2. Dosage des LIPASES
PANCRÉATIQUES
ü Principe
L'ordre des réactions impliquées dans le dosage
enzymatique direct de la lipase est le suivant :
1-2-D-dilauryl-rac-glycero-3-glutarique-(6'-methylresorufine)-ester
lipase
1-2-D-dillauryl-rac-Glycerol+glutarique-6'-methylresorufine-ester
OH- Acide glutarique + Methylresorufine
La vitesse de formation de methylersorufine est
proportionnelle à la concentration de lipase.
ü Composition des réactifs
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Réactif 1
tampon
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Tampon tris pH :
8,3 ......... .......................................40 mol/l
Colipase .................................................................>1
mg/l
Désoxychlorate ....................................................1,8
mmol/l
Taurdésoxychlorate ...............................................7,2
mmol/l
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Réactif 2
Substrat
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Tartrate pH :
4,0......................................................15 mmol/l
Substrat
lipase......................................................0,7 mmol/l
CaCl2 .....................................................................................0,1
mmol/l
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ü Procédure
1. Longueur d'onde 580 nm, température 37°C,
cuvette trajet otique de 1cm
2. Ajuster le zéro de l'instrument avec l'eau
distillée ou l'air
3. Pipeter dans la cuvette :
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Réactif blanc
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Echantillon
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Echantillon
Réactif 1
Réactif 2
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...
800 ul
200 ul
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10ul
800ul
200ul
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Suivre les commandes du spectrophotomètre en aspirant
la solution demandée une à une.
Valeur de référence : 10 à 45 UI/L
(unité internationale par litre).
II.2.6. Variables retenues
Pour l'élaboration de notre travail, trois variables
ont été pris en considération à savoir ; le
sexe des consommateurs chroniques d'alcool, leurs âges mais aussi
l'expérience dans la prise de l'alcool.
II. 2.7. Analyse Statistique
Nos données ont été regroupées
sous forme de fréquence, en suite elles ont été
commentées en utilisant la formule du pourcentage via SPSS.
 
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