B.2/ Identification de sodium :
Principe :
Ce test permet de détecter la présence du sodium
dans la molécule de l'ECH.
Mode opératoire :
Dissoudre 0,1 g de la substance à examiner dans 2 ml
d'eau distillé, Ajouter 2 ml de solution de carbonate de potassium
à 15 % et chauffer à ébullition. Il ne se forme aucun
précipité. Ajouter 4 ml de solution de pyroantimoniate de
potassium et chauffer à ébullition. Laisser refroidir dans l'eau
glacée et frotter si nécessaire la paroi du tube avec une
baguette de verre. Il se forme un précipité dense. Les
composés de sodium donnent une couleur jaune intense sous flamme.
C/Essais :
C.1/ Détermination du pH :
Principe :
Le pH est un nombre qui représente conventionnellement
la concentration en ions hydrogène ou hydronium d'une solution aqueuse.
La détermination potentiométrique du pH est effectuée par
mesure de la différence de potentiel entre 2 électrodes plongeant
dans la solution à examiner ; l'une de celles-ci est une
électrode sensible aux ions hydrogène (le plus souvent, une
électrode en verre) et l'autre une électrode de comparaison (de
référence).
Mode opératoire :
- Peser 900 mg de l'ECH dans 30ml d'eau distillée pour
avoir une concentration finale de 30 mg/ml, puis agiter jusqu'à
dissolution ;
- Rincer l'électrode du pH mètre avec de l'eau
distillée ;
- Calibrer l'appareil avec les solutions tampon de pH
différents ;
- Rincer l'électrode du pH mètre avec de l'eau
distillée ;
- Plonger l'électrode dans la solution à examiner
et effectuer la lecture dans les mêmes conditions que pour les solutions
tampons. Effectuer toutes les mesures à la même température
(20 °C à 25 °C) ;
- Lire la valeur du pH indiquée dans l'écran du pH
mètre ;
- Rincer l'électrode et plonger le, dans la solution de
garde (KCI).
Expression des résultats :
La valeur du pH doit être comprise entre: 4,5 et 7,5.
C.2/Teneur en eau :
La teneur en eau est déterminée par un appareil de
KARL-FISCHER qui est composé d'un dosimètre, d'une
électrode et d'un godet.
Principe :
Le principe établi par FISCHER pour la
détermination de la teneur en eau repose sur réaction ci-dessous,
et selon laquelle l'iode en présence d'eau réagit avec le dioxyde
de soufre :
I2 + SO 2 + 2H2O 2HI + H2SO4
L'eau dissolve l'iode et le dioxyde de soufre dans un solvant
non aqueux (le méthanol). Cette réaction d'oxydoréduction
s'effectue rapidement surtout si on associe une base à cette solution
(la pyridine).
I2 + SO2 + H2O + 3C5H5N 2C5H5N-HI + C5H5N-SO3
Donc le réactif de KARL-FISCHER contient l'iode, du
dioxyde de soufre et de pyridine dans le méthanol anhydre, ce
réactif est sous forme d'une solution prête à l'emploi.
On appelle Facteur de réactif KARL-FISCHER, le nombre de
mg d'eau titré par ml de
réactif.
F= mg (eau) /ml (réactif).
La substance utilisée pour la détermination du
facteur est dihydrate de sodium (Na2C2H4O62H2O).
Mode opératoire :
- Vérifier si la solution Karl-Fischer dans le godet n'est
pas saturée ;
- Neutraliser cette solution jusqu'à élimination
totale des traces d'eau, puis noter le volume initial (Vi) indiqué dans
le cadran du dosimètre ;
- Introduire la pesée « P » à
l'intérieur du godet, le dosage se fera automatiquement ;
- La fin du dosage automatique sera indiquée par
l'allumage de la lampe située dans l'appareil ; - Enfin, noter le volume
final (Vf) du dosage indiqué dans le cadran.
Expression des résultats :
La teneur en eau dans la prise de masse de l'ECH est
déterminée par la formule suivante :
|
(Vf - Vi) × F
Teneur en eau (%) = × 100
P
|
F : Facteur de la solution de dosage Karl-Fischer en mg/ml d'eau
(F = 3.2431 mg/ml) ; Vf : Volume final en ml ;
Vi : Volume initial en ml ;
P : Poids de l'échantillon en mg.
Limites d'acceptabilité: La valeur du Teneur en eau doit
être comprise entre: 3,5 à 5 %.
C.3. Dosage par HPLC :
Même principe et mode opératoire cité pour
l'identification par HPLC de l'oxacilline sodique.
Expression des résultats :
Pour l'analyse quantitative, le calcul se rapporte sur les
airs des pics au même temps de rétention dans le chromatogramme du
STD est ce lui de l'ECH et cela pour calculer le contenu en ug/mg de C
19 H 19 N 3 O 5 S dans
l'échantillon.
Le dosage par HPLC est évalué par la relation
suivante :
T =
Avec :
T : Titre ;
AIR STD : Air ou surface du pic du standard ;
AIR ECH : Air ou surface de pic de l'échantillon ;
P ECH : Pesée échantillon, (mg) ;
P STD : Pesée standard, (mg) ;
PUIS STD : Puissance du standard (ug/mg).
La limite d'acceptabilité : l'oxacilline sodique contient
un équivalent qui doit être supérieur à 815 ug et
inferieur à 950 d'oxacilline (C 19 H 19 N
3 O 5 S) par mg d'échantillon.
| 
