1-5-Influence de la température sur
l'á-glucosidase
1-5-1- Température optimale d'hydrolyse,
énergie d'activation et Q10
L'a-glucosidase a eu une température
optimale d'hydrolyse de 45 °C dans le tampon acétate 100 mM pH 5,6.
De 30 à 50 °C, elle a conservé plus de 60 % de son
activité hydrolytique (Fig. 18). Le Q10 de
l'a-glucosidase, déterminé entre 30 °C et
40 °C selon Arrhenius a été de 1,31.
L'énergie d'activation (Ea) de l'a-glucosidase a
été de 36,67 kJ/mole (Tableau 9).
1-5-2- Inactivation thermique
L'étude de l'inactivation thermique de
l'a-glucosidase a permis de mettre en évidence une
baisse importante de l'activité hydrolytique de cette enzyme à
partir de la 40ème min de pré-incubation dans le
tampon acétate 100 mM pH 5,6 à 45 °C (Fig.
19). La demi-vie de cette enzyme à 45 °C a
été de 50 min (Tableau 9). A 37 °C,
l'a-glucosidase a conservé toute son activité
hydrolytique dans le même tampon acétate 100 mM pH 5,6 pendant
plus de 140 min soit plus de 2 h 30 min de temps de pré-incubation.
1-5-3-Dénaturation thermique
L'a-glucosidase a conservé 100 % de
son activité hydrolytique aux températures comprises entre 30 et
45 °C dans les conditions expérimentales.
Au-delà de 50 °C, la chute brutale de
l'activité enzymatique traduit une importante dénaturation de
l'a-glucosidase (Fig. 20).
1-5-4-Conservation au froid
Une conservation prolongée par congélation de
l'a-glucosidase purifiée du suc digestif de la larve de
Rhynchophorus palmarum (Curculionidae) contenue dans le tampon
acétate 100 mM pH 5,6 n'a pas modifié l'activité de
celle-ci, même au bout d'un an (Fig. 21).
Activite relative(%)
120
100
40
20
80
60
0
20 30 40 50 60 70 80 90
Température (°C)
Figure 18 : Température optimale d'hydrolyse de
l'á-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus
palmarum (Curculionidae)
La température optimale d'hydrolyse du
p-nitrophényl-á-glucoside a
été déterminée à différentes
températures (35 à 80 °C) dans le tampon acétate 100
mM pH 5,6. L'activité enzymatique a été
déterminée dans les conditions standard.
Activite relative (%)
120
100
40
20
60
80
0
0 20 40 60 80 100 120 140 160
Temps (min)
37°C 45°C
Figure 19 : Inactivation thermique de
l'á-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus
palmarum (Curculionidae) à 37 °C et à 45
°C
L'enzyme est pré-incubée aux températures de
37 et 45 °C pendant des temps compris entre 0 et 140 min.
L'activité résiduelle a été
déterminée dans les conditions standard.
120
Activite relative (%)
100
40
20
60
80
0
20 30 40 50 60 70 80 90
Température (°C)
Figure 20 : Dénaturation thermique de
l'á-glucosidase du suc digestif de la larve de Rhynchophorus
palmarum (Curculionidae)
L'enzyme a été pré-incubée pendant
10 min à des températures comprises entre 30 et 80
°C, puis refroidie à la température
ambiante. L'activité résiduelle a été
déterminée dans les conditions standard.
120
100
|
Activite relative (%)
|
80
60
40
|
20
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Durée de congelation à 0°C
(mois)
Figure 21 : Effet de la congélation sur de
l'á-glucosidase du suc digestif de la larve de
Rhynchophorus palmarum (Curculionidae) dans le tampon acétate
100 mM à pH5,6
Tableau 9 : Quelques caractéristiques de
l'á-glucosidase du suc digestif de la larve de
Rhynchophorus palmarum (Curculionidae)
Caractéristiques Valeurs
pH optimum d'hydrolyse 5,6
Force ionique Sans effet
Stabilité au pH 5,0 - 5,6
Température optimale d'hydrolyse (°C) 45
1/2 vie à 45 °C (min) 50
Energie d'activation (kj/mole) 36,67
Q10 1,31
| 
