Conclusion et Perspectives
glucosidase avec une activité égale à
3895 UT/ml suite au prétraitement du son de blé avant sa
fermentation.
Les résultats de la bioconversion ont montré que
le filtrat enzymatique est le meilleur biocatalyseur pour la libération
de l'hydroxytyrosol. Cette étude indique que la réaction
d'hydrolyse des margines brutes (fraîches) pendant 2 h par un filtrat
obtenu d'un bouillon de culture d'A. niger après 5 jours
d'incubation, permet de libérer l'hydroxytyrosol à une
concentration de 0,8 g/l de margine. Cette découverte indique que la
3-glucosidase est l'enzyme clé dans ce processus aussi l'enrichissement
en 3-glucosidase est essentielle pour la bioconversion de polymères des
margines pour évacuer l'hydroxytyrosol.
Les présents résultats ont montré
également qu'A. niger, T. trogii et T. atroviride croissent sur
un milieu de culture économique (le son de blé comme l'unique
source de carbone) tout en produisant une préparation d'enzyme
extracellulaire ayant des activités estérase, 3-glucosidase et
laccase. Évalués sur les margines brûtes (fraîches)
ayant de très basse charge de monomères phénoliques comme
l'hydroxytyrsol, ces jus de culture ont pu convertir des phénols
hydrolysables comme l'oleuropéine, ligstroside ou verbascoside en
monomères comme l'hydroxytyrosol. Les meilleurs résultats ont
été atteints en utilisant le jus de culture d'A. niger
présentant une forte activité 3-glucosidase (faible
activité estérase et aucune laccase) où 1,1 g/l
d'hydroxytyrosol a été libéré de margines
fraîches ne contenant que 0,05 g/l d'hydroxytyrosol naturellement libre.
Ainsi, la réaction de bioconversion proposée dans cette
étude, permettant la récupération de l'hydroxytyrosol
naturel, offre une alternative à la méthode d'extraction
conventionnelle et la fermentation microbienne. Cette méthode est
environnemental, douce qui permet également d'améliorer le
rendement d'extraction et de la qualité des extraits. La grande
efficacité de l'hydroxytyrosol comme un antioxydant puissant a
été confirmée par la méthode antiradicalaire
DPPH.
Dans la présente recherche, nous avons aussi
étudié les effets de (i) les conditions physico-chimiques (pH,
température, temps et agitation), (ii) le type de margine comme substrat
et (iii) la concentration d'enzyme sur la réaction de bioconversion des
margines. Une forte concentration de hydroxytyrosol (2,9 g/l) a
été obtenu après 30 min de réaction enzymatique de
margine à 50 O C, à pH 4,8 et en état agité. Cette
concentration n'est pas rapporté avant et c'est une des plus fortes
concentrations d'hydroxytyrosol rapporté après conversion
chimique ou biologique des margines.
Les résultats de l'immobilisation de l'enzyme ont
montré des modèles grossièrement semblables du profil du
pH et de température, l'optimum de ces paramètres n'est pas
significativement changé avec l'immobilisation. Un changement du profil
chromatographique
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