1.3 Un test de présence-absence : La
méthode Colilert
C'est une méthode colorimétrique pour la
détection et la numération dans les eaux de boissons des
Escherichia coli à â-glucuronidase positive et des coliformes
à â-galactosidase positive.
Un volume de 100 ml d'échantillon d'eau est
mélangé dans une bouteille stérile avec le milieu de
culture Colilert®. Ce mélange est ensuite incubé pendant 24
h à 35 °C. Le milieu de culture Colilert® contient de l'ONPG
(ortho-nitrophényl-ß-galactopyranoside) et du MUG
(4-méthylumbélliféryl-ß-D-glucuronide). Lorsque des
coliformes totaux sont présents dans l'échantillon, l'ONPG est
utilisé par l'enzyme ß-D-galactosidase, une enzyme
spécifique au groupe des coliformes totaux. L'utilisation de l'ONPG
provoque l'apparition d'une coloration jaune dans le milieu de culture. Lorsque
E. coli est présent dans l'échantillon, le MUG est
utilisé par l'enzyme ß-D-glucuronidase, une enzyme
spécifique à E. coli. L'utilisation du MUG amène
une fluorescence bleue dans le milieu de culture lorsque ce dernier est
éclairé avec une lumière fluorescente d'une longueur
d'onde de 366 nm.
Cette méthode permet de détecter la
présence de coliformes totaux et fécaux ainsi que de E. coli
dans les échantillons d'eau.
1.4 Test à la membrane filtrante
Le principe est d'utiliser une membrane organique
ajustée à la taille du genre recherché afin
d'empêcher si possible son passage au cour d'une opération de
filtrage. Le composé filtré est testé pour observer les
variations biochimiques. Elle s'applique aux Coliformes et au Campylobacter.
La technique du filtre à membrane est une technique
très reproductible. Il peut être utilisé pour tester des
volumes relativement importants de l'échantillon et donne des
résultats numériques plus rapidement que la procédure
multitubes. La technique de filtration sur membrane est extrêmement utile
dans la surveillance de l'eau potable et une variété d'eaux
naturelles. Cependant, la technique a ses limites, en particulier lorsque les
eaux de tests à forte turbidité ou noncoliforme (fond) des
bactéries. Pour ces eaux ou lorsque la technique de filtration sur
membrane n'a pas été utilisé auparavant, il est
souhaitable d'effectuer des tests en parallèle avec la technique de
fermentation en tubes multiples afin de démontrer l'applicabilité
et la comparabilité.
1.5 Mesures du métabolisme
Par le dosage des produits du métabolisme on peut
établir une corrélation entre les productions du
métabolisme et la croissance bactérienne. Nous avons
l'exemple de l'acide lactique avec Lactobacillus : la
croissance du Lactobacillus est proportionnelle à la production
d'acide lactique.
Le métabolisme de la flore totale peut provoquer une
variation des propriétés du milieu.
Les mesures répétées de
l'impédance, la conductance et la capacitance peuvent renseigner sur la
présence de flore qui peut s'avérer utile pour le contrôle
d'aliment. Les deux principaux systèmes disponibles sont :
L'analyseur Mathus et le bactometer de Bioméreux. Elle S'applique
quasiment à tous les genres.
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