1-5- Influence de la température sur la
â-glucosidase
1-5-1-Température optimale d'hydrolyse,
énergie d'activation et le Q10
La â-glucosidase a eu une
température optimale d'hydrolyse de 55 °C dans le tampon
acétate 100 mM pH 5,0. Aux températures comprises entre 40
°C et 60 °C, elle a conservé plus de 60 % de son
activité hydrolytique (Fig. 32). Le Q10 de
la â-glucosidase, déterminé selon
Arrhenius entre 40 et 50 °C a été de 1,90.
L'énergie d'activation (Ea) de l'enzyme a été de 68,77
Kj/mol (Tableau 17).
1-5-2-Inactivation thermique
A 55 °C, la â-glucosidase s'est
rapidement dégradé. Son activité résiduelle a
été de 50 % après 45 min de pré-incubation dans le
tampon acétate 100 mM pH 5,0 (Tableau 17). En 2 h 20
min de pré-incubation dans ce même tampon, elle a totalement perdu
son activité hydrolytique (Fig. 33). A 37 °C, la
â-glucosidase a conservé toute son
activité dans le même tampon pendant plus de 2 h de temps de
pré-incubation.
1-5-3-Dénaturation thermique
La â-glucosidase a été
stable entre 30 et 55 °C pendant 10 min de pré-incubation dans le
tampon acétate 100 mM pH 5,0. Au-delà de 55 °C,
l'activité a brutalement chuté pour traduire une importante
dénaturation de la â-glucosidase (Fig.
34).
1-5-4-Conservation au froid
Une conservation prolongée par congélation de la
â-glucosidase purifiée du suc digestif de la
larve de Rhynchophorus palmarum (Curculionidae) contenu dans le tampon
acétate 100 mM pH 5,0 n'a pas modifié l'activité
hydrolytique du biocatalyseur pendant un an (Fig. 35).
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100
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Activite relative (%)
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80
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60
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40
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20
0
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20 30 40 50 60 70 80 90
Température (°C)
Figure 32 : Température optimale d'hydrolyse de la
â-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus palmarum
(Curculionidae)
La température optimale d'hydrolyse du
p-nitrophényl-â-glucoside a
été déterminée à différentes
températures (35 à 80 °C) dans le tampon acétate 100
mM pH 5,6. L'activité enzymatique a été
déterminée dans les conditions standard.
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Activite residuelle (%)
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120 100 80 60 40 20
0
|
|
0 20 40 60 80 100 120 140 160
Temps (min)
T (37 °C) T (55 °C)
Figure 33 : Inactivation thermique de la
â-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus palmarum
(Curculionidae)
L'enzyme a été pré-incubée aux
températures de 35 et 55 °C pendant des temps compris entre 0 et
140 min. L'activité enzymatique a été
déterminée dans les conditions standard.
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Activite residuelle (%)
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120 100 80 60 40 20
0
|
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30 40 50 60 70 80 90
Température de pré-incubation
(°C)
Figure 34 : Dénaturation thermique de la
â-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus palmarum
(Curculionidae)
L'enzyme a été pré-incubée pendant
10 min à des températures comprises entre 30 et 80 °C, puis
refroidie à la température ambiante. L'activité
résiduelle a été déterminée dans les
conditions standard.
120
100
Activite relative (%)
80
60
40
20
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Durée de
congélation à 0 °C (mois)
Figure 35 : Effet de la congélation de la
â-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus palmarum
(Curculionidae) dans le tampon acétate 100 mM à pH
5,0
Tableau 17 : Quelques caractéristiques de la
â-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus palmarum
(Curculionidae)
Caractéristiques Résultat
pH optimum d'hydrolyse 5,0
Force ionique non
Stabilité au pH 5,6 - 6,0
Température optimale d'hydrolyse 55 °C
1/2 vie à 55 °C (min) 45
Energie d'activation (Kj/mole) 68,77
Q10 1,90
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