II.9.5 Mise en Culture
Pour un isolement adéquat des streptocoques B, celles-ci
sont cultivées dans une gélose au sang de mouton et une
gélose chocolat.
Les prélèvements (gorge, anus, vagin, liquide
d'aspiration gastrique et prélèvements orificiels chez le
nouveau-né), hémoculture et LCR sont ensemencés en milieux
liquides (bouillon Todd-Hewitt) ou gélosés (Columbia enrichis
avec 5 % de sang). Ces deux types de milieux seront rendus sélectifs
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
par l'addition d'acide nalidixique ou de colistine pour
faciliter l'isolement des Streptocoques du groupe B des
prélèvements polymicrobiens.
Technique d'ensemencement
A partir d'un écouvillon chargé des
sérosités génitales :
1. Faire un ensemencement épais avec
l'écouvillon sur une moitié de l boite de pétri en
imprimant un mouvement de rotation à l'écouvillon. Les stries
d'ensemencement réalisées doivent être serrées et se
recouvrir de telle sorte que toute la demi-surface se trouve
ensemencée.
2. A l'aide de la pointe boutonnée d'une pipette
pasteur ou à l'aide de l'oëse d'une anse de platine,
réétaler un quadrant de la boite en chargeant la pointe sur la
surface ensemencée avec l'écouvillon.
3. Terminer en faisant une strie d'isolement sur le dernier
quadrant sans recharger la pointe de la pipette pasteur.
II.9.6 Identification
Les différentes espèces du genre Streptococcus
peuvent être identifiées grâce à l'utilisation de
quelques épreuves biochimiques et à l'observation de quelques
caractères morphologiques et culturaux. L'interprétation au
laboratoire des résultats des cultures réalisées à
partir des prélèvements cervico-vaginaux doit se faire dans un
sens restrictif, car il importe à tenir compte des renseignements
cliniques trop souvent vagues et de l'examen direct.
En pratique, la présence d'une flore de Doderleïn
abondante est un signe de normalité de l'écologie
bactérienne du vagin et rend inutile l'identification des autres
colonies bactériennes.
a) L'hémolyse autour des colonies
L'identification des streptocoques repose principalement sur
la nature de l'hémolyse autour des colonies isolées sur
gélose au sang.
Le SGB produit une hémolyse de type béta
appréciée sur gélose au sang. Elle apparaît comme
une zone claire, assez large (3-4mm) autour des colonies.
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
Parfois cette hémolyse est plus distraite et
apparaît plus nettement là où l'anse est enfoncée
dans la gélose en fin d'étalement.
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