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Caractérisation génomique des bactériophages isolés en Côte d’Ivoire.


par Aboubacar SYLLA
Université Felix HOUPHOUET- BOIGNY - Master 2 biotechnologies-biosécurité 2017
  

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Extinction Rebellion

LISTE DES ABRÉVIATIONS

ADN : Acide désoxyribonucléique

AFLP : Amplified Fragment Length Polymorphism

ARN : Acide ribonucléique

ARNm : Acide ribonucléique messager (ARN messager)

ARNt : Acide ribonucléique transfert (ARN de transfert)

bp : paire de base

BSA : Bovine serum albumin

dsDNA : double-stranded DNA (ADN double brin)

dsRNA : double-stranded RNA (ARN double brin)

EDTA : Éthylène Diamine tétra-acétique acide

ICTV : International Committee on the Taxonomy of Viruses

IPCI : Institut Pasteur de Côte d'ivoire

kbp : kilobase pair

NaCl : chlorure de Sodium

NGS : Next Generation Sequencing

OMS : Organisation Mondiale de la santé

PCR: polymerase Chain reaction

PEG: polyEthylène Glycol

PFGE: Pulse Field Gel Electrophoresis

RADP: Random Amplified Length Polymorphism

RFLP: Restriction Fragment Length Polymorphism

Rpm : Rotation par minute

SDS : Sodium Dodecyl Sulfate

TAE : Tris-Acetate-EDTA

TBE : Tris-Borate-EDTA

ufp/ml : Unité formant plage de lyse

RFLP : Restriction Fragment Length Polymorphism

LISTE DES FIGURES

vii

Figure 1 : Schéma illustrant la morphologie et les différentes protéines structurales (Effantin, 2005): . 5

Figure 2 : Schéma des cycles d'infection phagique (lytique et lysogénique) (García et al., 2010). 8

Figure 3 : Processus d'infection du phage T4 (Kanamaru et al., 2002). 15

Figure 4 : Arbre phylogénétique des Caudovirales (Roux et al., 2012). 17

Figure. 5 : Carte génétique du génome du bactériophage T4 (Miller et al., 2003). 19

Figure 6 : Schéma descriptif de l'électrophorèse en champ pulsé. 30

Figure 7: Profil des phages après digestion par des endonucléases. 36

Figure 8 : Électrophorèse en champ pulsé de bactériophage digéré par l'enzyme de restriction XbaI 38

Figure 9 : Dendrogramme généré par le logiciel Bionumerics® avec l'enzyme XbaI. 38

Figure 10: Électrophorèse en champ pulsé des génomes de bactériophages après digestion par XhoI.40

Figure 11 : Dendrogramme généré par le logiciel Bionumerics® avec l'enzyme XhoI. 40

viii

LISTE DES TABLEAUX

Tableau I : Différents gènes fonctionnels en fonction des couleurs (Miller et al., 2003). 20

Tableau II: Matériel biologique 22

Tableau III : Appareils et consommables 22

Tableau IV : Réactifs et Tampons du PFGE 23

Tableau V : Réactifs et Tampons 24

Tableau VI : Les caractéristiques des endonucléases utilisées 24

Tableau VII : Mélange réactionnel de la digestion enzymatique 28

Tableau VIII : Mélange réactionnel de la pré-digestion enzyamtique du PFGE 33

Tableau IX: Mélange réactionnel de la digestion enzyamtique du PFGE 33

Tableau X : Détermination du profil génomique des phages. 36

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"La première panacée d'une nation mal gouvernée est l'inflation monétaire, la seconde, c'est la guerre. Tous deux apportent une prospérité temporaire, tous deux apportent une ruine permanente. Mais tous deux sont le refuge des opportunistes politiques et économiques"   Hemingway