I-2-2. Témoins amibes
La figure 5, montre l'évolution des souches amibiennes
pendant 3 jours d'incubation en présence d'une concentration
d'Escherichia coli de 106 UFC/ml à 28 °C dans
le milieu de co-culture composé de tampon amibe
supplémenté de 10% de milieu PYG. La croissance des amibes est
exponentielle durant les premières 24 heures, pour les deux souches,
avec un nombre d'amibes/ml de 8,20.104 pour la souche-A1, et de
7,20.104 pour la souche-A2. Après 24h de co-culture, la
croissance des amibes entame la phase stationnaire. Toutefois, la vitesse de
croissance est variable d'une souche à l'autre en fonction de la
capacité prédatrice de chaque souche.
Amibes/ml
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9,00E+04
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8,00E+04
7,00E+04
6,00E+04
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5,00E+04
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4,00E+04 3,00E+04
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T-SA1 T-SA2
Jours
J 0 J1 J2 J3
Figure 5: Croissance des souches amibiennes (MOI 10) dans
le milieu de co-culture I-2-3. Permissivité des souches d'amibes aux
L. pneumophila
Afin de tester la permissivité des souches amibiennes,
les co-cultures ont été réalisées à des
ratios de 0,1 et 10. Les figures 6 et 7 montrent que les deux souches
testées permettent la prolifération de Legionella
pneumophila. Néanmoins, nous n'avons pas observé de
différences entre les deux souches. Il semble que les deux souches
amibiennes se sont montrées permissives à la souche de
L.pneumophila qui atteint environ « 8,676 unités log (UFC)
» en co-culture avec la SA1 et « 8,783 unités log(UFC) »
en co-culture avec la deuxième souche amibienne après 48h au
ratio de 10. Le constat est identique pour les co-cultures
réalisées à un MOI 0,1. Par ailleurs, la vitesse de
croissance observée entre les deux souches ne montre pas de
différence statistiquement significative. D'une manière
générale, nous avons noté que les souches d'amibes
testées sont permissives à Legionella pneumophila.
Etude de la relation entre des bactéries Legionella et
des amibes 18
Chapitre 3: Résultats et discussions
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Log UFC
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MOI 0,1
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8
7
6
5
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LP SA1
LP SA2
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4
3
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Jours
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J0 J1 J2 J3
Figure 6: Prolifération L.p en
Co-culture avec les deux souches à la MOI 0,1
durant 72H
d'incubation
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Log UFC
|
MOI 10
|
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10
9
8
7
6
5
4
|
|
LP SA1
LP SA2
Jours
|
J0 J1 J2 J3
Figure 7: Prolifération de L.p en
Co-culture avec les deux souches à la MOI 10
durant 72H
d'incubation
Les résultats indiqués dans les figures 8 et 9
ont montré que Legionella pneumophila a induit une inhibition
de la croissance des souches amibiennes. Elle est différemment
affectée en fonction de la souche amibienne et du ratio
(bactéries/amibes). Pour le MOI (0,1), nous avons observé que la
souche 1 est plus sensible à la cytopathogènicité de
Legionella pneumophila avec environ (1,8.104 amibes /ml
à 48h) par rapport à la souche 2 avec environ (2,4.104
amibes/ml). Inversement au la MOI de 10 où la souche 1 qui est la plus
résistante (4,4.104 amibes/ml) par rapport a
(3,2.104 amibes/ml) pour la souche 2 à 24h. Donc le
comportement des souches vis-à-vis de la résistance à
l'effet cytopathogène varie en fonction du ratio. L'analyse statistique
de la variance selon le test de Duncan, montre la présence
Etude de la relation entre des bactéries Legionella et
des amibes 19
Chapitre 3: Résultats et discussions
d'une différence significative entre les témoins
et les souches à différents ratios avec (p < 0,05), et une
différence significatif (p<0,05) à l'intérieur de la
SA2 entre les ratios 0,1et 10. Par contre entre la SA1 et la SA2 il n'y a pas
de différence ( p>0,05). Aussi bien, à l'intérieur de
la souche amibienne 1, le test a montré une différence non
significatif (p>0,05). Ces résultats sont une preuve que la
présence de la souche amibienne est essentielle à la
prolifération de L. pneumophila.
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Amibes/ml
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MOI 10
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8,0E+04 6,0E+04 4,0E+04 2,0E+04
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SA1
SA2
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0,0E+00
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Jours
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J 0 J1 J2 J3
Figure 8: Inhibition de la croissance des amibes sur 72
h de co-culture par L.p a un MOI de 10
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Amibes/ml
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MOI 0,1
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8,0E+04 6,0E+04 4,0E+04 2,0E+04 0,0E+00
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SA1
SA2
Jours
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J 0 J1 J2 J3
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Figure 9: Inhibition de la croissance des amibes sur 72
h de co-culture par L.p a un MOI de 0,1
Etude de la relation entre des bactéries Legionella et
des amibes 20
Chapitre 3: Résultats et discussions
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