2.1.2. Stratégie de recherche utilisée
L'hypothèse sur laquelle repose l'étude de Berg
est que les animaux développent des anticorps dirigés contre
plusieurs déterminants antigéniques (épitopes) de
l'antigène injecté, y compris de possibles épitopes
allotypiques. La stratégie utilisée consistait à immuniser
des lapins avec une préparation de bêtalipoprotéines
isolées du plasma d'un donneur unique.
Les antisérums obtenus peuvent ensuite être
rendus spécifiques d'un seul marqueur allotypique au moyen d'absorptions
spécifiques.
Préparation antigénique utilisée
Les bêtalipoprotéines du sérum d'un
individu Lp(a) + dans un panel de 20 sérums sont isolées par
chromatographie sur colonne d'hydroxyapatite. Les solutions de
bêtalipoprotéines utilisées pour l'immunisation ne
contenaient pas d'autre protéine détectable par
immuno-électrophorèse avec un antisérum anti-humain
total.
Immunisation des lapins
Après immunisation de trois lapins avec la
précédente préparation, les sérums de ces lapins
précipitent en immuno-diffusion double avec les 20 sérums totaux
du panel ainsi qu'avec les 20 fractions de bêtalipoprotéines
correspondantes.
L'immuno-électrophorèse démontre que les
anticorps précipitants anti-bêtalipoprotéines sont des
gammaglobulines. L'absence d'anticorps précipitant dans les
sérums des lapins avant l'immunisation avait été
vérifiée .
Les adsorptions
L'antisérum anti-bêtalipoprotéine humaine
obtenu est mis en contact avec chacun des sérums totaux et des fractions
isolées de bêtalipoprotéines des 20 sujets du panel. Chaque
aliquote d'immunsérums ainsi adsorbés est ensuite testé
par immunodiffusion double ou par
sérums
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totaux
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et des fractions de
|
|
immunoélectrophorèse contre chacun des
bêtalipoprotéines du panel.
Seuls certains sérums et les fractions
bêtalipoprotéines correspondantes provoquent l'apparition d'un
précipité.
Ces expériences permettent ainsi de séparer les
individus du panel en "répondeurs" (réaction positive) et en "non
répondeurs" (réaction négative).
Lorsque l'antisérum a été adsorbé
par le sérum d'un sujet non répondeur, l'immunsérum obtenu
ne réagit plus avec tous les sérums du panel mais seulement avec
certains.
Si c'est le sérum d'un sujet répondeur qui a
servi à l'adsorption, l'immunsérum obtenu ne réagit plus
avec aucun des sérums.
Thèse Docteur Pharmacie La lipoprotéine Lp(a) :
son intérêt dans l'interprétation du bilan lipidique Dr
GUIMONT MC 66/271 Lipides, Lipoprotéine (a),
Hyperlipoprotéinémie, Athérosclérose, Lipids,
Lipoprotein, Lpa, Hyperlipoproteinemia, Atherosclerosis
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