Polymorphisme des antigenes plaquettaires humains dans la population tunisienne

3- Polymorphisme et transmission génétique des HPAs 

A présent, 24 HPAs allo-antigènes spécifiquement plaquettaires ont été définis sérologiquement à l'aide d'allo-anticorps allo-immuns correspondants, dont seulement 12 sont groupés dans six systèmes bialléliques (HPA-1,-2,-3,-4,-5,-15) avec des anticorps sériques contre les deux allo-antigènes. D'autres systèmes antigéniques rares ou privés sont aussi détectés avec un seul allo-anticorps correspondant. La base moléculaire de 22 antigènes parmi les 24 définis sérologiquement est résolue. Pour les 21 HPAs, la différence entre les 2 allèles est due à la substitution d'un seul nucléotide (SNP) au niveau du gène codant (Metcalfe. P et al., 2003 ; Bugert. P et al., 2005). Sera à l'origine de la substitution d'un seul aa aux niveaux de l'une des six GPs majeurs, matures de la membrane plaquettaires (Koutsogianni. P. 2004). L'antigène HPA-14w constitue la seule exception puisque son polymorphisme est obtenu par une délétion de trois nucléotides, il en résulte la perte d'un seul aa. Donc la plupart de ces polymorphismes est un seul point de mutation de l'allèle de type sauvage (Newman. P. J et Valentin N., 1995; Santoso. S. A et al., 1999). Tous les allo-antigènes spécifiques aux PLTs sont hérités par codominance autosomale (Kulkarni. B et al., 2002).

4- Les différents allo-antigènes spécifiquement plaquettaires 

1- Les systèmes les plus impliqués en pathologies humaines

Le système HPA-1; (P1A, Zw) 

· Génétique du système HPA-1 

L'antigène Duzo, appelé également (PLA, Zw), a été identifié en 1959 par Van Loghem (Van Loghem. J. J et al., 1959), il est désigné par HPA-1 (Newman. P. J et al., 1985). C'est le système plaquettaire le plus important cliniquement (Williamson. L. M et al., 1998).

L'expression bialléliques de HPA-1 donne les antigènes allèles HPA-1a (Pl^Al) (GP3A*01) et HPA-1b (Pl^A2) (GP3A*02) qui différent par un SNP 196T>C sur l'exon 2 du gène codant ITGB3/GP3A. Ce SNP cause une substitution Leu₃₃/Pro₃₃ de l'extrémité N-terminale de la GPIIIa mature (Tableau IV). Ce qui donne des différences considérables dans les structures secondaires des deux formes alléliques (Newman. P. J et al., 1989).

Cette substitution mène à la formation de l'épitope HPA-1 (Goldberger. A et al., 1991; Honda. S et al., 1995), est localisée à l'apex Cys26-Cys38 du boucle AB du domaine PSI (Xiong. J.P et al., 2004; Santoso. S. A et al., 2006). Les déterminants antigéniques sont localisés en outre sur un fragment non carbohydraté de 17-23-kDa (Newman. P. J et al., 1985; Van Der Shoot. C. E et al., 1986). Les aa de 1 à 66 (Barron-Casella. E.A et al., 1999) et de 288 à 490 contribuent à la formation de l'épitope HPA-1a. Il est possible que la séquence 288-490 maintienne la boucle Cys²⁶-Cys³⁸ dans une orientation appropriée par rapport au reste de la molécule â₃ et de cette façon elle maintient la présentation antigénique adéquate dans cette boucle (Honda. S et al., 1995).

L'analyse de l'ADN génomique d'un individu a révélé la présence d'un nouveau SNP C¹⁷⁵G dans le gène ITGB3 qui conduit à une substitution Leu³³Val pour donner un troisième allèle HPA-1(ITGB3*001.1) (Fig.6). La mutation naturelle Leu₃₃Val peut interrompre quelques épitopes HPA-1a. Ces conclusions fournissent l'évidence pour une réponse humorale hétérogène contre l'antigène HPA-1a qui peut avoir la possibilité d'être impliqué dans les désordres de NAITP.

