Evaluation des procédés du fromage de soja vendu dans la ville de Cotonou (Bénin) à travers sa qualité

II-2-2-2. Echantillonnage pour analyses Physico-chimiques :

Les échantillons ont été prélevés le 15/02/2010 de 6h30 à 8h sur la production du 14/02/2010 par site et par procédé dans les quartiers à forte production (Agla ; Fidjrossè ; Gbèdjromédé ; Akpakpa.). Ces échantillons regroupés par procédé puis emballés sont acheminés au

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laboratoire de physico-chimie de la Dire ction de l'Alimentation et de la Nutrition Appliquée (DANA) oil ils sont soumis aux analyses.

Le nombre d'échantillon est de cinq (05) morceaux par site et par procédé.

Les analyses microbiologiques sont effectuées dans un environnement aseptique permet tant d'éviter ainsi des contaminations des produits lors des manipulations. Pour ces analyses, les étapes suivies sont :

II-2-3. Conduite des analyses

II-2-3-1. Préparation des Milieux

Le milieu EPS a été utilisé pour la préparation des dilutions successives 5g de peptone, 5g de triptone et 5g de chlorure de sodium ont été prélevés dans 1000ml d'eau distillée portée à l'ébullition

* le PCA : 23.5g de poudre de PCA a été prélevé dans 1000 ml d'eau distillée portée à l'ébullition

* Le OGA : 20.5g de poudre de OGA a été prélevé dans 500 ml d'eau distillée homogénéisée puis porté e à l'ébullition.

* Le VRBLA : 38.5g de poudre de VRBLA a été prélevé dans 1000 m d'eau distillée homogénéisée puis portée à l'ébullition.

Le Baird Parker : 31.5g de poudre de BP a été prélevé dans 500 ml d'eau distillée homogénéisée puis porté à l'ébullition

*Le GB : 7.5g d'Agar a été prélevé dans 500 ml d'eau distillée homogénéisée puis portée à l'ébullition.

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II-2-3-2. Stérilisation de la verrerie et des milieux de cul tures Stérilisation de verrerie

La verrerie à stériliser doit être préalablement bien lavée et bien séchée. En règle générale, la verrerie à ouverture étroite (tube, fioles, pipettes graduées...) est bouchée au coton cardé ; celle à ouverture large (verres à expérience, boite pétrie...) est emballée dans du papier solide. Le matériel ainsi préparé est déposé à l'intérieur du four pasteur. On prend soin d'entrouvrir les boîtes métalliques et les placer au fond du four pasteur. La sérialisation proprement dite consiste à :

Fixer le thermo

star entre 170 et 180°C puis allumer le four.

Surveiller le thermomètre : lorsque la température atteint une valeur comprise entre 170°C et 180°C, compter 30 à 60 minutes de chauffage. Arrêter le chauffage, attendre que la température redescende à 40°C Ouvrir la porte du four ;

Fermer les couvercles des boites métalliques ;

Retirer le matériel stérile ;

Stérilisation des milieux de culture et des diluants

Les milieux de culture sont repartis en flacon, en verre, remplis au ³/4 et bouchés comme indiqué pour la verrerie ou avec des caoutchoucs.

10 ml de diluant sont repartis dans des tubes à essais qui sont en bouchés dans les mêmes conditions que précédemment.

Le matériel ainsi préparé est disposé dans le panier métallique. la sérialisation proprement dite consiste à :

Remplir d'eau, le fond de l' autoclave, s'assurer que l'eau ne touche pas le fond du panier ;

Placer le panier rempli dans l'autoclave ;

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Fermer le couvercle en plaçant bien le joint du caoutchouc dans sa rainure. Serrer les vis de blocage du couvercle de manière uniforme, assez mais bloquer à fond ;

Ouvrir le robinet à purge d'air ;

Commencer à chauffer.

Surveiller le robinet de purge d'air jusqu'à ce qu'un jet de vapeur s'en échappe ; attendre 3 à 4 minutes que le jet sorte régulièrement jusqu'à ce que tout l'air contenu dans l'autoclave soit sorti ;

Fermer le robinet de purge presque entièrement ;

Surveiller le cadran de thermo manomètre : lorsque la température atteint 120°C pendant 15 minutes.

Arrêter le chauffage lorsque la température redescende à 100°C, ouvrir lentement le robinet de purge ; ce qui permet à l'air de rentrer dans l'autoclave pour que la pression soit la même à l'intérieur qu'à l'extérieur.

Laisser refroidir puis sortir avec précaution le panier contenant le matériel stérile.