Chapitre
2
Conduit a tenir devant un LCR
purulent
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1. L'examen cytobactériologique du LCR
1) Examen direct et culture du lcr
a) Culture bactériologiques
· a effectuer en premier
· ensemencer en isolement a la pipette boutonnée
0.1 ml de LCR non centrifugé sur :
- une gélose au sang cuit
(gélose « chocolat > supplémentée
en
factures de croissance
(hémine, nicotinamide adénine
dinucléotide, vitamines...) qui sera incubée dans l'air contenant
5-10 de Co2
- un milieu anaérobie cystéine de
Rosenow ou une gélose
Trypticase-Soja
additionnée de 10 % de sang qui sera incubée
sous
atmosphère anaérobie contenant 5 1 10 % de
co2.
- Une gélose ordinaire.
Tous ces milieux seront incubés au minimum pendant 48
heures (au maximum 4 fours) a 37 C°.
b) Examen cytologiques
· Homogénéiser le LCR par agitation et
introduire une goutte de liquide dans une cellule de Malassez recouverte d'une
lamelle : pour facilitez l'identification des cellules , placer sur la lamelle
une goutte de bleu de méthylène alcoolique saturé et
laisser évaporer avant de recouvrir la cellule de Malassez.
· Dénombrer les hématies et les
leucocytes par mm3 de liquide.
· Centrifuger le LCR restant et préparer des
frottis a partir du culot de centrifugation.
· Colorer une frottis par le May-Grunwald Giemsa pour
établir la formule leucocytaire.
· Colorer l'autre frottis par la méthode de gram
et rechercher la présence de bactéries.
Conduit a tenir devant un LCR
purulent
c) Examens biochimiques :
· Déterminer sur le surnageant de centrifugation
la Glycorachie , la Protéinorachie et
la Chlorurorachie.
d) Résultats a J O (transmettre en urgence)
· Leucocytorachie et formule leucocytaire.
· Présence ou absence de bactéries a
l'examen direct.
· Si présence de bactéries ,
préciser leur morphologie > ( bacille ou coupe ) et leur
affinité tinctotorial (gram positif ou gram négatif ).
· Glycorachie , protéinorachie et
chlorurorachie.
2) Examen des cultures, Identification, Antibiogramme (a J
I).
a) Lecture des cultures
L'orientation diagnostique sera sur
:
- L'aspect des c colonies bactériennes.
- La morphologie et l'affinité tinctoriale des
bactéries isolées
(bacilles ou coques, Gram positif ou
négatif).
- Les exigences nutritionnelles des microorganismes.
- La présence ou l'absence d'une Cytochrome-Oxydase ,
d'une
catalase.
b) Ensemencement d'une galerie d'identification
:
A partir des colonies isolées , effectuer les tests
biochimiques d'identification appropriés . A titre indicatif pour les 3
espèces principales responsables de méningites
(méningocoque , pneumocoque et hémophile) pratiquer les tests
suivants :
> Pour le méningocoque :
- Etude du métabolisme glucidique : glucose
(oxydation) , maltose
(oxydation) , saccharose ( par d'oxydation ).
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- Groupage antigénique a l'aide d'immunsérums
monovalents
spécifiques ;
> Pour l'hémophile :
- Exigence en hémine et nicotinamide adénine
dinucléotide.
- Détermination du biotype : présence ou
absence d'une uréase ,
d'une ornithine décarboxylase , production ou non
d'indole , positivité ou négativité du test a a
l'ONPG.
- Pour le pneumocoque :
- Sensibilité a l'optochine.
- Agglutination de particules de latex sensibilisées
par un
immunsérum polyvalent anti S. Pneumonie.
c) Etude de l'activité des antibiotiques sur
la couche isolée.
- a- titre indicatif tester l'activité de la
pénicilline G, amoxycilline
(ou ampicilline), pipéracilline , céfotaxime (
ou latamoxef , ceftriaxone ) , chloramphénicol , Tri-méthoprime
-sulfamethoxazole , gentamicine , tobramycine , amikacine , colistine ,
pefloxacine.
- Rechercher la présence d'une
beta-lactamasse si une souche de
Haemophilus influenzae est isolée.
d) Résultats a J I
- Culture bactériologique.
- Orientation diagnostique.
e) La cytologie du liquide purulent
Aspect purulent
-Plus de 1000 élé/mm3
-Majorité des poly nucléaires neuyrophile (pnn)
-Hypoglycorachie (rapport glycorachie /glycémie< 0,3)
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-Hyperproteinorachie (souvent >a 1g/l)
NB:La formule leucocytaire initial
d'un LCR de méningite purulente peut également panachée
(formules mixte : equilibre entr polynucléaires dans 10% des cas
f) La cytologie du liquide trouble
-Aspect trouble
-Plus de 500 élé /mm3
-Majorité de polynucléaire neutrophile
(pnn)
-Hypoglycorachie
-Hyperproteinorachie
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