VI-1-1-2- Pour les analyses physico-chimiques :
En plus des étapes déjà décrite
pour les analyses microbiologiques, nous avons ajouté une phase
d'extraction en utilisant un papier WATMAN pour récupérer la
phase aqueuse qui nous sera utile lors de la manipulation. (Rodier 1996).
VI-1-2- Préparations des dilutions :
Pour les échantillons des sols, il convient de
pratiquer plusieurs dilutions. Ainsi après avoir
homogénéisé par agitation mécanique les
échantillons à analyser, 10 ml de chaque échantillon est
prélevé à l'aide d'une micropipette, puis dilue dans un
flacon contenant 90 ml d'eau distillée stérile. A partir de ce
flacon, on procède de la même manière à des
séries de dilution donnant une progression géométrique de
10-1. En suivant la même technique et en changeant le
cône de la micropipette à chaque passage on prépare a
partir de chaque dilution la suivante jusqu'à 10 -6. (Rodier
1996).
Ensuite l'ensemencement se fait par profondeur,
c'est-à-dire qu'on verse 1 ml de l'échantillon dans une boite de
pétri ensuite on verse le milieu de culture et on
homogénéise. (APHA et al., 1998).
VI-2- Méthodes d'analyses bactériologiques
:
Les analyses bactériologiques ont concerné le
dénombrement des germes
totaux, coliformes fécaux, coliformes totaux,
streptocoques, anaérobies sulfito réducteurs, staphylococcus,
pseudomonas et salmonelle.
Ces germes ont été recherchés par la
méthode d'ensemencement en profondeur.
Les milieux de culture utilisés ainsi que les conditions
d'incubation des différents germes recherchés sont
représentés dans le tableau suivant.
Tableau 1 : milieux de culture et
conditions d'incubation des germes recherchés
Paramètres
|
Milieu de culture
|
Incubation
|
observations
|
Référence normative
|
-Coliformes Totaux
|
Tergitol
|
37 °C! 24h à 48 h
|
Dénombrement de toutes les colonies de couleur rouges
briques.
|
ISO 9308-1
|
-Coliformes Fécaux
|
Tergitol
|
44 °C! 24h à 48 h
|
Dénombrement de toutes les colonies de couleur rouges
briques.
|
NM 03.7.003
|
|
37
|
|
|
-
Streptocoque s Fécaux
|
Slanetz et bartley
|
37 °C/ 24h à 48 h
|
Dénombrement de toutes les colonies de couleur roses.
|
ISO 7899-2
|
-Germes Totaux
|
Plate Count Agar
|
37 °C et 22 °C/ 24 h à 48h
|
Dénombrement de toutes les colonies.
|
ISO 6222
|
-Anaérobies Sulfito Réducteurs
|
SPS
|
37 °C/ 24h à 48 h
|
Dénombrement de toutes les colonies de couleur noires.
|
ISO 6461-2
|
-
Staphylococc us
|
Chapman
|
37 °C/ 24h à 48 h
|
Dénombrement de toutes les colonies de couleur jaunes
et
roses.
|
|
- Pseudomonas
|
Cétrimide
|
37 °C/ 24h à 48 h
|
Dénombrement de toutes les colonies de couleur
verdâtres.
|
MMA 1997
|
-Salmonella
|
Hektoen
|
37 °C/ 24h à 48 h
|
Dénombrement de toutes les colonies de couleur Colonies
bleuvert à centre noir.
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NM 03.7.050
|
|
38
|
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VI-3-Etude de caractère morphologique
:
|