I-8. Analyses statistiques
Dans notre étude, nous avons testé le pouvoir
incubateur de deux souches amibiennes à permettre la
prolifération d'une souche de Legionella pneumophila
sérogroupe 1. Afin de déterminer qu'il est le facteur qui a
influencé la vitesse spécifique de croissance de L.
pneumophila, une étude statistique de l'ANOVA a été
élaborée par le programme « SPSS 10.0» afin
d'étudier l'effet de la souche ; le MOI et l'effet conjoint des deux. De
même, pour comparer l'effet d'une co-culture après un traitement
thermique à différents degrés sur le maintien et la
récupération de la cultivabilité de la souche
Legionella pneumophila sérogroupe 1, un test de
corrélation a été effectué.
Etude de la relation entre des bactéries Legionella et
des amibes 14
Etude de la relation entre des bactéries Legionella et
des amibes 15
Chapitre 3: Résultats et discussions
RÉSULTATS
I-1. Validation de l'isolement des souches amibiennes
Figure 3: Photos des souches amibiennes isolées
dans différents types de cultures
Les amibes ont été isolées sur la
gélose non nutritive « NN-Agar »,les amibes ont
été collectées en grattant la surface des géloses
puis repiquées dans le milieu axénique PYG, une première
observation microscopique a été effectuée sur les amibes
du milieu gélosé puis une deuxième sur milieu liquide. Les
résultats de validation des isolements sont montrés dans les
photos ci-dessous.
Etude de la relation entre des bactéries Legionella et
des amibes 16
Chapitre 3: Résultats et discussions
I-2. Multiplication intra-amibienne de Legionella
pneumophila
L'objectif des co-cultures était de tester la
permissivité des amibes à L. pneumophila.
Parallèlement, il s'agissait de tester l'influence du rapport de
multiplicité d'infection sur la prolifération intra-amibienne de
L. pneumophila.
I-2-1. Témoins légionelles
La figure 4 représente le suivi des concentrations de
L. pneumophila sérogroupe 1 seule à une
température 28°C et aux concentrations initiales de 105
UFC/ml et 106UFC/ml. Ces concentrations correspondent aux
concentrations initiales en Legionella introduites pour les
co-cultures lors de nos essais, ce sont les concentrations en Legionella
qui ont été ajustées pour faire varier la MOI. Ces
témoins de L. pneumophila seule montrent une diminution des
concentrations bactériennes après 3 jours d'incubation dans le
milieu de co-culture composé de tampon amibe, en passent de « log 5
à log 3,63 » pour le MOI 0,1 et de « log 6 à log 5
» pour MOI 10. La bactérie n'est plus donc capable de
proliférer dans ce milieu. En revanche, elle ne conserve pas sa
cultivabilité pendant au moins 72 heures quelque soit le MOI.
Log UFC
MOI 0,1 MOI 10
Jours
J0 J1 J2 J3
Figure 4: Suivi de la cultivabilité de L. p
dans le milieu de co-culture aux MOI 0,1 et 10.
Etude de la relation entre des bactéries Legionella et
des amibes 17
Chapitre 3: Résultats et discussions
|