II.3.1. 3. Activité de l'HE en phase gazeuse
(Microatmosphére)
Dérivée de la méthode
précédente le procédé est techniquement proche de
celui des aromatogrammes. La différence réside principalement
dans la position du disque imprégné. Dans cette technique, le
disque est déposé au centre du couvercle de la boîte de
Pétri, renversée pendant la durée de l'expérience.
Celui-ci n'est donc plus en contact avec le milieu gélosé
(Fig. 8) (Pibiri ,2006).
Figure N° 8 : Illustration de la
méthode des micros atmosphères (Zaika,
1988)
Mode opératoire
Selon Zaika(1988) ; Pibiri (2006) :
- Un disque de papier Whatman (de 6 mm de diamètre)
imprégné dans 10 ul d'huile essentielle est déposé
au centre du couvercle d'une boîte de pétri contenant la
gélose M-H ensemencée.
- Laisser diffuser durant 1 heure.
- Incubation durant 24 heures à 37C°.
- Le test est effectué une seule fois.
Le but de cette méthode est d'exploiter les
propriétés de la phase volatile des huiles essentielles. Et de
déterminer l'effet de l'HE des feuilles de J.phoenicea sur les
souches testées.
II.3.1. 4. Activité en fonction de dilution
L'activité en fonction de dilution est
estimée conformément aux procédures publiées par
(Koneman et al, 1997 ; Derwich et al ,2010). Elle n'est
évaluée que pour les microorganismes qui affichent une certaine
sensibilité.
- Dilution de l'HE dans le Diméthylsulfoxyde
(DMSO) (1 :2 ; 1 :4 ; 1 :8 et 1 :16)
(Fig.9).
- imprégner des disques de papier Whatman (de 6 mm
de diamètre) dans 10 ul de chaque dilution et déposer sur la
gélose M-H ensemencée de la suspension bactérienne par
écouvillonnage.
- Un contrôle négatif est également
effectué en utilisant un disque de papier immergé dans 10 ul de
DMSO pour vérifier l'activité possible de ce solvant contre les
bactéries testées.
- Diffusion de l'extrait durant 1 heure.
-
Incubation à 37 C° durant 24 heures.
Figure N° 9 : Schéma de dilution de
l'HE.
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