II.1.4.3.Considération
éthique
Une clairance d'éthique a été
obtenue auprès du CAMBIM. L'étude a été
menée conformément au Déclaration de Helsinki. Tous les
participants avaient donnés leur consentement écrit à
participer à cette étude et le refus de participer à
l'étude a été respecté (annexes 7). Les
prélèvements ont été effectués par des
techniciens spécialisés et les résultats obtenus ont
été exploités uniquement dans un but scientifique et
conservés dans la stricte confidentialité par usage de code donc
l'accès a été restreint uniquement aux membres de
l'équipe de recherche. Les participants de cette étude ont
été informés dans les moindres détails des
objectifs, méthodes, bénéfices, risques et
inconvénients potentiels liés à l'expérimentation
(annexe 6). Au cours donc de l'étude les patients avaient aussi pour
avantage de savoir leur statut d'obésité ainsi que des
bactéries responsables des infections intestinales ce qui leur avait
permis de consulter un médecin pour leur prise en charge.
II.1.5
Matériel biologique
Le matériel biologique comportait les selles et le sang
des patients venus se faire consultés pour des troubles
entériques.
II.1.6. Réactifs
Les réactifs nécessaires à cet effet
étaient constitués du kit de la protéine C-réactive
(TAYTEC, Canada), l'Alcool o 90° et le glycérol.
II.1.7.Appareils
L'appareillage était constitué comme
suit :
· D'un incubateur (THERMO Scientific, Thermo Fischer
Scientific, USA), qui permet d'assurer et de maintenir la température
optimale pour les cultures bactériennes,
· D'un microscope (OPTIKA Microscope, Contrada, Italie),
qui permet d'observer les bactéries isolées entre lame et lamelle
afin d'objectiver le critère de mobilité et le gram.
· D'une centrifugeuse (DRAGONLAB, Rheinland, Chine) qui
permet de préparer le sérum à partir du sang total
· Du spectrophotomètre (MaestroNano, MaestroGen,
USA), qui permet de mesurer la densité optique des échantillons
à analyser,
II.1.8.Milieux de culture et
antibiotiques
Dans cette étude, nous avons utilisé :
· La Gélose SS (Liofilchem SRL,
ContradaVoltarrosto, Italie) pour la recherche des espèces de
Salmonella et Shigella;
· La Gélose Eosine bleu de
méthylène(EMB) (Accumix, Mol, Belgique) pour la recherche des
entérobactéries ;
· La gélose Mac Conkey (Accumix, Mol, Belgique)
pour la recherche des entérobactéries et des espèces de
Pseudomonas ;
· La gélose Mannitol Salt agar (Accumix,
Mol, Belgique) pour la recherche des espèces de
Staphylococcus ;
· La gélose nutritive (Liofilchem SRL,
ContradaVoltarrosto, Italie) pour la purification et l'activation de toutes les
bactéries ;
· La gélose de Mueller Hinton Agar
(Accumix, Mol, Belgique) pour la réalisation des antibiogrammes ;
· Le bouillon de Mueller Hinton broth (Accumix,
Mol, Belgique) pour la conservation des isolats ;
· Les disques d'antibiotiques usuels (Biogram, Verna
industrial Estate, Verna Goa, Inde) ont été utilisés dans
la réalisation de l'antibiogramme.
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