Figure 6. Nouvelle variante de l'allèle HPA-1a.

La mutation C>G de l'ADN_C de l'intégrine â3 en position 175 (â3-Leu33; HPA-1a) et le résultat d'un nouveau variant allélique différent ITGB3*001.1 codant pour Val³³. La mutation T>C à la position 176 résultat d'un allèle ITGB3*002 qui code pour Pro³³ (HPA-1b) (Santoso S. A et al., 2006).

L'Arg 93 du GPIIIa contribue à la formation de l'épitope HPA-1a au niveau des cellules B (Watkins. N. A et al., 2002). Un nouveau SNP G³⁷⁶A du gène codant ITGB3 est le résultat d'une substitution d'un seul aa Arg⁹³Gln au niveau de l'intégrine â₃ remplaçant l'allèle Leu33 (Watkins. N. A et al., 2002).

La configuration de l'épitope HPA-1 n'a pas été complètement élucidée.

· Implications cliniques 

La réponse humorale de l'antigène HPA-1a est hétérogène (Valentin. N et al., 1995). Les anticorps Anti-HPA-1a produits par les réponses immunes peuvent mener à la destruction des PLTs (Mueller-Eckhard. C et al., 1989; Okamoto. N et al., 1998) dans les désordres cliniques tels que NAIT (Blanchette. V. S et al., 2000), le PTP et aux transfusions des les PLTs. En plus de ces désordres immunologiques, le polymorphisme du système HPA-1 est associé à plusieurs autres maladies. D'ailleurs, l'altération de la structure moléculaire de la GPIIIa au niveau des allèles HPA-1 peut affecter la fonction du GPIIb/IIIa.

De même, le polymorphisme du HPA-1b est associé au risque de la thrombose coronaire (Weiss. E.J et al., 1996; Kadir et al., 1999; Kroll. H et al., 2001).

Des différences dans la prédominance de ces désordres génétiques ont été observées chez les différents groupes ethniques. Carlsson et al., en 1997 ont montré qu'il n y'a pas association entre le polymorphisme HPA-1 et l'IS (Carlsson. L. E et al., 1997). De même, van Goor et al., en 2003 ont prouvé que la relation entre l'allèle HPA-1b et ce désordre est incertaine (Van Goor. M.L.P.J et al., 2003). Cependant, Jimmy Lim et al en 2003 ont affirmé que ces allèles peuvent être associés positivement à l'IS (Jimmy Lim et al., 2003). Le polymorphisme Pl^A est associé à l'agrégation accrue des PLTs (Huang. T et Mervyn. A. S. 2003). Ainsi l'agrégation plaquettaire joue un rôle central dans la pathogénie de la thrombose aiguë, dans la maladie des coronaires, l'IS et les maladies artérielles périphériques (Ulrich. H. F et al., 2003). De ce fait, l'étude faite par Weber et al en 2002 a démontré une hyperréactivité considérable des PLTs chez les malades avec l'artère coronaire.

v Implications cliniques de l'allèle HPA-1a 

L'allo-antigène HPA-1a et le plus impliqué dans les cas de NAIT, que les thrombopénies néonatales résultantes sont profondes et que ça donne les formes les plus sévères. En plus des trois principaux désordres cliniques, le polymorphisme de HPA-1a été identifié comme un facteur héréditaire du risque thrombotique (Weber. S et al., 2002) tel que l'IM (Weiss. E. J et al., 1996; Walter et al., 1997; Zotz. R. B et al., 1998; Nauck. M. S et al., 1999; Mathew. J. G et al., 2001; Hohlagschwandtner. M. M. D et al., 2003). Le génotype Pl^A1/A1 est associé avec la CAD sévère chez des malades caucasiens de la région nord de la Pologne (Gruchala. M et al., 2003). Normalement, les homozygotes Pl^A1/A1 ont un risque hémorragique plus élevé (Morawski. W. MD. PhD. M et al., 2005).

