II.2.2.10 Détermination de teneurs en vitamine
C
Le dosage de la Vitamine C est fait par la méthode
titrimétrique de Harris et Ray (1935).
Rédigé par BOBE MALLAYE 40
2018-2019
Propriétés biologiques de la pulpe du
fruit de Detarium microcarpum (Guill. & Perr)
Rédigé par BOBE MALLAYE 41
? Principe
La méthode est basée sur la décoloration
(réduction) du 2,6 dichlorophénol indophénol à pH
< 3. La solution de 2,6 dichlorophénol indophénol (2,6 DCIP)
bleue au départ devient rose en milieu acide. Pendant la titration avec
une solution d'acide ascorbique, elle est réduite en une leuco base
incolore et en même temps l'acide ascorbique est oxydé en acide
déhydroascorbique (Figure 21). Cette
méthode qui exploite les propriétés réductrices de
la vitamine C ne permet donc que le dosage de l'acide ascorbique et non l'acide
déhydroascorbique. En effet en milieu acide ou neutre, c'est à
dire sous l'influence des oxydants, il y a ouverture de la double liaison C~C
et formation d'une á dicétone.
Figure 21 : Equation de la réaction de
l'acide ascorbique avec le 2,6 DCIP
Mode opératoire
? Extraction
Pour déterminer la teneur en vitamine C des fruits. On a
procèdé d'abord à une extraction selon le protocole
suivant Sun et al. (1998):
Une quantité de poudre du fruit a été
pesé et triturer dans un mortier en présence d'un gramme de sable
de Fontainebleau et d'acide acétique 90 % (5 ml). 5 ml d'eau
distillée a été ajoutée et laisser décanter
puis filtrer ou centrifuger à 3500 tours / minute pendant 5 minutes. Le
surnagent a été récupéré pour le dosage de
la vitamine C.
Répéter 2 fois l'extraction et noter le volume
total (V) de l'extrait, à conserver au réfrigérateur. Le
Dosage proprement dit commence par une Introduction dans une burette, la
solution étalon de vitamine C 1 mg / 100 ml d'acide acétique puis
Introduit dans un bécher, 1 ml de la solution de 2,6 DCIP 0,1 g/l dans
l'eau distillée portée ébullition dans une goutte d'acide
acétique 5 %. La solution bleue au départ devient rose.
2018-2019
Propriétés biologiques de la pulpe du
fruit de Detarium microcarpum (Guill. & Perr)
Une goutte a été laissé tomber dans le
contenu de la burette jusqu'à décoloration totale du contenu du
bêcher. Le volume a été Noté de la solution de
vitamine C ayant permis ce virage. 5 essais de la même manière a
été faite. Procéder de la même manière sur
l'extrait de fruit.
La teneur en vitamine C du fruit exprimée en mg / 100 g
de poids frais est déterminée
????
par la relation : Tvc = Q X
????
- X: Descente de burette de la solution étalon de
vitamine C décolorant 1 ml de 2,6 DCIP ; - V : Volume de l'extrait total
de fruit ;
- V' : Volume de l'extrait réduisant 1 ml de 2.6 DCIP ;
- P : Poids de l'échantillon (g).
Le résultat exprimé en base sèche est
donné par la formule : Q [XV / PV'] x 100/ [100 - H0] en mg / l00g de M
S où H° est la Teneur en eau.
II.2.3 EVALUATION DE L'ACTIVITE ANTIOXYDANTE
in vitro DE LA PULPE DU FRUIT DE D. microcarpum
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