2.2.2 Organismes
Le staphylococcus aureus est un microbe qui vit sur la
peau et les muqueuses des personnes saines. Il provoque parfois des
infections.
Les SARM sont des types de staphylocoques aureus que la
plupart des antibiotiques sont incapables de détruire.
2.2.3 Animaux
Des jeunes hamsters âgés de 4 à 6 semaines
au début de l'expérience, ont été
élevés et hébergé aux installations animales de
l'Université. Ils ont été gardés dans des cages
dans des conditions standards (la température 26 °C, 50 % à
l'humidité relative de 60 %) avec l'accès libre à la
nourriture et l'eau potable acidifiée (le pH 3).
.
Ils ont été aléatoirement assignés
à 2 groupes expérimentaux (5 / groupe) un groupe alimenté
en sélénium et l'autre non alimenté.
2.2.4 Méthode d'infection
Les hamsters ont été infectés par une dose
de 107 bactéries/ml par voie intrapéritoniale
Figure 2.3 Injection par voie
intrapéritoniale
2.2.5 Analyses biologiques
2.2.5.1 Dosage des protéines totales
Le dosage des protéines totales a été
réalisé à l'aide de la méthode de Biuret (Gormol
,1949) utilisant le réactif Biuret amélioré par (Goodwin
et al ,1965) et (Flack C.P and Woollen ,1984).
2.2.5.1.1 Principe
Ce réactif est prévu pour la quantification in
vitro des protéines totales dans le sérum ou le plasma humain sur
des analyseurs de biochimie automatiques ou manuels.
Le total des protéines sert à suivre des
changements globaux des niveaux de protéines provoqués par
différents états des maladies. Ce dosage est habituellement
effectué en association avec d'autres tests tels que l'albumine du
sérum, les tests fonctionnels du foie ou l'électrophorèse
des protéines. La réaction du biuret est utilisée depuis
la fin du dixneuvième siècle, c'est la méthode
préférée des laboratoires cliniques par sa
simplicité, rapidité et fiabilité.
2.2.5.1.2 Technique
· On met 2.5 ml de biuret dans une cuve ajouté a 50
ìL de serum.
· Melanger la cuve dans le vortex.
· Les cuves ont été mise à l'abri de
la lumiere pendant 30 minutes.
· Enfin mesurer la DO à 520nm sur appareil (Coulour
wave C 07500 colorimeter WPA COMBRIDGE U.K CB40 F).
Figure 2.4 Dosage des protéines totales
(méthode de Biuret)
2.2.5.2 Dosage de la CRP par technique
d'immunoagglutination (Kit spin REACT S.A.U., Ctra. Santa Coloma, 7E-17176,
sant estere. De Bas, GL spain)
La proteine C - réactive ( CRP) , proteine
pentamérique synthétisée par le foie sous l'action des
cytikines ( essentiellement IL-6) est un marqueur de la réaction
inflammatoire connu depuis 1930. Cette proteine a la particularité de
precipiter en presence du polysaccharide (proteine C) du pneumocoque . elle
prépare la phagocytose en se fixant sur la bacterie et en activant le
complément ( opsonisation). La CRP est la proteine la plus sensible de
la phase aigue de l'inflammation , sa concenrtion augmentant tres rapidement
dans les processus inflammatoires. Son dosage est réalisé le plus
souvent par des techniques immunonéphélometrique et
immuno-turbidimétriques (Anales de Biologie clinique: 335-339).
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