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Impact de la fermentation alimentaire par les grains de kéfir sur les potentiels bioactifs de sirop de datte (phoenix dactylifera)


par Lina JEBALI
Ecole supérieure des Sciences et Techniques de la Santé de Tunis - Licence en Nutrition Humaine 2022
  

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Année Universitaire : 2021/ 2022

Ministère de l'Enseignement Supérieur et de la

Ministère de la Santé Recherche Scientifique

Université Tunis El Manar

Ecole Supérieure des Sciences et Techniques de la Santé de Tunis

Département de Nutrition Humaine

PROJET DE FIN D'ÉTUDES

Pour l'obtention de la licence nationale en Nutrition Humaine

Présenté publiquement le 16/06/2022

Par:

Jebali Lina

Né(e) le : 21/10/2000 À Tunis

TITRE

Impact de la fermentation alimentaire par les grains de Kéfir sur
les potentiels bioactifs de sirop de datte (Phoenix dactylifera)

Mots-clés

Fermentation, Kéfir, potentiels bioactifs, sirop de datte (Phoenix dactylifera)

Jury :

Président : Pr HAOUARI Mustapha Encadreur : Pr FATTOUCH Sami

Membres : - Dr GADACHA Wafa

- Mme MOUROU Basma

Année Universitaire : 2021/ 2022

Ministère de l'Enseignement Supérieur et de la

Ministère de la Santé Recherche Scientifique

Université Tunis El Manar

Ecole Supérieure des Sciences et Techniques de la Santé de Tunis

Département de Nutrition Humaine

PROJET DE FIN D'ÉTUDES

Pour l'obtention de la licence nationale en Nutrition Humaine

Présenté publiquement le 16/06/2022

Par:

Jebali Lina

Né(e) le : 21/10/2000 À Tunis

TITRE

Impact de la fermentation alimentaire par les grains de Kéfir sur
les potentiels bioactifs de sirop de datte (Phoenix dactylifera)

Mots-clés

Fermentation, Kéfir, potentiels bioactifs, sirop de datte (Phoenix dactylifera)

Jury :

Président : Pr HAOUARI Mustapha Encadreur : Pr FATTOUCH Sami

Membres : - Dr GADACHA Wafa

- Mme MOUROU Basma

Remerciement

J'exprime toute ma gratitude avant tout à Dieu, le tout puissant, qui m'a donnée le courage, la force et la foi pour mener à bien ce projet.

J'aimerais ensuite remercier toutes les personnes ayant contribué de près ou de loin à la réalisation de ce projet de fin d'étude et son exécution dans le laboratoire de biochimie et biologie moléculaire à l'institut National des Sciences Appliquées et de Technologie de Tunis (I.N.S.A.T), notamment :

- Monsieur, le professeur de génie biologique à INSAT (UCAR), FATTOUCHE Sami, pour m'avoir encadrée, donnée l'opportunité de travailler avec son équipe et confiée ce sujet.

- Madame BEN ABDALLAH Rym post-doctorante, Madame LAGHA Amel, Madame CHRIFA Hana Bioingénieurs contractuelles, et Madame BEN TEMESSEK Malek thésard au Laboratoire de Biochimie et Biologie Moléculaire à INSAT, pour le temps qu'elles m'ont consacré, leurs implications, leurs orientations judicieuses et toute l'aide qu'elles m'ont apportée à chaque fois que j'en ai besoin.

- Monsieur le professeur, de Biochimie Alimentaire HAOUARI Mustapha, d'abord pour la qualité de l'enseignement qu'il m'avait assurée durant ce parcours universitaire, ensuite pour le temps, l'intérêt et les compétences apportés dans le jugement de ce travail.

- Madame GADACHA Wafa, Docteur en Sciences Biologiques à la faculté des sciences de Bizerte, d'avoir accepté de juger ce travail.

- Madame MOUROU Besma, professeur en sciences de la santé, pour sa qualité d'encadrement durant les missions des stages, et pour avoir consacrée son temps dans le jugement de ce projet de fin d'études.

- Monsieur BEN SLEMA Fathi, Professeur et chef de département de la section Nutrition Humaine à l'Ecole de Santé de Tunis, pour avoir été toujours à l'écoute de tous les étudiants.

