La lipoprotéine Lp(a):son intérêt dans l'interprétation du bilan lipidique

3.2. Résultats

Ils sont exposés en deux parties :

- les comparaisons de techniques analytiques,

- les résultats de la population de 1504 bilans lipidiques complets consécutifs.

3.2.1. Comparaisons de techniques analytiques

3.2.1.1. Séparation des lipoprotéines par électrophorèse

Nous avons comparé les résultats des séparations électrophorétiques des lipoprotéines réalisées avec un gel d'agarose simple et avec l'Hydragel LIPO+Lp(a). Typage des profils lipoprotéiques

Beaucoup plus que les pourcentages densitométriques des différentes fractions, le typage des profils lipoprotéiques des sérums de patients se fait par comparaison visuelle de l'intensité relative des fractions avec celles d'un sérum normolipidémique. Les sérums de 69 patients ont fait l'objet d'un lipoprotéinogramme sur les 2 supports et ont été typés indépendamment de l'aspect obtenu avec le second support :

	Gel d'agarose simple	Hydragel LIPO + Lp(a)
Profil normal	26	26 dont 8 avec Lp(a)
Augmentation des 0 lipoprotéines	15	15 dont 7 avec Lp(a)
Augmentation des 0 et des pré-0 lipoprotéines	8	8 dont 4 avec Lp(a)
Augmentation des pré-0 lipoprotéines	13	13 dont 7 avec Lp(a)
Diminution des a lipoprotéines	3	3 dont 3 avec Lp(a)
Diminution des a- et augmentation des pré-13 lipoprotéines	1	1 dont 1 avec Lp(a)
Présence d'héparine	3 (non interprétables)	3 (dont 1 interprétable)

Résultats comparés du typage de 69 sérums avec les 2 supports

L'interprétation aboutit, en dehors de la présence ou non d'une Lp(a) à des conclusions similaires. Lorsqu'il y a une bande de Lp(a) intense sur le nouveau gel, on ne devine la présence de Lp(a) avec le gel habituel que dans 3 cas sur 13.

Nous avons conclu que les deux supports sont équivalents pour le typage visuel des profils lipoprotéiques, indépendamment de la Lp(a). Sur le plan de l'aspect du lipoprotéinogramme, l'Hydragel LIPO + Lp(a) donne une meilleure focalisation des alphalipoprotéines mais une moins bonne séparation des bêta- et des prébêtalipoprotéines ce qui ne gêne cependant pas l'interprétation.

Thèse Docteur Pharmacie La lipoprotéine Lp(a) : son intérêt dans l'interprétation du bilan lipidique Dr GUIMONT MC 192/271 Lipides, Lipoprotéine (a), Hyperlipoprotéinémie, Athérosclérose, Lipids, Lipoprotein, Lpa, Hyperlipoproteinemia, Atherosclerosis

L'usage est d'inclure, dans le comte-rendu adressé au clinicien, en plus du commentaire du biologiste, les pourcentages des différentes fractions. Dans notre pratique nous n'indiquons pas de "valeurs normales" pour ces pourcentages. Nous avons cependant vérifié, avec 62 sérums ayant des concentrations de cholestérol total comprises entre 4,0 et 5,2 mmol/I et de triglycérides inférieures à 1,7 mmol/I, que les valeurs trouvées étaient en accord avec celles annoncées par le fabricant :

n = 62 sérums normaux	pourcentages trouvés		"Normales" fabricant (p.cent) )
	m-2SD	m+2SD
a lipoprotéines	19	49	22 à 46
prép lipoprotéines	0	19	0 à 27
3 lipoprotéines	41	69	47 à 71

Pourcentages moyens des fractions lipoprotéiques de sérums normaux Par comparaison avec la technique usuelle, le support Hydragel LIPO + Lp(a) donne des pourcentages qui sont en moyenne :

6 p.cent plus faibles pour les a lipoprotéines

3 p.cent plus faibles pour les pré6 lipoprotéines et

7 p.cent plus forts pour les R lipoprotéines

Ceci est sans incidence sur le typage de profils lipoprotéiques.

