2.3.3.5. Propriétés immunologiques
Avant même que le séquençage de
l'apo(a) ne démontre l'homologie avec le plasminogène, une
parenté structurale entre les 2 molécules était
démontrée par des études immunochimiques.
Lors de Western-blotting destinés à
mettre en évidence des isoformes d'apo(a), l'équipe de Kostner
montre la présence d'une bande de PM 92 000 qui réagit avec les
divers antisérums polyclonaux et avec des anticorps monoclonaux
considérés comme spécifiques de la Lp(a). Cette bande
correspond à une protéine présente dans tous les plasmas
et se trouve dans la fraction de densité supérieure à 1,23
quand on isole la Lp(a) par ultracentrifugation.
L'immunoélectrophorèse montre qu'il s'agit du
plasminogène. De plus l'emploi de fragments de plasminogène
(kringles 1+2+3, kringle 4 seul) montre que le ou les épitopes communs
à l'apo(a) et au plasminogène sont situés dans le kringle
4, ce qui est confirmé peu après par le séquençage
149 .
Fless étudie les propriétés
immunochimiques du complexe apoB-apo(a) obtenu par délipidation de la
Lp(a). L'immunoréactivité de l'apo(a) dans ce complexe est 2 fois
plus forte que dans la Lp(a) suggérant que la délipidation
démasque des épitopes inaccessibles dans la Lp(a).
L'imunoréactivité de l'apoB dans ce complexe est au contraire
fortement diminuée (comme pour l'apoB obtenue par délipidation de
LDL) suggérant des modifications de conformation par
délipidation. Tout ceci corrobore que l'apoB est responsable de la
liaison aux lipides alors que l'apo(a) interagit surtout avec l'apoB et avec
l'environnement aqueux 152.
Thèse Docteur Pharmacie La lipoprotéine Lp(a) :
son intérêt dans l'interprétation du bilan lipidique Dr
GUIMONT MC 89/271 Lipides, Lipoprotéine (a),
Hyperlipoprotéinémie, Athérosclérose, Lipids,
Lipoprotein, Lpa, Hyperlipoproteinemia, Atherosclerosis
2.3.4. Génétique de
l'apoprotéine(a)
2.3.4.1. Le gène de
l'apoprotéine(a)
Le gène de l'apoprotéine(a) est
situé sur le bras long (q 26-27) du chromosome 6, à
proximité du gène du plasminogène (Figure 18)
I53
La structure du gène de l'apo(a) et son
homologie avec le plasminogène sont illustrées par la figure
12.
Le gène de l'apo(a) résulte d'une
duplication du gène du plasminogène, suivie de la
délétion des régions codant pour les kringles 1, 2 et 3 et
d'une mutation dans le domaine protéase. Après une
séquence non traduite en 5', vient une séquence codant pour un
peptide signal hydrophobe (rôle dans la sécrétion), un
grand nombre de répétition en tandem d'une séquence de 342
paires de bases codant pour le K4, les séquences du K5 et du domaine
protéase et, enfin, une séquence non traduite en 3'
126.
Les séquences des K4 de l'apo(a) ne sont pas
identiques. Le K4-1 et les 8 derniers K4 ( k43 à k4-10) diffèrent
des K4 répétés (k4-2, types A et B) par 11 à 71
nucléotides. Les types A et B du K4-2 diffèrent entre eux par des
substitutions nucléotidiques silencieuses. Deux nomenclatures sont
utilisées pour désigner les K4 non identiques.(Figure
17)
Chaque domaine kringle est codé par 2 exons
comme dans les autres gènes codant pour des structures en kringle
(urokinase, t-PA, fact. XII...).
1S3
Chromosome ti '...J 1
·
· 1f Il
1171 111;1 1 I ;4`INI- 7I II II
I D
aprnai
I--
· P.`1G-like
apolal-like
SS
K4112-51.
5
Domaine I .protéase .
Apo(a)
· cDNA
9\ 1~H
S
Répétitions
n n
Figure 18 : Localisation chromosomique des gènes
de l'apo(a) et du plasminogène
Thèse Docteur Pharmacie La lipoprotéine Lp(a) :
son intérêt dans l'interprétation du bilan lipidique Dr
GUIMONT MC 90/271 Lipides, Lipoprotéine (a),
Hyperlipoprotéinémie, Athérosclérose, Lipids,
Lipoprotein, Lpa, Hyperlipoproteinemia, Atherosclerosis
L'important degré de répétition
intra-génique du même domaine constitue un phénomène
unique. D'autres gènes contiennent des séquences
répétées en tandem (l'haptoglobine, de 1 à 6
pseudogènes répétés en tandem), mais dans l'apo(a)
leur nombre et leur degré d'homologie sont sans précédent
et en faveur d'une origine relativement récente du gène
154
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