v Implications cliniques de l'allèle HPA-1b 

Les individus qui portent l'allèle HPA-1b paraissent avoir un haut risque pour les événements cardio-vasculaires (Weiss. E. J et al., 1996; Wagner. K et al., 1998; Carter. A. M et al., 1996; Vijayan. K. V et al., 2000; Santoso. S. A et al., 2002). Ainsi en 1996, Weiss et al été les premiers à démontrer la grande prédominance de l'allèle Pl^A2 dans l'IM chez les malades. Ce même allèle constitue un risque pour les maladies de l'artère coronaire (Weiss. E. J et al., 1996) (Jimmy Lim et al., 2003). Il peut être associé positivement avec des complications thrombotiques d'athérosclérose tels que l'IS. Quelques études ont aussi montrés des résultats contradictoires (Korral et al., 1997; Ghosh. K et al., 2002). Un rare polymorphisme GPIIIa ^{Leu 40/Arg 40} est lié à l'antigène 1b (Walchshofer. S et al., 1994).

Le polymorphisme Pl^A1/A2 est fortement associé avec les maladies ischémiques cardio-vasculaires et l'IM aigu (Weiss. E. J et al., 1996; Feng. D. M. D et al., 2001; Huang. T et Mervyn. A. S. 2003; Bojesen. S. E et al., 2003; Lopes. N. H. M et al., 2004). Le variant allélique PI^A2 est un facteur héréditaire du risque des événements coronaires aigus (Lim et al., 2003) et au restenosis (Kastrati. A. M. D et al., 1999).

Il y a une interaction entre le polymorphisme des fumeurs Pl^A2 et le CAD (Lopes. N. H. M et al., 2004). Les porteurs de l'allèle Pl^A2 sont considérablement protégés contre SAH. De même, ces allèles réduisent largement le risque de SAH (Iniesta. J. A et al., 2004). Les malades qui portent ces allèles présentent de plus grands anévrismes, mais l'extension de leur hémorragie et le niveau clinique sont considérablement inférieurs quand on les compare avec les malades HPA-1a/a (Juan. A et al., 2004). Il est remarquable que l'allèle HPA-1b paraît réduire la sévérité de l'hémorragie chez les malades avec Thrombasthénie de Glanzmann (Ghosh. K et al., 2002; Juan. A et al., 2004) ou l'athérosclérose comme il peut réduire le risque et la sévérité de l'hémorragie subarachnoid (Iniesta. J. A et al., 2004; Corral. J et al., 2004). Le système HPA-2; (Ko, Sib) 

· Génétique du système HPA-2 

Il a été décrit pour la première fois par Van der Weerdt en 1961. C'est un système di-allélique localisé sur un domaine globulaire de 45 kDa du coté N-terminal du de la GPIbá (Kuijpers. R. W. A. M et al., 1989; Kuijpers. R. W. A. M et al., 1992). Les deux formes alléliques (HPA-2a ou Ko^b et HPA-2b ou Ko^a ou Sib^a) sont dus à une substitution d'un seul nucléotide SNP (C/T Cyt/Thy (ACG)/ (ATG)) (Kuijpers. R. W. A. M et al., 1992a) dans l'exon 2 en position 434 du gène codant GP1BA. Ce polymorphisme se traduisant par une substitution d'un seul aa 145 Thr/Met qui se trouve dans le cinquième LRR (Murata. M et al., 1992).

· Liaison génétique du polymorphisme HPA-2 avec d'autres polymorphismes

Le polymorphisme du système HPA-2 pourrait être lié génétiquement à deux autres polymorphismes : les polymorphismes VNTR (Simsek. S et al., 1994; Afshar-Kharghan. V et al., 1999; Chester. Q et al., 2000) et les polymorphismes de Kozaki (Kozak polymorphism) (Afshar-Kharghan. V et al., 1999; Chester. Q et al., 2000).

