II.2.2.8 Détermination de la teneur en
flavonoïdes
La teneur en flavonoïdes est déterminée
suivant la méthode décrite par Mimica Dukic, (1992).
>Principe
En milieu basique et en présence du nitrate de sodium et
de chlorure d'aluminium, les
flavonoïdes donnent une coloration rouge qui présente
un maximum d'absorbance à
510nm.
>Extraction
L'extraction des polyphénols totaux a été
servie directement pour le dosage des
flavonoïdes, Expression des résultats.
Rédigé par BOBE MALLAYE 39
2018-2019
Propriétés biologiques de la pulpe du
fruit de Detarium microcarpum (Guill. & Perr)
? Dosage
Dans les tubes d'étalon, ont été
introduit la rutine de concentration 0,1mg/mL à différents
volumes et 0,1 mL de poudre de la pulpe du fruit de D. microcarpum a
été introduit dans le tube inconnu puis l'eau distillée a
été ajouté dans les tubes. Après incubation
à 25°C pendant 5 min, 0,15 mL d'AlCl3 10% puis 1 mL de nitrite de
sodium (NaNO2 5 %) ont été ajouté dans chaque tube.
L'étalonnage est établi à partir de la solution de rutine
0,1mg/ mL et la densité optique est lue à 510 nm contre un blanc.
La quantité en flavonoïde de la prise d'essai (Q) est
exprimé en équivalent mg de la rutine/100g de matière
sèche, en se référant à la courbe
d'étalonnage (Annexes 2) d'équation de régression
La quantité des poudres en flavonoïdes a
été calculée à l'aide d'un standard
préparé à partir d'une solution de rutine (0,1 g/L) et les
résultats sont exprimés en mg d'équivalent de rutine/g de
matière sèche.
II.2.2.9 Détermination de la teneur en tanins
condensés
Les tanins condensés, également connus sous le
nom de proanthocyanidines ont été dosés par la
méthode de Sun et al. (1998).
? Principe
La méthode consiste à dépolymériser
les tanins en milieu méthanolique acide et par réaction avec la
vanilline, ils se transforment en anthocyanidols de couleur rouge
spécifique. ? Mode opératoire
Une prise de 0,05 uL de l'extrait convenablement dilué
est mélangée avec 3 mL de vanilline de préparation de
méthanol (4 %), 1,5 mL d'acide sulfurique concentré a
été additionné. Après homogénéisation
manuel. Le mélange est mis en incubation à température
ambiante pendant 30 min. L'absorbance est mesurée à 500 nm contre
un blanc contenant du méthanol pur. Les teneurs en tanins
condensés sont déterminées en se référant
à une gamme étalon (Annexes 3) de catéchine (0 à
0,600 mg/mL).
? Expression des résultats
Les teneurs en tanins condensés sont exprimées
en mg d'équivalent catéchine par gramme de matière
sèche.
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