3. Aromatogramme
L'AG est une technique créée en 1973 par
GIRAULT, à partir de la technique de l'antibiogramme, et qui permet de
mesurer in vitro le pouvoir antibactérien des HE (44)(45).
|
Le principe est semblable à celui de l'antibiogramme :
une gélose est ensemencée et on y place des disques de papiers
buvards imbibés d'HE. Après incubation, on observe alors des
halos d'inhibition, dont on peut mesurer le diamètre, ce qui permet
ainsi de quantifier le pouvoir antibactérien de chaque HE (44).
|
8
Figure 1 - Illustration d'un résultat
d'aromatogramme (d'après DOLISI Georges (2013) et retravaillé par
RENOUL Hugues-Antoine (2014) "Le Docteur Valnet, le soin par la
nature")
Cette technique ne comporte pas encore de protocole
normalisé, mais est pratiquée par certains laboratoires
(notamment LABOVET CONSEIL aux Essarts-en-Bocage, France, BACTOLAB à
Lausanne, Suisse, et VEBIO à Arcueil, France : voir Annexe I, II et
III), et ce en utilisant différentes compositions (HE pure ou
diluée, avec utilisation ou non d'un dispersant) et différentes
quantitées déposées sur les disques (46).
9
MATERIEL ET METHODES
1. MATÉRIEL
1.1. Huiles essentielles
Nous avons sélectionné 6 HE, pour leurs
potentielles activités antibactériennes décrites dans la
littérature, et en éliminant les HE les plus toxiques. Elles ont
été achetées via le site MYRTÉA OSHADI. Le
tableau ci-dessous présente ces HE.
Figure 2 - Huiles essentielles utilisées dans cette
étude et leurs caractéristiques (d'après MYRTÉA
OSHADI)
|
Huile
essentielle
|
Nom
scientifique
|
Provenance
géographique
|
Partie de la
plante
|
Chémotype
|
|
Origan
vulgaire
|
Origanum
vulgare
|
France
|
Plante
|
Carvacrol, Linalool, Thymol,
Paracymene, gamma-Terpinene
|
|
Tea Tree
|
Melaleuca
alternifolia
|
Australie
|
Feuilles
|
Terpinene-4-ol, gamma-Terpinene,
alpha-Terpinene,
Paracymene, 1,8-
Cineol
|
|
Achillée
millefeuille
bleue
|
Achillea
millefolium
|
Hongrie
|
Fleurs/Plante
|
alpha- & beta-Pinene, Sabinene,
1,8-Cineol,
Camphene,
Chamazulene, Isoartemisia cetone,
Borneone
|
|
Pin
sylvestre
|
Pinus
sylvestris
|
France
|
Aiguille
|
alpha- & beta-Pinene, Limonen,
Camphene,
delta-3-Carene,
Myrcene
|
|
Eucalyptus
globuleux
|
Eucalyptus
globulus
|
Espagne
|
Feuilles
|
1,8-Cineol, alpha-Pinene,
Limonene,
Paracymen,
Aromadendrene, Globulol, trans-
Pinocarveol
|
|
Lavande
|
Lavandula
augustifolia
|
France
|
Fleurs
|
acétate de linalyle
|
1.2. Souches bactériennes
- Staphylococcus pseudointermedius issus de
prélèvements au niveau d'infections cuantées au niveau du
pli du paturon de chevaux (prélèvements sur 4 chevaux,
numérotés de 1 à 4 pour différencier des germes
issus de souches différentes)
- Escherichia coli issu des selles d'un chat
souffrant d'une infection plasmo-lymphocytaire
- Klebsiella spp. issu des selles d'un chat
(numéroté 1) ou de la fourchette infectée d'un cheval
(numéroté 2)
- Pasteurella multocida issu d'un
prélèvement au niveau de la bouche d'un chat victime
d'infection
- Corynebacterium pyogenes issu d'un
prélèvement au niveau de la fourchette infectée d'un
cheval
Le genre et l'espèce de ces bactéries ont
été déterminées par diagnostic indirect (analyse de
l'effet de la bactérie sur l'organisme où elle a
été prélevée) et diagnostic direct : aspect au Gram
et isolements sur divers milieux de culture : CHROMID CPS ELITE OPAQUE (voir
10
Annexe VII), CHAPMAN (voir Annexe VIII), MACCONKEY (voir
Annexe IX), HEKTOEN (voir Annexe X), et MUELLER-HINTON BLOOD (Voir Annexe
XI).
Une identification plus sûre et plus précise
aurait pu être réalisée via la réalisation
d'un test PCR ou l'utilisation d'une galerie API. Néanmoins, ces
méthodes sont plus coûteuses, et ne sont pas forcément
nécessaires dans le cas de notre étude sur l'AG, dont l'objectif
principal est la détermination d'un protocole permettant de
déterminer l'effet antibactérien des HE, et non pas la
quantification de cet effet sur une bactérie specifique.
| 
