Deuxième partie
Travaux pratiques au niveau deslaboratoires de la
laiterie« SIDI SAADA »
Première chapitre
Applications dans laboratoire microbiologique
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Introduction
La tempe que j'entre laboratoire de microbiologie, la
technicien ma rappelé des conditions essentiels de pour faire la
manipulation de attention situation, et après j'ai applique vos travails
collective comme suivis :
Les laits étant des produits liquides constitueront
d'emblée donc une solution mère. Les produits laitiers ( laits
secs en poudre, yaourt, fromages, desserts lactés et autres étant
des produits solides, feront l'objet de dilutions décimales, mais au
préalable il est nécessaire de procéder à leur
homogénéisation à l'aide de techniques et d'appareils
appropriés Broyeurs homogénéisateurs, STOMATCHER.
(Richard BELIVEAU, Denis GINGRAS)
2.1. Préparation des échantillons
2.1.1. Prise d'essai
Les prises d'essai sont effectuées sur
l'échantillon homogénéisé en tenant compte de deux
facteurs essentiels à savoir :
· Le nombre de pièces soumises à l'analyse
d'une part.
· Les opérations analytiques à conduire.
Mais, en général, on prélève trois
fois 25 ml ou 25 g :
· Les premiers serviront à l'analyse
bactériologique courante.
· Les seconds serviront à la recherche de
SALMONELLA - SHIGELLA.
· Les troisièmes serviront à la recherche
des LISTERIA. (Tony HART, Paul SHEARS)
2.1.2. Cas des produits liquides
Dans le cas des produits liquides, le mélange de trois
à cinq sachets de lait par exemple constituera la solution mère
(SM = 1).
Dilutions décimales :
· Introduire ensuite aseptiquement à l'aide d'une
pipette en verre graduée et stérile, 1 ml de la
SM, dans un tube à vis stérile contenant au
préalable 9 ml du même diluant : cette dilution est
alors au 1/10 ou 10-1.
· Introduire par la suite 1ml de la dilution
10-1 dans un tube à vis stérile contenant au
préalable 9 ml du même diluant ; cette dilution est
alors au 1/100 ou 10-2. (Tony HART, Paul
SHEARS)
Introduire ensuite aseptiquement à l'aide d'une pipette
en verre graduée et stérile, 1ml de la dilution
10-2 dans un tube à vis stérile contenant au
préalable 9 ml du même diluant ; cette dilution est alors
au 1/1000 ou 10-3.
Lait
SM=1
9ml
TSE
(10_1)
9ml
TSE
(10_2)
1ml
1ml
Schéma 01
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2.1.3. Cas des produits solides
Dans le cas des produits solides, introduire aseptiquement
25 g de produit à analyser dans un bocal stérile
préalablement taré ou dans un sachet stérile de type
STOMATCHER contenant au préalable 225 ml de diluant soit
le TSE (TRYPTONE SEL EAU) homogénéisé. Cette
suspension constitue alors la dilution mère (DM) qui correspond
donc à la dilution 1/10 ou 10-1.
Dilutions décimales :
· Introduire ensuite aseptiquement à l'aide d'une
pipette en verre graduée et stérile 1ml de la
DM, dans un tube à vis stérile contenant au
préalable 9 ml du même diluant ; cette dilution sera
alors au 1/100 ou 10-2.
· Introduire par la suite 1ml de la dilution
dans un tube à vis stérile contenant au préalable 9
ml du même diluant ; cette dilution est sera alors au
1/100 ou 10-3.
· Introduire ensuite aseptiquement à l'aide d'une
pipette en verre graduée et stérile, 1 ml de la dilution
10-3 dans un tube à vis stérile contenant au
préalable 9 ml du même diluant ; cette dilution est
alors au 1/1000 ou 10-4. (Tony HART, Paul
SHEARS)
25g dans 225ml TSE
SM=10_1
9ml
TSE
(10_2)
9ml
TSE
(10_3)
1ml
1ml
Schéma 02
Remarque 1 :
Ces dilutions serviront à la recherche des germes
suivants :
· GERMES AÉROBIES MÉSOPHILES TOTAUX.
· COLIFORMES TOTAUX ET FÉCAUX.
· STAPHYLOCOCCUS AUREUS.
· LEVURES ET MOISISSURES.
Remarque 2 :
· Au moment de la réalisation des dilutions
décimales, impérativement de changer de pipettes entre chaque
dilution.
· Contrairement à cela, lors de l'ensemencement
recommande de commencer par la plus forte dilution à savoir
10-3dans le but justement de ne pas changer de pipettes. On
travaillera alors à l'aide d'une pipette graduée en verre
stérile de 5 ml.
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