Je ne saurai clore cette page sans remercier tout(es) les professeurs, pour leurs contributions à des degrés divers dans ma formation dans les différents niveaux (primaire, secondaire et universitaire à l'Ecole Supérieure des Sciences et Techniques de la Santé de Tunis).

Dédicace

Ce travail est dédié à tous les êtres les plus chers à mon coeur, ceux qui m'ont encouragée d'amour, d'espoir et d'affection :

- Ma mère KENNOU JEBALI Rym, qui m'a oeuvrée par son amour et son soutien permanent depuis ma naissance, et su m'inculquer l'idée de ce projet de fin d'étude et en voilà aujourd'hui son rêve qui se réalise.

- Mon père JEBALI Foued, qui a consacré sa vie pour bâtir la mienne. Il a tant sacrifié pour que je puisse réussir dans ma vie.

- Ma grand-mère paternelle FAHEM Aziza, étant élevée par elle, m'a prodiguée dès mon jeune âge toutes les valeurs nobles et la meilleure éducation qu'on puisse acquérir pour traverser tout ce chemin et réussir dans la vie.

- Ma soeur JEBALI Phedra, à qui je souhaite un avenir radieux, celle qui n'a pas cessé de m'encourager dès mon jeune âge. Elle a été toujours là pour moi aussi bien dans les joies que dans les peines.

- Mon grand-père maternel feu KENNOU Salah, qui a tant sacrifié pour laisser un patrimoine familial riche en valeurs et une grande famille, couronné de succès. Au beau vieux temps, il m'a promis de corriger mon projet de fin d'étude, malheureusement, il nous a quitté pour un monde meilleur, puisse Dieu, le tout puissant, l'avoir en sa sainte miséricorde et l'accueil dans son éternel paradis.

- Ma grand-mère maternelle FENNICHE Janette qui a été toujours pour moi, un exemple de persévérance, de courage et de générosité.

- Ma tante Dr KENNOU Houda, ainsi que son époux ACHOUR Selim pour leur support et encouragement permanant.

- Tout le reste de ma famille : Ma tante KENNOU Samira, qui restera à jamais dans nos coeurs, Mes autres tantes et leurs époux, mes oncles et leurs épouses, mes cousins et cousines.

- Ainsi que mes ami(es) AYADI Eya, BEN SAID Skander, JERAB Donia, BELDI Ameni, KHEMIRI Arij et JENDOUBI Mariem, pour leurs aides, leurs encouragements et leurs soutiens morals tout au long de la réalisation de ce travail malgré leurs nombreuses préoccupations.

Liste des abréviations et symboles

% I : Pourcentage d'inhibition

°B : Degré Brix

°C : Degré Celsius

ug : Micromètre

ug : Microgramme

uL : Microlitre

CE : Equivalent Acide Chlorogénique

EAG : Equivalent Acide Gallique

EQ : Equivalent Quercétine

g : Gramme

IL-10 : Interleukine 10

IL-1â : Interleukine 1 bêta

L : Lait écrémé

L-f : Lait écrémé-fermenté

LS : Lait écrémé-Sirop de datte

LS-f : Lait écrémé-Sirop de datte-fermenté

M : Molaire

M/v : La masse volumique

mL : Millilitre

Nm : Nanomètre

PFE : Projet de Fin d'Etude

pH: Potentiel Hydrogène

Rpm: Revolutions per minute of rotor

S : Sirop de datte

Sacch-f : Saccharose fermenté

S-f : Sirop de datte-fermenté

TSS : Taux des matières sèches solubles

UV : Ultraviolet

A : Longueur d'onde

Liste des tableaux

Tableau I : Evaluation des connaissances de l'échantillon étudié sur le kéfir du

lait 33

Tableau II : Evaluation des connaissances de l'échantillon étudié sur le kéfir de

fruit 34

Tableau III : Evaluation des connaissances de l'échantillon étudié sur le sirop de datte.

