B) Examen direct après culture
Il inclut l'état frais et la coloration de Gram
après culture. Le principe est le même que celui
réalisé avant culture et décrit un peu haut. Il permet de
voir la morphologie des bactéries, leurs mobilités et leur mode
de groupement. Les SGB sont de formes sphériques, immobiles et
regroupés en courtes ou longues chainettes.
C) Le test à la catalase
La catalase est une enzyme qui décompose l'eau
oxygénée ou peroxyde d'hydrogène (toxique pour certaines
bactéries) en eau et en oxygène gazeux. La méthode
consiste à prélever une colonie du germe à étudier
sur l'extrémité d'une pipette pasteur ou aëse de l'anse de
platine que l'on plonge ensuite dans une goutte d'eau oxygénée
à 3%. Le dégagement des bulles gazeuses signent la
présence de l'enzyme. Cette épreuve ne peut être
réalisée sur des colonies qui ont poussées sur
gélose au sang car la moindre trace d'hémoglobine entraine un
dégagement gazeux susceptible de fausser la réaction. Les
Streptocoques sont catalase négative alors que les Staphylocoques sont
catalase positive.
D) Groupage par le test au latex
L'identification définitive d'un streptocoque
â-hémolytique du groupe B repose sur la détection du
polysaccharide de groupe B par différentes méthodes :
précipitation (contre-immuno-électrophorèse, ring-test),
ELISA, immunofluorescence indirecte, coagulation ou agglutination de particules
de latex sensibilisées. L'examen du LCR, du sérum et des urines
pour rechercher le polysaccharide de groupe représente, en cas de
réponse positive, un moyen indirect de faire le diagnostic d'une
infection à streptocoque du groupe B.
E) Le CAMP test
En 1994, Christie,
Atkins, Munch et Petreson mettent en
évidence le comportement hémolytique particulier des SGB.
Portage vaginal et profil de sensibilité du
Streptococcus agalactiae aux antibiotiques chez la femme enceinte à
HGOPY
Staphylococcus aureus producteur d'une
hémolysine (bétalysine) augmente le pouvoir hémolytique du
SGB en présence du CAMP factor élaboré par ce dernier.
L'épreuve se réalise sur une gélose Columbia enrichie de
5% d'érythrocytes de mouton. La souche de Staphylocoque est
ensemencée sous forme d'une strie qui traverse la boite en allant par le
centre. La souche du Streptocoque est ensemencée selon une strie
perpendiculaire à l'ensemencement du staphylocoque et qui s'arrête
à 0.5 cm de celle-ci.
Après une incubation en atmosphère normale et
à 37°C pendant 24h, les souches qui donnent le
phénomène présentent au niveau de l'intersection des zones
hémolytiques :
> Une augmentation de la surface d'hémolyse qui
prend grossièrement une forme trapézoïdale.
Une augmentation de l'intensité de
l'hémolyse.
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