IV -5-4- Détermination des Streptocoques
fécaux :
> Prendre 9 tubes de Rothe.
> Pipeter et verser 1 ml à partir de chaque dilution :
de l'eau d'entrée (10-1, 10-3,
10-5), l'eau au niveau de décanteur et de la sortie
( 10-2 , 10-4 , 10-6 )
> Incuber les 9 tubes dans une étuve à
T=37°C (la lecture après 48 h).
> Si la lecture est (+) (une trouble présente sur les
tubes).
> Prendre 9 tubes de Litsky.
> Pipeter et verser 1 ml à partir du tube
précédent de Rothe sur les 9 tubes de Litsky.
> Incuber les 9 tubes dans une étuve à
T=37°C (la lecture après 48 h)
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Identification les tubes positives : présentant un
trouble microbien
Test de confirmation :
ROTHE positif
Repiquage sur milieu EVA (LITSKY)
milieu EVA
49
Matériels et méthodes
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L'eau a
Analysé
Test présomption :
1 ml dans chaque tube 1 ml dans chaque tube 1 ml dans chaque
tube
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10 ml ROTHE S /C 10 ml ROTHE S /C 10 ml ROTHE S /C
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+cloche de durham dans chaque tube
Incubation à 37 °C pendant 24 à 48 heures
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Résultat
Incubation à 37°C pendant 24 heures
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Résultat
S'il y a un trouble microbien avec présence d'une
pastille violette au fond du tube
Présence de Streptocoques
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Figure 19: Recherche et dénombrement
des streptocoques fécaux
IV -5-5- Dénombrement du Staphylococcus aureus :
? Prendre 9 tubes de GC.
? Pipeter et verser 1 ml à partir de chaque dilution : de
l'eau d'entrée
(10-1, 10-3,
10-5), l'eau au niveau de décanteur et de la sortie
( 10-2 , 10-4 , 10-6 )
? Incuber les 9 tubes dans une étuve à T=37°C
(la lecture après 24 h).
? Après 24 h prendre 9 boites de pétris de
Chapman.
Matériels et méthodes
> Pipeter et verser 2gouttes à partir de chaque
dilution des tubes de GC sur les 9boites.
> Incuber les 9 boites dans une étuve à
T=30°C (la lecture s'effectue après 24 h).
L'eau d'entrée l'eau de décanteur l'eau de
sortie
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10 ml GC 10 ml GC 10 ml GC
1ml
50
10-1 10-3 10-5
10-2 10-4 10-6 10-2 10-4
10-6
Incubation à 37 °C pendant 24 à 48 heures
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Résultat
Identification les tubes positives : présentant un
trouble microbien -verser 2gouttes de chaque tube (GC) dans chaque boitte
(CHAMPAN).
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
Incubation à 30 °C pendant 48 heures
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Dénombrer les colonies lenticulaires en masse.
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
Figure 20 : Recherche et dénombr de
Staphylococcus aureus.
IV -5-6- Dénombrement de la flore fongi otale
:
> Prendre 9 boites de pétri de OGA.
> Pipeter et verser 2gouttes a partir de chaque dilution: de
l'eau d'entrée (10-2, 10-4,
10-6), l'eau au niveau de décanteur et de la sortie
( 10-1 , 10-3 , 10-5 ) sur
les 9 boites.
Matériels et méthodes
? Incuber les 9 boites dans une étuve à
T=30°C (la lecture après 48 h)
L'eau d'entrée l'eau de décanteur l'eau de
sortie
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10-2 10-4 10-6
10-1 10-3 10-5 10-1 10-3
10-5
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Ajouter environ 20 ml d'OGA, Laisser solidifier sur paillasse
Puis verser 2gouttes de chaque dilutions au niveau des boites
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Incubation à 30 °C pendant 72 heures
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51
Résultat
Dénombrer les colonies lenticulaires en masse.
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Figure 21 : Recherche et dénombrement de
la flore fongique.
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