1.5.2.3. Séparation en fonction de la taille
La chromatographie de gel filtration,
l'électrophorèse en gel de polyacrylamide permettent de
séparer les lipoprotéines selon leur taille.
Grâce à ces techniques, les lipoprotéines
peuvent être définies par leur diamètre apparent,
établi par rapport à celui de protéines
globulaires de référence.
On obtient 4 classes principales qui correspondent
approximativement aux classes séparées
par ultra centrifugation.
- une fraction de très grande taille, 100 à 1000 nm
correspondant aux chylomicrons
- entre 30 et 70 nm sont trouvées les VLDL
- entre 18 et 25 nm on trouve les LDL
- les plus petites lipoprotéines, correspondant aux HDL,
peuvent être séparées en 2
sous-fractions de caractéristiques voisines, les HDL2 de
diamètre 10 à 13 nm et les HDL3
de diamètre 7 à 10 nm.
Ceci a permis de montrer qu'il existe une relation inverse
entre la taille et la densité des lipoprotéines (Tableau VI).
Dans la zone 25 à 30 nm, existent des
lipoprotéines mineures au moins dans les sérums normaux. C'est
dans cette zone que l'on trouve la Lp(a) de diamètre voisin de 28 nm. Il
est à remarquer que la règle de relation inverse entre taille et
densité n'est pas respectée pour cette lipoprotéine
puisqu'elle se situe dans un domaine de densité compris entre 1,050 et
1,120.
52
|
Chylomicrons
|
VLDL
|
LDL
|
HDL
|
Densité hydratée (g/I)
|
< 0,96
|
0,96 - 1,006
|
1,006 - 1,063
|
1,063 - 1,21
|
Poids Moléculaire moyen (dalton)
|
5,0.109
|
7,5.106
|
2,5.106
|
0,39.106
|
Mobilité
électrophorétique
|
origine
|
pré-bêta
|
bêta
|
alpha
|
Diamètre (nm)
|
100 - 1000
|
30 - 80
|
17 - 25
|
7 - 15
|
Tableau VI : Propriétés physiques des
lipoprotéines
Ces différentes techniques de séparation des
lipoprotéines, basées sur leurs propriétés
physiques ont révélé l'importante
hétérogénéité de ce système de
macromolécules et la difficulté d'un classement rigoureux.
La séparation par classes de densité
considérait la partie lipidique des lipoprotéines comme
principale responsable de l'hétérogénéité.
La reconnaissance du rôle des lipides dans l'athérosclérose
et le développement de travaux indiquant une possible relation
métabolique entre les classes majeures de lipoprotéines ont
polarisé l'intérêt sur la partie lipidique,
négligeant l'importance de la partie protéique pourtant
principale responsable de la stabilité
Thèse Docteur Pharmacie La lipoprotéine Lp(a) : son
intérêt dans l'interprétation du bilan lipidique Dr GUIMONT
MC 20/271 Lipides, Lipoprotéine (a), Hyperlipoprotéinémie,
Athérosclérose, Lipids, Lipoprotein, Lpa, Hyperlipoproteinemia,
Atherosclerosis
structurale et de la spécificité fonctionnelle
des lipoprotéines (Tableau VIII). C'est pourquoi il a
été proposé une classification des lipoprotéines
basée sur leur composition en apoprotéines.
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