2.2.5.2.1 Principe
Le CRP-LATEX est un test d'agglutination de basé sur
la détection quantitative et semi-quantitative de protéine
C-Reactive (CRP) dans le sérum de hamsters. Les particules de latex
couvertes d'IgG humain anti-CRP sont agglutinées quand ils sont
mélangés avec des échantillons contenant CRP (Pepys,
1981).
CRP est présent dans le sérum normal, qui
augmente significativement après la plupart des formes de blessures des
tissus, des infections bactériennes et virales, l'inflammation et
neoplasia malveillant.
La sensibilité de latex CRP est calibrée à
la référence matériel CRM470/RPPHS. Les
échantillons avec la présence de fibrine devraient être
centrifugés avant le test.
CRP Réactif CRP, Control+, Control-
Réactifs
· Particules de latex fixant des anticorps de type IgG
anti-CRP humain (pH 8,2 azide sodium 0,95 g/L).
· Contrôle positif : sérum humain, avec
concentration de CRP > 20 mg/L. Azide de sodium 0,95 g/L.
· Contrôle négatif : sérum animal,
azide sodium 0,95 g/L.
· Les latex de CEP sont calibrés a la
référence du matériel : CRM 470/RPPHS
Technique
Le dosae de la CRP est réalisé sur plasma apres
agitation sur un vortex mécanique à 80- 100 r.p.m pendant 2
minutes (Yeh ET, 2005 ).
Méthode quantitative
La sensibilité du test peut être réduite
à la température basse (Vaishnavi, 1996).
50 ìL de sérum est mis sur les cercle des la
plaque du test, une goutte (50 ìL) de réactif CRP-latex est
ajoutée sur les cercles de la plaque de test. Les gouttes sont
mélangées par une strie, en utilisant toute la surface de cercle
et en utilisant une différente strie pour chaque sérum et un
mouvement de rotation et réalisé à la plaque ; ensuite
l'agglutination est examinée pendant une période
n'excédant pas 2 minutes (Yamamoto S et al ; 1993).
2.2.5.3 Electrophorèse des protéines
sériques
C'est une méthode qui a pour but de séparer les
proteines sériques en fonction de leur charge et leur volume , sous
l'influence d'un courant électique en milieu tamponé et sur
support détérminé « l'Acetate de cellulose »
.
Les bandes réalisées dans ces conditions portent
le nom de Proteinogramme.
2.2.5.3.1 Principe
L'électrophorèse des protéines
sériques permet la séparation des protéines du
sérum en 5 fractions. La répartition de ces différentes
fractions apporte de nombreux renseignements qui aident au diagnostic dans le
cadre de syndromes inflammatoires, cirrhotiques, néphrotiques, certaines
maladies héréditaires, maladies auto-immunes, infections, cancers
et myélomes.
Les sérums obtenus à partir des animaux ont
été soumis à une électrophorèse sur
acétate cellulose (Helena et instrument, Helena Laboratories Beauront,
Texas, USA).
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