II.3.2- Isolement des spores de CMA
Cent grammes de chaque échantillon de sol sec ont
été prélevés pour l'isolement des spores de
champignons mycorhiziens qui a été réalisé suivant
la méthode de tamisage humide décrite par Gerdemann et
Nicholson (1963). La technique consiste à mettre en suspension
100g de sol dans 1 litre d'eau afin de séparer les propagules fongiques
des particules du sol. La suspension de sol a été versée
sur une série de tamis disposés l'un au-dessus de l'autre dans
l'ordre décroissant des diamètres de mailles de 500, 200, 90 et
45um. À l'issu de cette étape, les débris
végétaux, les cailloux et les fragements de racines sont retenus
dans le tamis de 500 um. Les fractions retenues dans les tamis de 200, 90 et
45um de diamètre de mailles ont été par la suite
transférées séparément dans des tubes de
centrifugation. Pour chaque fraction, une solution de saccharose à 50 %
a été ajoutée dans chaque tube. Le mélange a
été centrifugé à 2000 rpm pendant 10 min. Le
surnageant, qui contient les spores et les fines particules du sol a
été récupéré. Ce surnageant a
été reversé sur la colonne de tamis de 200, 90 et 45um de
diamètre de mailles et le culot a été rejeté. Les
spores contenues dans chaque tamis ont été rincées
à l'eau de robinet pour éliminer le saccharose. Elle ont
été ensuite récupérées dans une boîte
de Pétri de 9,5 cm de diamètre dont le fond est tapissé de
papier filtre quadrillé.
II.3.3- Détermination de l'abondance des spores
dans chaque échantillon de sol
Les boîtes de Pétri contenant le filtrat de
chaque tamis ont été placées sous une loupe binoculaire
pour observer les spores. Dans chaque boite de Pétri, les spores ont
été comptées par types en fonction de leurs couleurs et de
leurs tailles. A l'aide d'une pipette Pasteur, les types de spores ont
été séparés et déposés dans
différentes boîtes de Pétri sur du papier filtre
humidifié avec une solution physiologique constituée de NaCl
à 9 %. Pour chaque zone d'échantillonnage, la densité des
spores a été ensuite déterminée. Elle se
définit comme étant le nombre de spores dans 100g de sol sec
(spores/100g de sol). L'abondance relative (AR) a
été également déterminée pour chaque type de
spore (Johnson et al., 1991) par la formule suivante
:
Nombre total d'un type de spore
observé dans tous les sols
AR = x 100
Nombre total de spores observées dans tous
les sols
| 