Sensibilité et spécificité de la recherche de Lp(a) sur Hydragel LIPO + Lp(a) Lorsqu'elle est détectable, la Lp(a) se présente sous forme d'une fraction supplémentaire dont la position peut varier légèrement d'un échantillon à l'autre selon le phénotype de l'apo(a). Le plus souvent la Lp(a) constitue une bande bien individualisée entre les alpha- et les prébêta-lipoprotéines, mais parfois, surtout lorsqu'elle se trouve en concentration faible, la Lp(a) apparaît sous forme d'une "bosse" devant les alphalipoprotéines (Figure 24).

Nous avons étudié la sensibilité et la spécificité de la mise en évidence de la fraction Lp(a) avec le nouveau support en effectuant les dosages de Lp(a) de 154 sérums ayant été soumis à l'électrophorèse par l'Hydragel LIPO + Lp(a).

Les dosages ont été réalisés par la technique d'électro-immunodiffusion.

Dans notre contexte, la sensibilité du test exprime le pourcentage de sérums reconnus comme Lp(a) positifs à l'électrophorèse parmi tous les sérums ayant une concentration de Lp(a) supérieure à un seuil donné, et la spécificité est le pourcentage de sérums reconnus comme Lp(a) négatifs à l'électrophorèse parmi tous les sérums ayant une concentration de Lp(a) inférieure au seuil donné.

Lp(a) absente ou non détectable_fI

j^yl

I j

I ^iI

I

Liikaypres'eme"sous rofine a'uhe odsse
Lp(a)

Lp(a) présente sous forme d'une bande

pré-p

-L
·

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Figure 24 : Exemples de profils lipoprotéiques avec l'Hydragel LIPO + Lp(a)

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Le seuil de détection annoncé par le fabricant "se situe entre 0,15 et 0,20 g/I selon les sérums". Nous avons calculé pour notre série la sensibilité et la spécificité pour trois seuils de concentration : 0,20 0,25 et 0,30 g/I et deux critères de positivité :

- présence d'une bande bien individualisée entre les alpha- et les p ré bêta l i po p roté i nes,

- présence d'une bande définie comme ci-dessus, ou d'une "bosse" devant les alphalipoprotéines.

Les résultats suivants ont été obtenus :

Critères visuels -	Bande nette			Bande ou "bosse"
Seuils (g/I) 4.	Sensibilité p.cent	Spécificité p.cent		Sensibilité p.cent	Spécificité p.cent
0.20	68	97		79	91
0.25	70	93		80	86
0.30	89	92		92	83

Sensibilité et spécificité de la recherche de Lp(a) par électrophorèse

La sensibilité augmente avec le seuil de positivité et, pour un même seuil, est d'autant plus élevée que le critère de positivité augmente le nombre de positifs ("bosse").

Il existe deux risques :

- dépister une Lp(a) de concentration inférieure au seuil de détection de l'électrophorèse

- "passer à côté" d'une Lp(a) de concentration supérieure au seuil de détection de l'électrophorèse.

Ces deux risques sont minima quand la somme "sensibilité + spécificité" est la plus élevée.

Seuil	Bande	Bande ou bosse
0,20 g/I	1.65	1.70
0,25 g/I	1.63	1.66
0,30 g/I	1.82	1.75

Sommes "sensibilité + spécificité" de la recherche de Lp(a) à 3 seuils de concentration et selon 2 critères d'identification

Le seuil de dépistage qui minimise les deux risques est donc de 0,30 g/I avec comme critère de positivité la présence d'une bande.

L'analyse de ces résultats nous a incité à réaliser désormais les lipoprotéinogrammes avec l' Hydragel LIPO + Lp(a).

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