35

Tableau IV : Evaluation de la qualité sensorielle des deux échantillons 37

Tableau V : Le degré d'acceptation de l'échantillon E1 (LS-f) 38

Tableau VI : Le degré d'acceptation de l'échantillon E2 (LS) 39

Tableau VII : Le degré d'acceptation de l'échantillon E5 (S-f) 39

Tableau VIII : Le degré d'acceptation de l'échantillon E6 (S-f) 40

Tableau IX : Estimation du niveau de commercialisation de ces produits alimentaires

dans le marché Tunisien 40

Liste des figures

Figure 1 : Les dattes 4

Figure 2 : Le lait écrémé stérilisé 4

Figure 3 : Les grains de Kéfir 4

Figure 4 : Des dattes coupées en morceaux 5

Figure 5 : Des dattes cuites à 80°C 5

Figure 6 : Des dattes broyées 5

Figure 7 : Le sirop de datte 5

Figure 8 : Les échantillons préparés et codés 7

Figure 9 : L'appareil de mesure du pH : Le pH-mètre 7

Figure 10 : L'appareil de mesure de l'indice de réfraction : Le refractomètre 8

Figure 11 : La centrifugeuse 9

Figure 12 : Le matériel nécessaire pour le dosage des polyphénols 10

Figure 13 : Variation de pH dans les huit échantillons, pendant

14 jours 15
Figure 14 :
Variation des matières sèches solubles dans les huit échantillons,

pendant 14 jours 18
Figure 15 :
Variation du poids des grains de Kéfir dans les échantillons, pendant

14 jours 21
Figure 16 :
Variation des polyphénols totaux entre les huit échantillons, pendant

14 jours 24
Figure 17 :
Variation des flavonoïdes totaux entre les huit échantillons, pendant

14 jours 27
Figure 18 :
Variation des pourcentages d'inhibitions anti-DPPH entre les huit

échantillons, pendant 14 jours 30

Table des matières

1. Introduction générale 1

2. Objectifs et stratégie de travail .3

3. Matériel et méthodes 4

3.1 Matériel ..4

3.1.1 Matériel biologique 4

3.1.2 Appareillages 4

3.1.3 Verreries et autres matériels 4

3.1.4 Produits chimiques, réactifs et solvants 5

3.2 Méthodes 5

3.2.1 Production de sirop de datte 5

3.2.2 Production de sirop de datte fermenté par les grains de kéfir 6

3.2.3 Préparation des échantillons 6

3.2.4 Détermination de pH 7

3.2.5 Détermination des matières sèches solubles 8

3.2.6 Détermination du poids des grains de kéfir 8

3.2.7 Centrifugation des échantillons 9

3.2.8 Détermination du taux des polyphénols totaux 9

3.2.9 Détermination du taux des flavonoïdes 11

3.2.10 Détermination du pouvoir antioxydant 12

3.2.11 Evaluation de la qualité organoleptique des échantillons 13

3.2.12 Recherches bibliographiques 13

3.2.13 Méthodes statistiques 14

4. Résultats 15

4.1 Variation de pH 15

4.2 Variation de taux des matières sèches solubles 18

4.3 Evolution du poids des grains de Kéfir 21

4.4 Variation de la teneur en polyphénols totaux 23

4.5 Variation de la teneur en flavonoïdes totaux 26

4.6 Variation du pouvoir antioxydant 29

4.7 Evaluation des caractéristiques organoleptiques 32

5. Discussion 42

5.1 Variation de pH 42

5.2 Variation de taux des matières sèches solubles 44

5.3 Evolution de poids des grains de Kéfir 45

5.4 Variation de la teneur en polyphénols totaux 46

5.5 Variation de la teneur en flavonoïdes totaux 49

5.6 Variation du pouvoir antioxydant .. 52

5.7 Evaluation des caractéristiques organoleptiques 54

6. Conclusion 56

Références bibliographiques 57

1

1.Introduction générale

Pendant des milliers d'années, la fermentation alimentaire été une majeure partie des habitudes et des traditions alimentaires des êtres humains [1]. Elle était l'un des moyens les plus anciens et les plus économiques pour la transformation et la conservation des denrées consommées [2].

Le processus de la fermentation alimentaire fait intervenir différents types de ferments à savoir les bactéries, les moisissures et les levures. Cette grande diversité de micro-organismes permet la réalisation de multiples fermentations : lactique, alcoolique, acétique et propionique [3].

Il existe notamment des ferments formés par une symbiose de levures et de bactéries, tel que les grains de kéfir. Ce mélange de micro-organismes s'interagit pour produire le boisson kéfir, dont sa composition est identifiée en fonction du type de substrat utilisé pour la fermentation, à savoir le kéfir laitier ou non laitier [4].