Le polymorphisme HPA-2 est en déséquilibre de liaison avec le polymorphisme de VNTR (Deckmyn. H et al,. 2004) auquel il est fortement lié. Le HPA-2a (Thr¹⁴⁵) est associé au VNTR-C et au VNTR-D alors que l'allèle HPA-2b (Met¹⁴⁵) est lié au VNTR-A et au VNTR-B (Simsek. S et al., 1994; Aramaki. K. M. et Reiner A. P. 1999). En effet, les allèles avec une ou deux répétitions sont liés à l'isoforme Thr (HPA-a), alors que les allèles avec trois ou quatre répétitions sont liés à l'isoforme Met (HPA-b) (Ulrichts. H et al., 2003). Tandis que d'autres études de génotypage des PLTs étaient contradictoires en montrant un effet fonctionnel provoqué par ce dimorphisme (Mazzucato et al., 1996; Boncler et al., 2002; Jilma-Stohlawetz. P et al., 2003; Deckmyn. H et al., 2004). Les distributions alléliques de la GPIbá VNTR et HPA-2 diffèrent considérablement selon les différentes populations. Par exemple, l'allèle VNTR-A est trouvé presque exclusivement en Asie de l'est (Aramaki. A K. M. et Reiner. A. P. 1999).

Ces polymorphismes influent sur la structure et le niveau d'expression de la GPIbá qui possède un effet potentiel sur les maladies thrombotiques.

· Implications cliniques du polymorphisme du système HPA-2 

L'exposition au non soi des formes allo-antigèniques du système HPA-2 au cours de la grossesse ou après transfusion peut mener à la formation des allo-anticorps qui peuvent causer la NAITP (Kuijpers. R. W. A. M et al., 1992), PTR (Kuijpers. R. W. A. M et al., 1992a) et le PTP (Chester. Q et al., 2000).

De même, le rapport entre les allèles HPA-2b et VNTR-B est considéré comme un facteur à risque thrombotique pour les maladies cardio-vasculaires (Aramaki. K. M. et Reiner. A. P. 1999), ce qui suggère que ces variantes ont pu évoluer, au moins en partie, à cause de la pression sélective pour activer l'hémostase (Aramaki. K. M. et Reiner. A. P. 1999). Des études récentes ont montré qu'il existe une association des génotypes HPA-2a/2b ou HPA-2b/2b avec L'IS ou avec des maladies cardio-vasculaires. D'ailleurs, c'est parce que le polymorphisme HPA-2 est localisé près des sites de fixation du FvW et la thrombine qu'il pourrait causer une variation conformationnelle dans la structure de GPIbá qui peut affecter le site de liaison des ligands.

Le système HPA-2 fait modifier la conformation au niveau de la région aa-1-59 de GPIbá, ce qui résulte en une interaction plus forte du FvW avec HPA-2a (Ulrichts. H et al., 2003). L'association entre le polymorphisme VNTR et les événements thrombotiques est vague parce que GPIbá est aussi un récepteur pour P-sélectine, Mac-1, FXI, FXII et le kininogène de haut poids moléculaire. Le polymorphisme HPA-2 pourrait affecter aussi ces interactions qui pourraient être à la base de risques thrombotiques (Ulrichts H et al., 2003). 

Un nombre limité d'études ont démontré une association entre les allèles Met¹⁴⁵ (VNTR A ou B) et le risque des maladies cardio-vasculaires (Murata. M et al., 1992; Murata. M et al., 1997; Gonzalez-Conejero. R et al., 1998; Murata. M et al., 1998) tandis que d'autres études n'ont pas trouvé cette association (Carlsson. L. E et al., 1997; Carter. A. M et al., 1998). Dans une étude récente le HPA-2 Met/VNTR-B a été associé à des événements importants de l'IM et la mort des vieillards malades (Mikkelsson. J et al., 2001).

Les études ont des contradictions dans la répartition du risque de polymorphisme du complexe GPIb/IX/V dans différents groupes ethniques. Chez les populations européennes, le génotype VNTR B/C est associé à une augmentation du risque des maladies de l'artère coronaire dans la population espagnole, mais aucune association n'a été détectée chez la population française (Mercier. B et al., 2000). En outre, Chez les Américains, le génotype VNTR C/C est associe avec un risque faible des événements coronaires (Murata. M et al., 1998; Afshar-Kharghan. V et al., 1999a). La présence de l'allèle VNTRB possède un risque significatif de NAION (Salomon. O et al., 2004).