) et 0,20 ìm.

ü Flacons en verre de 250 ml, 500 ml et de 1l (Schott Duran)

ü Réfrigérateur (Whirpool).

ü PH-mètre de marque Metrohm modèle 780

ü Erlenmeyer ou ballon avec rodage de 300 ml

ü Réfrigérant à reflux avec manteau d'env. 40 cm

ü Papier filtre

ü Fioles jaugées de classe A de 100 ml

ü Eprouvette de 25 ml

ü Verrerie courant de laboratoire

III. 3. Solvants et réactifs

ü Ethanol 95°- Ether diéthylique (V/V).

ü Solution de phénolphtaléine à 1% dans l'éthanol 95°

ü Acrylamide (CH=CHCONH₂) = 99 % (Merck)

ü Acetonitrile (CH₃CN) de type HPLC 99,9% (Sigma-Aldrich, USA)

ü Acide sulfurique (H₂SO₄), 96% (Aldrich);

ü Méthanol (CH₃OH) de type HPLC 99,9% (Normapur, CE);

ü Hexacyanoferrate de potassium trihydraté (K₄Fe(CN)₆-3H₂O

ü Acétate de zinc déshydraté Zn(CH₃COO) ₂-2H₂O

ü Solution d'acide sulfurique 25%: elle a été préparée en dissolvant 25 ml d'acide sulfurique pur dans environ 100 ml d'eau ultrapure.

ü Solution carrez I. hexacyanoferrate de potassium : 30g d'hexacyanoferrate de potassium sont pesés et dissout dans 200 ml d'eau ultrapure.

ü Solution carrez II. 75 g d'acétate de Zinc sont pesés et dissout dans 250 ml d'eau ultrapure.

ü Solution cupro-alcaline: dissoudre 25 g de sulfate de cuivre (CuSO₄ * 5 H₂O) dans 100 ml d'eau, 50 g d'acide citrique (C₆H₈O₇ * 1 H₂O) dans 50 ml d'eau et 388 g de carbonate de sodium cristallisé (Na₂CO₃ * 10 H₂O) dans 300 - 400 ml d'eau tiède. Mélanger prudemment la solution d'acide citrique avec la solution de carbonate de sodium (attention: effervescence!), puis ajouter la solution de cuivre. Après refroidissement à la température ambiante, transvaser la solution dans un ballon jaugé de 1 litre et compléter jusqu'à la marque. Laisser reposer 24 heures, puis filtrer la solution en recueillant le filtrat dans un flacon en verre brun très propre. Une fois le flacon bouché, la solution se conserve indéfiniment.

ü Iodure de potassium cristallisé

ü Acide sulfurique à 25 %

ü Solution titrée de thiosulfate de sodium 0,1 N (0.1 mol/l)

ü Solution d'amidon: chauffer un mélange de 500 ml de glycérol et de 500 ml d'eau jusqu'à env. 70 °C, ajouter par petites portions 25 g d'amidon soluble (Merck n° 85650), continuer à chauffer environ 90°C, puis refroidir. Cette solution est stable pendant au moins 6 mois.

ü Solution de Carrez l: dissoudre dans de l'eau 150 g d'hexacyanoferrate(II) de potassium (K4[Fe(CN)6] * 3 H₂O), transvaser la solution dans un ballon jaugé de 1 litre et compléter jusqu'à la marque.

ü Solution de Carrez II: dissoudre dans de l'eau 300 g de sulfate de zinc (ZnSO₄ * 7 H₂O), transvaser la solution dans un ballon jaugé de 1 litre et compléter jusqu'à la marque.