II.2.4.1 Procédure expérimentale sur les
animaux
Les animaux sont constitués des rats mâles
adultes âgés de de 3 à 4 mois et pesant chacun entre 200 et
300g. Le choix des rats adultes se justifie par le fait que les troubles
métaboliques (Dyslipidémies, stress oxydants...) et les maladies
qui en découlent s'installent chez l'homme dans la majorité des
cas avec l'âge adulte.
Les animaux ont reçus une alimentation normale puis les
différentes doses de poudre de la pulpe ont été
administrées afin de voir les effets sur profils biochimiques et
hématologiques.
> Principe de gavage
L'animal étant immobilisé, la tête
surélevée, la bouche bien ouverte, une seringue chargée du
produit, munie de la sonde endogastrique et introduite jusqu'à l'estomac
puis le produit est envoyé en poussant le piston de la seringue.
> Mode opératoire
Les poudres ont été mises en suspension dans
l'eau distillée et agitées magnétiquement pendant 2h. Un
volume de 10 mL/kg de poids corporel, les rats ont été
regroupés en quatre (4) lots constitués de huit(8) rats chacun et
repartir comme suit :
> Lo1 : alimentation normale (AN) + l'eau distillée ;
> Lot2 : alimentation normale + plus la dose de 250mg/kg ; > Lot3 :
alimentation normale + plus la dose de 500mg/kg ; > Lot4 : alimentation
normale + plus la dose de 750mg/kg.
Les traitements ont été effectués
quotidiennement à partir de 8 h du matin et pendant 28 jours.
La première prise de poids des rats eu lieu le premier
jour de l'expérience puis s'est faite deux fois toutes les semaines
pendant le temps de l'expérimentation soit un total de 8 pesés et
le gain de poids ou perte(G/P) a été déterminé. Les
rats ont eu libres accès à l'eau et à l'aliment suivant le
régime formulé par Hamlat et al. (2008) (Tableau 5) ;
les restes d'aliment ont été
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collectés et pesés toutes les 24h. Ceci a permis de
déterminer l'indice de consommation par la
formule 2 suivante :
Gain de poids = masse 1 - masse 2
Avec : Masse 1 : masse de l'animal au premier jour de
l'expérimentation et
Masse 2 : masse de l'animal au dernier jour de
l'expérimentation
Quantité d'aliment consommé
Indice de consommation =
Gain de poids
Tableau 5 : Formulation du régime
standard selon Hamlat et al. (2008) avec quelques modifications.
Constituants Régime normal (en g)
poudres de poissons 200
590
50
amidon de mais Sucrose
huiles de soja 50
poudres d'os 50
vit B complexe 10
Cellulose 50
Total 1000
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Rats mâles âgés de 3 à 4 mois
Acclimatation pendant 7 jours
Pesée et répartition des rats par randomisation
en 4 groupes de 8 rats
CNo + AN+ eau distillée
CT1 : AN + (250mg/kg)
CT2 : AN + 500mg/kg)
CT3 : AN + (750mg/kg)
Pesée des rats chaque 4 jours
Sacrifice des rats au terme de 28 jours
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Prélèvement et pesée des organes
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Prélèvement du sang
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Broyage des organes
Sang total
Centrifugation (3000trs/min pendant 5min
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Homogénats d'organe
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Sérum
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IO
Malondialdéhyde
NFS
Cholestérol (total, HDL, LDL) Triglycérides
Transaminases Créatinine
Légende :
AN : Alimentation normale
CNo : Contrôle normal JO : Indices
d'organes CT : control test
NFS : Numération des
formules sanguines
Figure 23 : Protocole expérimental
d'étude sur les animaux.
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