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Bioconversion enzymatique des composés phénoliques des effluents issus de l'extraction d'huile d'olive: une voie prometteuse de valorisation par la production de l'hydroxytyrosol naturel

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par Manel HAMZA KARRAY
Université de Sfax école nationale d'ingénieurs de Sfax - Doctorat en biologie 2013
  

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II-2-2 Evaluation des activités Ji-glucosidase et estérase dans le jus de fermentation

La production d'une préparation multienzymatique par A. niger sur le son de blé est améliorée par l'optimisation des paramètres opératoires de la culture et de la composition de milieu de culture comme il a été décrit dans la partie I présentée ci-dessus. La production des enzymes fongiques est contrôlée par la mesure de l'activité 3-glucosidase et estérase. L'activité 3-glucosidase et le contenu en protéine dans le milieu extracellulaire sont des indicateurs d'une colonisation fongique efficace, et cette activité croît avec le temps de culture (Fig. 16). Les résultats collectés suite à l'étude de la cinétique de production de 3-glucosidase et d'estérase ont été illustrés sur la Fig. 16b. Durant la production de 3-

86

Résultats et Discussion

glucosidase par le champignon ; une phase de latence est observée durant les 3 premiers jours de la fermentation. Par la suite deux phases peuvent être regardées ; d'abord une première phase avec une vitesse de production de â-glucosidase modérée; cette phase commence le quatrième jour (714 UI/ml d'activité â-glucosidase) et s'achève vers le septième jour (4233 UI/ml d'activité â-glucosidase). (Fig. 16b). A partir du huitième jour d'incubation de la culture on note une deuxième phase de production de â-glucosidase où l'activité â-glucosidase croit de 5938 UI/ml à 6380 UI/ml. Cette dernière présente la vitesse de production la plus intéressante. Concernant la seconde enzyme, l'estérase, la Fig. 16b montre que cette activité croît durant les deux premiers jours de la fermentation pour aboutir à 230 UI/ml, puis elle décroît à 140 UI/ml tout en restant presque stable jusqu'à la fin de la fermentation. Cette étude indique une colonisation efficace du champignon sur le son de blé avec une production efficace de â-glucosidase et d'estérase. De plus, les résultats ont montré que le jus de culture est un mélange multienzymatique estérase, CMCase, á-amylase, xylanase et â-glucosidase comme a été décrit dans la partie II-1 de ce chapitre. Ces enzymes sont connues de leurs rôles important dans la mobilisation des substrats phénoliques durant les bio-procès fongiques (Benoit et al., 2006). Pour cela, nous développeront une voie d'enrichissement des composés phénoliques simples dans les margines par le jus de culture produit par la fermentation d'A. niger. L'utilisation de ce jus de culture bien enrichit en â-glucosidase peut résoudre le problème des faibles concentrations en hydroxytyrosol dans les margines fraîches et les problèmes techniques industrielles en relation avec l'hydrolyse chimique des margines.

87

Résultats et Discussion

b

7000

250

6000

200

5000

150

4000

3000

100

2000

50

1000

0

0

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

â-Glucosidase Estérase

Temps de culture (Jours)

Protéines SR

2 3 4 5 6 7 8 9 10

140

120

100

80

60

40

20

0

10

8

6

4

2

0

Temps (jours)

a

/g

Figure 16: Evaluation de la quantité de sucre réducteur et de protéines dans le jus de
fermentation durant le temps d'incubation (a) et la production de 3-glucosidase et d'estérase
dans des erlenmeyers agités (b) sous les conditions optimales de culture à travers une
fermentation d'A. niger sur le son de blé.

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