Chapitre Iv ;
Resultats et Discussion
Résultats et Discussion
I. Résultats
I.1. Extraction de l'huile essentielle
Ø Résultat de l'extraction :
L'huile essentielle de Juniperus phoenicea obtenue par
hydrodistillation est un liquide visqueux, limpide d'une coloration
jaunâtre et à odeur forte caractéristique du
genévrier.
Ø Le rendement
Le rendement en huile essentielle de J. phoenicea local
est de 0,42. Il diffère d'un pays à un autre
(Derwich et al, 2010b). (Tableau N°
XI).
Tableau N° XI : Comparaison des rendements
en huile essentielle de J.phoenicea de différents pays.
|
Extrait
|
Tunisie
(Bouzouita
et al, 2008)
|
Maroc
(Derwich et al, 2011)
|
Egypte (El-Sawi et al, 2007)
|
Portugal
(Adams et al, 1996)
|
Espagne
(Adams et al, 1996)
|
Grèce
(Adams et al, 1996)
|
|
J .phoenicea
|
0,5 %
|
1,62 %
|
1,96 %
|
0,41
|
0,66 %
|
0,58%
|
I.2. Tests de confirmation
Les résultats des colorations de Gram et du test de
catalase effectués sur les différentes souches
bactériennes utilisées sont indiqués dans le
tableau N° XII:
Tableau N° XII : Résultats des
colorations de Gram et test de catalase réalisés sur les
différentes souches bactériennes utilisées :
|
Souches bactériennes
|
Gram
|
Catalase
|
|
Escherichia coli ATCC 25 928
|
· Bacilles
· Gram négatif
|
+
|
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
|
· Bacilles
· Gram négatif
|
+
|
Staphylococcus aureus ATCC 4330D
|
· Cocci
· Gram positif
|
+
|
Bacillus sp
|
· Bacilles
· Gram positif
|
+
|
|
Ces résultats confirment les caractéristiques des
souches testées.
I.3. Activité antimicrobienne
L'activité antimicrobienne des huiles essentielles et
composés phénoliques de J.phoenicea est
évaluée sur cinq souches microbiennes de référence
(quatre souches bactériennes et une souche fongique). Cette
activité est évaluée par la méthode
d'aromatogramme, le pouvoir antimicrobien de cette huile volatile et
composés phénoliques est obtenu par la mesure du diamètre
de zone d'inhibition en mm.
L'échelle de l'estimation de l'activité
antimicrobienne est donné par Mutai et al (2009)
; ils ont classé les diamètres de zones d'inhibition (D)
de la croissance bactérienne en 5 classes ;
· Très fortement inhibitrice : D e30mm
· Fortement inhibitrice : 21mmd Dd 29mm
· Modérément inhibitrice ; 16mmdDd20mm
· Légèrement inhibitrice : 11mmdDd 16 mm
· Non inhibitrice : D< 10
I.3.1. Activité antibactérienne de l'huile
essentielle
Résultats du pré-test
Les résultats des pré- tests sont
représentés dans le Tableau N°
XIII
Tableau N° XIII: Résultats obtenus
des pré-tests
|
Souches bactériennes
|
Résultats
(Activité)
|
D (mm)
|
E1 (mm)
|
E2 (mm)
|
E3 (mm)
|
|
Escherichia coli 25 928
|
+
|
14.0 mm
|
9mm
|
9mm
|
11mm
|
|
Pseudomonas aeruginosa 27853
|
-
|
/
|
/
|
/
|
/
|
|
Staphylococcus aureus 4330D
|
++
|
31.78 mm
|
15mm
|
10mm
|
10mm
|
|
Bacillus
|
+
|
9.0 mm
|
NT
|
NT
|
NT
|
+: HE active. ++ HE très active.
- HE n'est pas active. /: Pas de zone. NT :
Non testée.
E 1 : Diamètre de zone d'inhibition de test 1
E 2 : Diamètre de zone d'inhibition de test 2
E 3 : Diamètre de zone d'inhibition de test 3
E 1, E 2, E 3 : l'HE diluée en 1/10 dans le DMSO
Résultats des tests
I.3.1.1. Aromatogramme sur milieu solide
Tableau N° XIV: Résultat de
l'activité antibactérienne de l'HE de J.phoenicea sur
milieu solide
|
Souches
|
Zones
d'inhibition
(D1) en mm
|
Contrôle positif
|
Zones
d'inhibition
fonction du taux
de
dilution
(D2) en mm
|
|
TE
|
CN
|
SXT
|
|
Escherichia coli ATCC 25 928
|
11 mm
|
25mm
|
R
|
28mm
|
00
|
|
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
|
-
|
NT
|
NT
|
NT
|
NT
|
|
Staphylococcus aureus ATCC 4330D
|
19,5 mm
|
25mm
|
26mm
|
30mm
|
19 mm
|
|
Bacillus sp
|
16 mm
|
28mm
|
25mm
|
15mm
|
11 mm
|
- Pas d'activité. NT : Non Testé. R :
Résistance.
Les résultats de l'activité antibactérienne
de l'HE de J.phoenicea utilisant la méthode des disques sur
milieu gélosé ont montré que l'HE exhibe une
activité contre trois souches bactriennes sur quatre germes
testés en dépit de leur morphologie et de leur Gram. En effet
l'HE de J.phoenicea exerce une forte activité sur les
bactéries à Gram positif, comme on peut le voir dans le
Tableau N° XIV, S.aureus 4330D est la souche la
plus sensible avec une zone d'inhibition maximale de 19,5 mm, suivie
de Bacillus sp avec 16 mm et une zone minimale de 11 mm pour E
.coli 25 928 . Nous avons enregistré une absence d'activité
sur Pseudomonas aeruginosa 27853 (Fig. 11).
Toutefois, des zones d'inhibition ont été plus faibles
que celles des antibiotiques, qui ont montré une inhibition très
forte de la croissance bactérienne. (Fig. 12).
Pour les zones d'inhibition obtenues à partir de l'huile
diluée en (1 :2, 1 :4, 1 :8 et 1 :16),
nous avons remarqué une
inhibition de croissance maximale pour l'huile diluée en 1 :2 ,
pour
S.aureus 4330D une zone d'inhibition de 19 mm de
diamètre , Bacillus sp 11 mm de
diamètre , et sur E. coli 25 928, l'huile
diluée n'est pas active avec 0, 00 mm de diamètre. Les
résultats ont montré que l'activité diminue avec les
dilutions. (Fig. 13).
Figure N° 11 : Activité
antibactérienne de l'HE (1 ,2 ,3 tests en triple. 4 : l'HE diluée
dans le DMSO à 1/10) .A : E. coli 25 928 .B : Ps.aeruginosa
27853 .C : S.aureus. 4330D. D : Bacillus sp.
Figure N° 12 : Comparaison entre les
antibiotiques et l'HE de J.phoenicea. A : E. coli 25 928 .B :
S.aureus. 4330D. C : Bacillus sp. HE : Huile Essentielle. CN
: Cefaléxine, TE : Tétracycline. SXT :
Trimethoprimsulphamethoxazol.
Figure N° 13 : Activité
antimicrobienne en fonction du taux de dilution de l'HE. A : E. coli
25 928 .B : Ps.aeruginosa 27853 .C : S.aureus. 4330D D :
Bacillus sp.
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