Dosage des amylases et lipases pancréatiques chez les consommateurs chroniques d'alcool en zone de santé de Beni, cas de l'aire de santé Kasabinyole

C. Critère de jugement

ü Le résultat du dosage de l'amylase sanguine est pathologique lorsqu'il n'est pas compris entre 20 à 140 UI/L (unité internationale par litre).

ü Le résultat du dosage des lipases sanguines est pathologique lorsqu'il n'est pas compris entre 10 à 45 UI/L (unité internationale par litre).

II.2.5. Techniques

a. Technique de prélèvement

La technique est un moyen précis pour atteindre le résultat partiel à un niveau et à un moment donné de recherche.

Pour le prélèvement du sang, nous avons eu à prélevé au-moins 5 ml du sang veineux de chaque consommateur chronique de l'alcool avec une seringue graduée de 5 ml. Ce dernier était recueilli dans un tube à Héparine de Lithium où on devrait récupérer le sérum après centrifugation.

b. Technique d'analyse

1. Principes

Principe du spectrophotomètre

D'une manière générale, le spectrophotomètre repose sur la loi de BEER LAMBERT, consistant à déterminer l'absorbance d'une solution en lui faisant passé dans une cuve spécifique un rayon lumineux, d'où plus la solution est concentrée l'absorbance augmentera automatiquement.

2. Matériels et appareils

v Seringues

v Garrot

v Ouates imbibés d'alcool et secs

v Tubes à essai sans anticoagulant

v Spectrophotomètre

v Centrifugeuse électrique

v Gants

v Boite isotherme

3. Réactifs

Kits d'amylases et lipases

1. Dosage des á - AMYLASES PANCRÉATIQUES

ü Principe

La détermination cinétique-colorimétrique de l'activité de l'á - amylase se fait suivant la réaction :

10CNPG₃ 9CNP+ 1CNP₂+G₃+G á - amylase hydrolyse le 2-choro-4-notrophenol-á -D-maltrioside (CNP3) afin de donner du 2-chloro-4- nitriophonols (CNO) et 2-choro-4-nitriophenol-á -D- maltose (CNPG2) maltotriose (G3) et glucose (G).

La vitesse de production de CNP peut être lue par un lecteur à 450 nm et est proportionnelle à l'activité de l'á - amylase dans l'échantillon.

ü Composition du réactif

Tampon MES Ph 6.0.............................................100mmol/l

CNPG3............................................................2.25mmol/l

Sodium chloride...................................................350mmol/l

Calcium acétate......................................................6mmol/l

Potassium Thio cyanate..........................................900mmol/l

Azoture de sodium....................................................0.95g/l

ü Procédure

1. La longueur d'onde 450nm ; température 37°C ; cuvette trajet optique 1cm.

2. Ajuster le zéro de l'instrument avec l'eau distillée.

3. Pipeter dans une cuvette ;

	Sérum ou plasma
Réactif  Echantillon	1000ul 25ul

4. Suivre les commandes du spectrophotomètre en aspirant la solution demandée une à une.

Valeur de référence : 20 à 140 UI/L (unité internationale par litre).