I.2.A.1. Caractérisation du PA [oxacilline sodique]
:
L'oxacilline sodique est parmi les substances décrites
par la pharmacopée américaine (USP), donc nous allons appliquer
les méthodes de référence de cette dernière, en
respectant ses normes.
Cette caractérisation comporte les analyses suivantes :
A/Caractère :
A.1/Aspect :
À examiner par une simple analyse visuelle de la
fluidité et de la limpidité des liquides, de
l'homogénéité des poudres, et par la vérification
de la couleur de l'odeur et de la saveur.
A.2/Solubilité :
Principe :
La solubilité est la quantité (exprimée en
(g) ou bien en (mole) par (litre) ou par (kg) de solvant) de composé que
l'on cherche à dissoudre dans un solvant donné.
Mode opératoire :
Préparer une série de tubes à essai
contenant chacun une masse de la substance à examiner qui correspond au
terme descriptif par apport au solvant.
Ce test est effectué dans l'eau, et dans l'alcool
(Méthanol).
Expression des résultats :
Les indications de solubilité figurant sous la rubrique
« caractères » sont exprimées en termes ayant la
signification suivante pour une température de 15 °C à 25
°C.
Tableau (02) : Echelle exprimant la
solubilité d'une substance (Anonyme 7).
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Termes descriptifs
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Volumes approximatifs de solvant en ml / g de substance
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Très soluble
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Inferieur à 1
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Facilement soluble
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de 1 à 10
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Soluble
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de 10 à 30
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Assez soluble
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de 30 à 100
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Peu soluble
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de 100 à 1000
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Très peu soluble
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de 1000 à 10000
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Pratiquement insoluble
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Plus de 10000
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Le terme « partiellement soluble >> est
utilisé dans le cas d'un mélange dont seuls certains constituants
se dissolvent. Le terme « miscible >> est utilisé dans le cas
d'un liquide miscible en toutes proportions avec le solvant indiqué.
B/ Identification :
B.1/ Par HPLC :
Ce test est destiné d'une part à analyser
qualitativement l'ECH par identification et comparaison des temps de
rétention de la solution de STD et celle de l'ECH et d'autre part
à analyser quantitativement par détermination du titre en PA en
utilisant les aires de chaque pic de part et d'autre de l'ECH et du STD.
Principe :
En milieu hydro-organique, les solutés apolaire sont
exclus de la phase mobile et associent aux chaînes apolaires
greffées par effet hydrophobe.
Le solvant le moins polaire de la phase mobile s'adsorbe à
la phase stationnaire apolaire permettant le partage des solutés entre
la phase mobile et la phase liquide adsorbée.
Les temps de rétention des pics STD et ECH, doivent
êtes identiques.
Mode opératoire :
> Préparation de la solution STD
:
- Peser 109.4 mg de l'oxacilline sodique standard dans une fiole
jaugé de 200 ml. Puis ajuster jusqu'au trait de jauge avec de l'eau
distillée filtrée (double filtration) ;
- À l'aide d'un barreau magnétique agiter la
solution obtenue pendant 5 mn ;
- Prélever 10 ml de cette solution dans une fiole jauge de
50 ml, puis ajuster jusqu'au trait de jaugé avec l'eau distillée
filtrée (double filtration).
> Préparation de la solution ECH
:
- Peser 115.3 mg de l'oxacilline sodique échantillon dans
une fiole jaugé de 200 ml. Puis ajuster jusqu'au trait de jauge avec de
l'eau distillée filtrée (double filtration) ;
- À l'aide d'un barreau magnétique agiter la
solution obtenue pendant 5 mn ;
- Prélever 10 ml de cette solution dans une fiole jauge de
50 ml, puis ajuster jusqu'au trait de jaugé avec l'eau distillée
filtrée (double filtration).
> Préparation de la phase mobile
:
- Dissoudre 1.9 g de phosphate de potassium monobasique " KH2PO4"
dans 700 ml d'eau distillée ;
- Agiter la solution obtenue jusqu'à dissolution (environ
5 mn) ;
- Filtrer la solution obtenue (double filtration), et on obtient
alors la solution tampon ;
- Ajouter à la solution tampon (700 ml), un volume de 300
ml d'acétonitrile et un volume de 100 ml de méthanol.
> Conditions opératoires : -
Colonne type : C18 ;
- Détecteur : UV ;
- Longueur d'onde : 225 nm ; - Débit : 1 ml/min ;
- Pression : 80 bars ;
- Volume d'injection : 20 ul.
Procédé :
- Laisser circuler la phase mobile dans la colonne de l'appareil
pendant au moins 30 mn;
- Injecter séparément 20 ul pour la solution
standard et pour la solution échantillon dans le chromatographe au moyen
d'une micro seringue appropriée.
Expression des résultats :
Pour l'analyse quantitative, le temps de rétention de
l'ECH doit être identique au temps de rétention de STD.
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