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Développement d'une technologie en bactériologie : l'aromatogramme


par Elisa CHAROUSSET
Université Paris-Saclay - Licence de Biologie 0000
  

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2. Identification de groupe ou genre :

· Colonies de couleur turquoise et observation de cocci Gram (+) à l'examen direct : genre Enterocaccus.

Si une de ces conditions n'est pas remplie, [identification du micro-organisme isolé doit être réalisée par des tests complémentaires.

· Colonies de couleur bleu vert à bleu gris et observation de bacilles Gram (-) à l'examen direct : groupe KESC.

L'identification du micro-organisme isolé doit être poursuivie par des tests complémentaires.

·

Gélase chromIDTM CPS (CPS) 15439 B-fr-2010105

Colonies beige avec halo marron ou tapis bactérien marron :

Effectuer alors une recherche de l'indole avec le réactif ID Indole-TDA ou avec le réactif de JAMES : déposer une colonie sur un disque de papier préalablement imbibé d'une goutte de réactif R1 du coffret ID Indole TDA ou d'une goutte du réactif de JAMES. Noter la coloration obtenue au bout de quelques secondes :

Coloration
réactif de
James

Coloration
réactif ID
Indole-TDA

Interprétation

Identification

Rose a rouge

Bleue

Indole (+)

Proteus

indologène,
Providencia ou
Morganella

Absence de
coloration rose
â rouge

Absence de
coloration bleue

Indole (-]

Proteus
mirabifis

Confirmer par le test à l'oxydase qui est nàgatif pour les Proteus

 

de

3. Présomption d'identification

· Colonies rose clair opaque : Présomption

Staphylococcus saprophyticus.
L'identification du micro-organisme isolé doit être poursuivie par des tests complémentaires.

· Colonies bleu-violet à violette : Présomption de Streptococcus agalactiae

L'identification du micro-organisme isolé doit âtre poursuivie par des tests complémentaires.

4. Absence de coloration caractéristique des colonies

L'identification du micro-organisme isolé doit être réalisée.

CONTROLE DE QUALITE

Protocole :

Les spécifications du milieu peuvent être testées vis-à-vis des souches suivantes :

· Escherichia colt ATCC® 25922

· Enterococcus faecalis ATCC® 29212

· Proteus miratillis ATCC® 12453

Résultats attendus :

Souche

Resultats à 33-37°C

Escherichia col)
ATCC® 25922

Croissance en

24 heures

Colonies rose à bordeaux

Eriteracoccus faecalis ATCC® 29212

 

Proteus mirabilis
ATCC® 12453

 
 

Remarque :

39

Il est de la responsabilité de l'utilisateur de prendre en compte la nature de l'application et la législation locale

en vigueur pour la mise en oeuvre du contrôle de qualité (fréquence, nombre de souches, température d'incubation... ).

PERFORMANCES:

La gélose chromlDTM CPS® (43821) a été comparée à la gélose chromIDTM CPS® (43541) et à d'autres milieux chromogènes commercialisés.

· Sur souches caractérisées d' E. cor/

Une étude a été réalisée sur 43 souches pures de E. con présentant des profils enzymatiques différents :

Sensibilité de détection :

 

Activité
enzymatique

Nb. d' E. Corr avec
colonie caractéristique

Nbre de
souches
E. Coll

a-GUR

a-GAL

4354i

43821

Autres milieux

8

-

+

0

8

8

5

+

-

3

4

0

30

+

+

30

30

30

Total =43

.

 

33143

42143

38/43

 

Sur le milieu chromIDTM CPS® (ref 43821) la détection directe de 97,7% des souches est rendue possible par la combinaison de plusieurs substrats chromogènes dans le milieu.

· Sur prélèvements cliniques

Deux études sur échantillons cliniques ont été réalisées : une en France et une en Allemagne.

Lors de ces études, seuls les échantillons à signification clinique (6,11,12) ont été pris en compte avec un seuil de numération 7 à 10 ° UFC/ml.

Les études n'ont montré aucune différence significative entre les milieux sur le plan de la fertilité, de la sensibilité ou de la spécificité.

Sur les 2 sites, la spécificité obtenue pour E. col/ est de 100%.

1. France,

Sur le site France, 1087 urines ont été ensemencés et incubés pendant 18 à 24 heures à 37°C sur 3 milieux différents: chromIDTM' CPS® (43821), chromIDTM CPS® (43541) et un milieu chromogène commercialisé.

93,65% des urines n'ont subi aucun prétraitement par conservateur.

A l'issue de cette étude, 229 échantillons avec signification clinique ont été obtenus et analysés.

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