Le kéfir du lait est une boisson laitière générée par la fermentation du lactose issue du lait cru de vache, de chamelle, de chèvre ou de brebis [4]. Ce produit représente un aliment complet, puisqu' il possède des glucides, lipides et des protéines dont la teneur en acides aminés essentielles est plus élevée que celui du lait utilisé comme substrat de fermentation [5,6]. Cet aliment est aussi une source importante de vitamines et d'oligoéléments notamment le magnésium, le zinc et le calcium [5]. De plus, pendant le processus de la fermentation, des micro-organismes probiotiques et des composés bioactifs sont produits. Ce qui favorise le Kéfir à être [7] :

· Un aliment Hypo-tenseur, en produisant des peptides inhibiteurs de la conversion de l'angiotensine I en angiotensine II [8]. Par conséquent, ces derniers inhibent la production d'aldostérone, une hormone qui favorise l'augmentation de la concentration du sodium sérique, provoquant ainsi une augmentation de la pression artérielle [9].

· Un aliment Anti-diabétique, en augmentant l'activité inhibitrice de l'á-glucosidase. Cette dernière est une enzyme pancréatique capable de diminuer le taux de la glycémie postprandiale [10].

· Un aliment Anti-inflammatoire, d'une part, en augmentant l'expression de cytokine anti-inflammatoire (IL-10), et d'autre part en réduisant l'expression de la cytokine pro-inflammatoire (IL-1â) [11].

·

2

Un aliment Anti-cancéreux, en supprimant l'initiation de la croissance tumorale par la gêne de certaines enzymes aboutissant à la conversion des pro-cancérogènes en cancérogènes [5].

· Un aliment toléré chez les individus ayant une intolérance au lactose. Puisque, d'une part le kéfir du lait contient naturellement la B-galactosidase, qui est absente (ou bien faiblement présente) chez les personnes ayant une incapacité à digérer le lactose [12,13]. D'autre part, lors de la fermentation, les bactéries lactiques transforment le lactose en acide lactique [14].

Toutefois, le kéfir non laitier, connue sous le nom de Kéfir de fruit, est une boisson issue de la fermentation d'une solution sucrée par les grains de ce dernier. Cette solution peut être un extrait de jus ou de sirop de fruit tel que le sirop de datte [15].

Puisque l'essor de la culture du palmier dattier (Phoenix dactylifera) en Tunisie date d'il y a plus de sept siècles dans le Sud tunisien, des habitudes et des moeurs alimentaires se sont développées autour de cet aliment, poussant ainsi les oasiens à développer des méthodes de valorisation et de transformation du reste de leurs récoltes supposées être de faible valeur marchande à des sous-produits dattiers très appréciés localement tel que le jus ou le sirop de datte [16,17].

Ce projet s'attachera donc à faire de la Tunisie un leader dans les produits transformés des dattes, à travers la production d'un probiotique naturel à base des grains de kéfir additionnés au sirop de datte.

2.Objectifs et stratégie de travail

3

Dans le présent projet de fin d'études en Nutrition Humaine, nous envisageons de préparer une boisson probiotique à base de lait écrémé et de sirop de datte fermenté par les grains de Kéfir. Pour cela, nous avons préparé huit échantillons, de composition différente : Des échantillons à base de lait écrémé stérile, séparées ou en mélange avec le sirop de datte (11,2%), fermenté ou non. Un échantillon de (11,2%) sirop de saccharose fermenté par les grains de Kéfir, et aussi des grains de ce dernier maintenu dans de l'eau distillée. Ces échantillons seront étudiés pour évaluer l'influence de la fermentation par les grains de Kéfir durant 14 jours sur :

· Les caractéristiques physico-chimiques des produits fermentés : pH, poids des grains de kéfir et taux des matières sèches solubles.

· Teneur et activité antioxydante des molécules bioactives présentes dans les produits fermentés : polyphénols totaux, flavonoïdes totaux, ainsi que le pouvoir antiradicalaire anti-DPPH.

· La qualité sensorielle des produits fermentés : le gout, l'odeur, la couleur et la texture.

4

3. Matériels et méthodes

Cette étude descriptive prospective a été réalisé dans le laboratoire de biochimie et biologie moléculaire de l'I.N.S.A. T, en février 2022.

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"Nous devons apprendre à vivre ensemble comme des frères sinon nous allons mourir tous ensemble comme des idiots"   Martin Luther King