2.3.3. Test de confirmation (TEST DE MAC KENZIE)
Le test de confirmation ou test de MAC KENZIE est
basé sur la recherche de COLIFORMESTHERMOTOLERANTS parmi
lesquels on redoute surtout la présence D'ESCHERICHIA COLI. Les
COLIFORMESTHERMOTOLERANTS ont les mêmes propriétés
de fermentation que les COLIFORMES mais à
44°C. ESCHERICHIA COLI est un
COLIFORMETHERMOTOLERANT qui entre autre :
· Produit de l'indole à partir du
tryptophane à 44°C.
· Donne un résultat positif à l'essai au
rouge de méthyle.
· Ne produit pas de
l'acétyleméthyleCARBINOL.
· N'utilise pas le citrate comme source unique
de carbone.
Les tubes de BCPL trouvés positifs lors du
dénombrement des COLIFORMES TOTAUX feront l'objet d'un
repiquage à l'aide d'un ose bouclé dans tube contenant le milieu
SCHUBERT muni d'une cloche de DURHAM. Chasser le gaz
présent éventuellement dans les Cloches de DURHAM et
bien mélanger le milieu et l'inoculum. (Tony HART, Paul
SHEARS)
Schéma 05
Repiquage sur milieu SCHUBERT PLUS CLOCHE
1
1
1
Incubation pendant 24 hdans44°C
Ajouter 2 à 3 gouttes de KOWACS
+
+
-
-
+
-
18
2.3.3.1. Incubation
L'incubation se fait cette fois-ci au bain marie
à 44°C, pendant 24 h.
2.3.3.2. Lecture
Sont considérés comme positifs, les tubes
présentant à la fois :
· Un dégagement gazeux.
· Un anneau rouge en surface, témoin de la
production d'indole par ESCHERICHIA COLI après
adjonction de 2 à 3 gouttes du réactif de
KOWACS.
2.3.3.3. Illustration
En reprenant l'exemple précédent relatif au
dénombrement des COLIFORMES TOTAUX, cela suppose que nous avons
6 tubes à repiquer à savoir :
· Le flacon de BCPL D/C.
· 3 tubes sur 5 de BCPL
D/C.
· 2 tubes sur 5 de BCPL
S/C.
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Inoculum
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Test de confirmation
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Nombre Caractéristique
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Gaz
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Indole
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1*50 ml
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+
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+
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1
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5*10 ml
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+
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-
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1
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|
+
|
+
|
|
-
|
+
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5*01 ml
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-
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+
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1
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|
+
|
+
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Tableau 03
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