1-6-Spécificité du substrat
1-6-1-Activité sur les
p-nitrophényl-D-glycosides
La spécificité de substrat de la
f3-glucosidase a été testée sur un grand
nombre de pnitrophényl-D-glycosides. Elle n'a seulement
hydrolysé que le pNP-f3-D-glucopyranoside. Ce
biocatalyseur possède donc une spécificité stricte
vis-à-vis du résidu glucosyle en position f3
(Tableau 18).
1-6-2-Activité sur les oligosaccharides et
polysaccharides
La vitesse d'hydrolyse de la f3-glucosidase
augmente lorsque la chaîne de glucose des cellodextrines s'allonge
jusqu'à 3 unités de glucose. Au-delà de 3 unités,
la vitesse de la réaction diminue. Les liaisons
f3(1-2), f3(1-3) et f3(1-6)
ont été faiblement hydrolysées (Tableau
19). La f3-glucosidase n'a pas hydrolysé le
lactose, le saccharose, le xylobiose et le maltose. Il en a été
de même pour les polysaccharides tels que l'arabino-galactane, la
carboxyméthylcellulose, l'inuline, le lichenane, la laminarine, le
xylane et l'amidon
(Tableau 19).
Tableau 18 : Activité hydrolytique de la
fi-glucosidase sur les p-nitrophényl-D-glycosides
Substrats Activité
p-nitrophényl-â-glucoside
D
p-nitrophényl-á-glucoside
ND
p-nitrophényl-á-mannoside ND
p-nitrophényl-â-mannoside ND
p-nitrophényl-á-mannoside
ND
p-nitrophényl-â-galactoside
ND
p-nitrophényl-á-galactoside
ND
p-nitrophényl-á-fucoside
ND
p-nitrophényl-â-fucoside
ND
p-nitrophényl-á-arabinoside
ND
p-nitrophényl-â-arabinoside
ND
p-nitrophényl-â-xyloside
ND
p-nitrophényl-á-xyloside
ND
D : Dégradé N.D : Non
dégradé
Tableau 19 : Spécificité de substrat
(oligosaccharides et polysaccharides) de la fglucosidase du suc digestif de la
larve de Rhynchophorus palmarum (Curculionidae)
Substrats
(oligosaccharides et Structure de substrat
Activité (%)
polysaccharides)
Cellobiose Glcâ(1-4)Glc 100
Cellotriose
Glcâ(1-4)Glcâ(1-4)Glc 130
Cellotetraose
Glcâ(1-4)Glcâ(1-4)Glcâ
(1-4)Glc 120
Cellopentaose
Glcâ(1-4)Glcâ(1-4)Glcâ
(1-4)Glcâ(1-4)Glc 91
Sophorose Glcâ(1-2)Glc 42
Laminaribiose Glcâ(1-3)Glc 12
Gentiobiose Glcâ(1-6)Glc 7
Lactose Galâ(1-4)Glc 0
Saccharose Glcá(1-2)Fru 0
Xylobiose Xylâ(1-4)Xyl 0
Maltose Glcá(1-4)Glc 0
Arabino-galactane Polymère de Ara et de Gal 0
Carboxyméthylcellulose
[Glcâ(1-4)Glc-]n 0
Inuline [-Fru â(1-2)Fru-]n 0
Lichenane Polymère de Glc 0
Laminarine Polymère de Glc 0
Xylane Polymère de xyl 0
Amidon Polymère de Glc 0
n = nombre entier naturel très supérieur à
10
1-7-Paramètres cinétiques
Les valeurs de la constante de Michaelis-Menten (KM) et de la
vitesse maximale (Vmax) d'hydrolyse de
pNP-â-D-glucopyranoside ont été
respectivement de 0,25 mM et de 62,20 UE/mg de protéine. Avec le
cellobiose, les valeurs de KM et de Vmax ont respectivement
été de 0,31 mM et 43,23 UE/mg de protéine.
L'efficacité catalytique donnée par le rapport Vmax/KM a
été plus élevée avec le
pNP-â-glucopyranoside qu'avec le cellobiose
(Tableau 20).
Tableau 20 : Quelques paramètres cinétiques
de la â-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus
palmarum (Curculionidae)
Substrats KM (mM) Vmax (UI/mg) Vmax/ KM (UI/mg x
mM)
|
pNP-â-glucopyranoside
|
0,25
|
62,20
|
248,80
|
|
Cellobiose
|
0,31
|
43,23
|
139,45
|
| 
