B) METHODES
a)
Cultures cellulaires
Les cellules de lignées HL-60 et K562 sont
ensemencées à la concentration de 3x105 cellules par
ml et les cellules Cos-6 à la concentration de 4x105 cellules
par ml.
Les cellules HL-60 et K562 sont cultivées en RPMI 1640,
additionné de sérum de veau foetal (SVF,
décomplémenté par la chaleur (20 min. à 56°C))
respectivement à 15 et 10 %, de glutamine 2 mM et de
Pénicilline/Streptomycine à 100 ug/ml. Les cellules sont
maintenues en phase exponentielle de croissance par une dilution, deux fois par
semaines.
Les cellules adhérentes Cos-6 sont
cultivées en DMEM, additionné à 6 % de SVF, de glutamine 2
mM et de Pénicilline/Streptomycine à 100 ug/ml. Les cellules sont
maintenues en phase exponentielle de croissance par une dilution, deux fois par
semaines, après un lavage avec le milieu sans sérum et un
décollement par deux fois une addition de 1 ml de trypsine pendant 5
min. à 37°C.
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