Septicemie et choc septique

C.2. Détection de la croissance bactérienne :

a. Par incubation dans un automate : ?

5 jours suffisent pour les systèmes automatisés:

· majorité des agents pathogènes, mis en évidence en 2 jours.

· au-delà de 5 jours, croissance essentiellement de contaminants.

Les principales caractéristiques des automates:

- Pas de maintenance quotidienne.

- Détection automatique des positifs.

- Détection des flacons pré-incubés.

- Gestion des données.

- Connexion bidirectionnelle possible^10(*).

- Statistiques et sauvegarde.

- Télémaintenance possible.

BacT/Alert

Le Principe est d'incorporer dans chaque flacon un détecteur colorimétrique «CO₂ sensor" de coloration verte. Le sensor est séparé du bouillon par une membrane semi-perméable qui ne laisse passer que le CO₂. La production du CO₂ entraîne une diminution du pH et le sensor devient jaune. Le virage de couleur est interprété par réflectométrie, chaque lecture compare la variation de couleur à la précédente, chaque flacon dispose de sa propre cellule de lecture.

. Par incubation dans un étuve :

Les hémocultures sont placées à 37°C. Elles sont incubées 15 à 20 jours, examinés chaque jour ou mieux deux fois par jour et systématiquement subcultivées. (Chaque 2j).

Cet examen est macroscopique, il est possible en fonction de l'aspect d'un flacon de pressentir l'identité de la bactérie en cause:

Signe observé	Turbidité	Hémolyse	Production de gaz	Coagulum
Bactéries en cause	Bacille à gram négatif aérobie, Staphylocoque, Bactéroides	Streptocoque Staphylocoque Listeria Clostridium Bacillus	Bacilles à gram négatif aérobies anaérobies	Staph aureus

Chaque flacon suspect fera l'objet d'un examen microscopique, et d'une subculture en aérobiose et anaérobiose.

Les résultats doivent être transportés immédiatement au clinicien en précisant le nombre d'hémocultures positives, aérobiose ou anaérobiose, la morphologie et le Gram de la bactérie. Ce qui permettra d'instaurer un traitement antibiotique.

L'identification de la bactérie isolée et l'antibiogramme seront rendus au bout de 24-48 heures, car il y a des bactéries qui poussent lentement comme Clostridium perfringens.

REMARQUE : Pour la réalisation de la coloration Gram et la détermination de l'antibiotique convenable (grâce à l'antibiogramme), les bactéries doivent être cultivés sur divers milieux pour satisfaire les besoins nutritifs et énergétiques des bactéries à cultiver (Physiologie-Croissance). En pratique, on utilisés plusieurs milieux solides (gélosés) avec une technique particulière d'ensemencement (isolement orthogonal ou en cadran) permettant l'isolement de clones bactériens sous la forme de colonies (de l'ordre de 10⁶ bactéries).

* ¹⁰ Connexion bidirectionnelle entre machine et ordinateur.